從基因到抗體
DNA免疫通過避免所有蛋白質生產步驟來允許體內抗原產生,并使用疏水性蛋白質提供更好的結果。抗原通過所有翻譯后修飾顯示在其自然構象上,與細菌或酵母生產相比,質量顯著提高。DNA免疫是一種強大的替代方案,可縮短項目持續時間并增加項目成功的機會,以獲得高度特異性的構象抗體。
Covalab艾美捷丨協議概述:
基因克隆:
從定制質粒中提取或從核序列中從頭合成。針對體內 DNA 矢量化優化的專有質粒。
免疫:
8只小鼠獨-家63天方案隨時間的免疫反應性比較。
繡線菊一代:
脾細胞與骨髓瘤細胞系融合。
ELISA 對生長中的細胞雜交瘤進行測試,以確認雜交瘤的陽性穩定性。
雜交瘤選擇:
通過限制稀釋來接種細胞。
ELISA測試以確認陽性克隆和抗體生產穩定性。
完-全同種分型和冷凍。
詳細協議:
基因克隆:
開發程序的第一步包括質粒制備。質粒可以由Covalab的服務設計、合成和克隆,也可直接發送。
然后將靶序列整合到Covalab針對體內DNA矢量化進行優化的專有載體中
動物免疫:
用質粒轉染動物。蛋白質過度表達會導致免疫反應。根據專門為項目開發的檢測方法分析測試出血,以便在必要時調整方案。在免疫反應低的情況下,可以進行額外的注射和/或出血。
雜交瘤生成:
在根據Covalab的ELISA測試和客戶結果選擇合適的動物后,開始提取其分泌免疫球蛋白的淋巴細胞。隨后篩選細胞以分離分泌單克隆抗體的單細胞。
雜交瘤選擇:
開發過程的最后一步包括使用限制稀釋方法接種先前選擇的雜交瘤,以便將克隆彼此分離。然后進行ELISA測試,以鑒定以穩定方式產生預期抗體的克隆,然后再對用戶選擇的克隆進行完整表征。
Covalab專注于抗體研發領域,涵蓋抗體和試劑盒。擁有多種針對流行和罕見靶標的一抗,涉及多種應用領域,如癌癥,表觀遺傳學,細胞信號傳導,心血管等疾病的生物標志物,神經系統,離子通道,微生物學,病毒學等。還有特色的應用于模式動物斑馬魚的抗體。此外還有各種ELISA試劑盒,ELISPot試劑盒,FluoroSpot試劑盒等。艾美捷科技是Covalab的中國代理商,為科研工作者提供優質的產品與服務。
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