細胞名稱:C6(大鼠膠質瘤細胞)實驗方法
細胞形態
成纖維細胞樣
背景描述
膠質細胞株C6是由Benda等用N-亞硝基甲脲誘導的大鼠膠質瘤克隆,并經過一系列的體外培養和動物傳代交替后建成的。C6細胞表達S-100;產生生長激素;糖皮質激素作用下可以產生磷酸甘油脫氫酶。當C6細胞從低密度生長到滿瓶時,S-100產量增加10倍。
生長培養基
Ham's F-12K(貨號:PM150910)+15% HS(貨號:164215-100)+2.5% FBS(貨號:164210-500)+1% P/S(貨號:PB180120)
培養條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
優勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等
2、*,專業的細胞培養技術指導
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操作步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
髓過氧化物酶抗中性粒細胞胞質IgG抗體 Myeloperoxidase/c-ANCA
兔抗小鼠IgA抗體 Mouse IgA
*蛋白激酶C底物Marcks抗體 MARCKS
腸道分化干細胞MATH-1蛋白抗體 MATH1
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶MKK7抗體 Phospho-MKK7 (Ser271 + Thr275)
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶MKK6抗體 Phospho-MEK6 (Ser202)
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體 Phospho-MEK4 (Ser80)
胺單克隆抗體 Methamphetamine(4D2)
線粒體鐵轉運蛋白1抗體 Mitoferrin 1
磷酸化原癌基因c-Met抗體 phospho Met (Tyr1365)
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體 phospho-MEK1 (Ser298)
甘露聚糖結合凝集素*肽酶1抗體 MASP
胃動素受體抗體 MTLR
特異性MLT5蛋白抗體 MLT5
軟骨基質蛋白抗體 Matrilin 1
絲裂原活化蛋白激酶MKK7抗體 MEK7
甘露聚糖結合凝集素*肽酶2抗體 MASP2
微小染色體維持缺陷蛋白2抗體 MCM2
微小染色體維持缺陷蛋白3抗體 MCM3
基質金屬蛋白酶-26抗體 MMP-26
絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體 MEK4
MYOZ抗體 Myozenin 1
單核細胞趨化蛋白2抗體 MCP-2
甲基化樣蛋白11抗體(N端) METTL11A
大腸癌腫瘤突變蛋白抗體 MCC
*/*蛋白激酶MARK4抗體 MARK4
苯甲酸肽水解酶抗體 MEP1A
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體 phospho-MEK2(Thr394)
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶3抗體 phospho-MEK3(Thr222)
絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體 MEK5
飲料甘素(dulcin)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒 0.1mg
Amylin 糖尿病相關肽(胰島淀粉樣肽) 糖果甘素(dulcin)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒 0.5mg
APP695-770/APP17肽 (Amyloid protein precursor) 淀粉樣肽前體蛋白(17肽抗原) 食物甘素(dulcin)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒 0.5mg
Neuroprotective peptide/Gly-HN(Nuclear-encoded Humanin [HN(N)] Gly14) 神經保護肽 藥品甘素(dulcin)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒 0.5mg
Amylin(1-37)Diabetes Associated Peptide (DAP), amide, human 糖尿病相關肽(胰島淀粉樣肽) 化妝品甘素(dulcin)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒 0.5mg
CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜氨酸環肽 咖啡甘素(dulcin)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒 0.5mg
CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜氨酸環肽 飲料甘素(dulcin)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒 0.5mg
GLP-1(Glucagon-like peptide-1)(7-36)peptide 胰高血糖素樣肽-1(多肽) 糖果甘素(dulcin)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒 0.1mg
ADM (Adrenomedullin)ProAM-N20 Rat, human, mo, pig, dog, bov 腎上腺髓質素蛋白(N端20肽) 食物甘素(dulcin)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒 0.5mg
GRGDS peptide 粘附多肽GRGDS 藥品甘素(dulcin)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒 1mg
PACAP(1-38 Peptide) 腺苷酸環化酶激活肽 1-38(全蛋白) 化妝品甘素(dulcin)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒 0.5mg
MBP(Myelin Basic Protein, MBP)peptide 髓鞘堿性蛋白(多肽抗原) 咖啡甘素(dulcin)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒 0.5mg
Bursin 囊素三肽/三肽囊素/雞法氏囊三肽 大米蛋白化學萃取試劑盒 100mg
NPY ( Neuropeptide Y)1-36 神經肽 Y(1-36多肽) 大米蛋白生物萃取試劑盒 0.5mg
Leupeptin 亮抑酶肽 大米淀粉化學萃取試劑盒 1mg
GRP( Gastrin Releasing Peptide ) 促胃泌素釋放肽(抗原) 大米淀粉生物萃取試劑盒 0.5mg