【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱:A7r5(大鼠胸大動脈平滑肌細胞)操作步驟
細胞形態
成纖維細胞樣
背景描述
A7r5細胞培養到穩定期后,表現出長高的肌激酶和肌氨酸磷酸激酶活性(CPK);A7r5細胞分裂終止后合成骨肉型CPK。
生長培養基
DMEM高糖(貨號:PM150210)+10% FBS(貨號:164210-500)+1% P/S(貨號:PB180120)
培養條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
操作步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等
2、*,專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株,免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片,三天回傳細胞生長狀態圖片,五天內有問題公司負責重發,超過五天時限至一個月內重發細胞收半價,超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠,完善、穩定的實驗體系,優秀的科研隊伍,*的實驗設備、準確可靠的實驗結果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
Phospho-eNOS (Ser1177)
核酪蛋白激酶和細胞周期蛋白依賴性激酶底物1抗體 NUCKS1
NIFK蛋白抗體 NIFK
磷酸化NIFK抗體 phospho-NIFK (Thr234)
核轉錄因子X盒結合蛋白1抗體 NFX1
膜磷脂轉移蛋白1抗體 NIR2
神經降壓素受體1抗體 Neurotensin Receptor 1
神經降壓素受體2抗體 Neurotensin Receptor 2
神經組織特異性F肌動蛋白結合蛋白抗體 Neurabin 1
胞內活化的Notch1蛋白抗體 NOTCH1
神經鈣傳感蛋白1抗體 NCS1
神經元鈣結合相關蛋白EFCBP1抗體 NECAB1
膜相關蛋白樣蛋白NUMBL抗體 NUMBL
嘌呤霉素敏感性氨肽酶蛋白抗體 NPEPPS
N-乙基順丁烯二酰亞胺敏感融合蛋白抗體 NSF
NIPAL2蛋白抗體 NIPAL2
神經營養因子HNT抗體 Neurotrimin
軸突蛋白1β/Neurexin 1β抗體 Neurexin 1 beta
*受體3A抗體 NMDAR3A
*受體3B抗體 NR3B
*受體3A+3B抗體 NMDAR3A + 3B
P53誘導細胞凋亡抑制蛋白α抗體 NME6
胞質5'核苷酸酶1A抗體 NT5C1A
NOC2家族樣蛋白抗體 NOC2L
硝基*抗體 Nitrotyrosine
核蛋白p8抗體 NUPR1
神經內分泌特異性蛋白2抗體 NSPL2
還原型輔酶Ⅱ氧化酶5/*腺嘌呤二核苷酸磷酸抗體 NOX5
核干細胞因子抗體(*核苷酸結合蛋白3) Nucleostemin
尼曼匹克C1前體蛋白抗體 NPC1
*轉運蛋白/神經遞質*轉運體抗體 NET1
核孔復合體蛋白88抗體 NUP88
核仁蛋白8抗體 NOL8
PSD-95 突觸后密度蛋白95(抗原) 等位基因特異性表達分析試劑盒 0.5mg
BRCA2(Breast cancer susceptbility gene 2) 癌易感基因2抗原 基因甲基化程度定量分析試劑盒 0.5mg
PTP-1B (Protein-tyrosine phosphatase, non-receptor ) 蛋白*磷酸酶-1B(抗原) 蛋白表位標記技術試劑盒 0.5mg
RAR-Alpha (Retinoic acid -R-Alpha) 維甲酸受體-α 多肽 蛋白激酶譜系*分析技術試劑盒 0.5mg
glycoprotein (E1 glycoprotein) [Rubella virus] 風疹病毒糖蛋白多肽片段 抗原譜學分析技術試劑盒 0.5mg
SAP-1 (Synapse associated protein-I) peptide 突觸相關蛋白-1(多肽抗原) SELDI蛋白質譜分析技術試劑盒 0.5mg
SARS S-protein(抗原) 高容量細胞熒光篩選技術試劑盒 0.5mg
SARS putative orflab polyprotein (SARS coronavirus CUHK-W1)(抗原) 高通量遠紅外細胞免疫篩選技術試劑盒 0.5mg
BSEP peptide 膽汁酸鹽輸出泵蛋白抗原 高效液相色譜(HPLC)分析 0.5mg
Secretin 分泌素(抗原) 紅外光譜(ESR)分析 0.5mg
Secretin receptor 分泌素受體(抗原) 熒光定量分析 0.5mg
Socs 1 (suppressor of cytokine signaling 1) 細胞激酶信號-1抑制劑(抗原) 紫外可見光分析 0.5mg
SM-MHC(Cardiac myosin heavy chain) 心肌肌凝蛋白多肽 化學發光分析 0.5mg
Alpha-Synuclein 核突觸蛋白(抗原) 質譜分析 0.5mg
Alpha-Synuclein 核突觸蛋白(抗原) 熒光定量PCR分析 0.5mg
CA15-3 peptide 癌相關抗原抗原 病毒包裝 0.5mg
Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1) P物質受體(抗原) 薄層色譜分析 0.5mg