【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱:LLC(小鼠肺癌細胞)操作步驟
細胞形態
上皮細胞樣
背景描述
LLC細胞是小鼠Lewis肺癌細胞。
生長培養基
DMEM高糖(貨號:PM150210)+10% FBS(貨號:164210-500)+1% P/S(貨號:PB180120)
培養條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
操作步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等
2、*,專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株,免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片,三天回傳細胞生長狀態圖片,五天內有問題公司負責重發,超過五天時限至一個月內重發細胞收半價,超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠,完善、穩定的實驗體系,優秀的科研隊伍,*的實驗設備、準確可靠的實驗結果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
蛋白酶體PSMα6抗體 Proteasome 20S alpha 6
蛋白酶體PSMα7抗體 PSMA7
孕酮誘導阻斷因子1抗體 PIBF1
多腺苷二磷酸多聚酶16抗體 PARP16
成對樣同源結構域轉錄因子2抗體 PITX2
RNA聚合酶II抗體 RNA polymerase II
T淋巴細胞凋亡相關蛋白TDAG51抗體 PHLDA1
蛋白酶調解因子9抗體 PSMD9
胰腺激素抗體 Pancreatic hormone
纖溶酶相關蛋白B2抗體 PLGLB2
多聚合酶α/β/γ抗體 PAPOL A+B+G
含*突觸相關蛋白相互作用蛋白1抗體 ProSAPiP1
外周蛋白2抗體 PRPH2
區帶蛋白PZP抗體 Pregnancy zone protein
蛋白香葉烯基轉移酶1β(FTβ)抗體 PGGT1B
原鈣粘蛋白15抗體 PCDHB15
原鈣粘蛋白β2抗體 PCDHB2
原鈣粘蛋白β4抗體 PCDHB4
原鈣粘蛋白γ10抗體 PCDHGA10
原鈣粘蛋白γA4抗體 PCDHGA4
原鈣粘蛋白γA2抗體 PCDHGA2
原鈣粘蛋白γA5抗體 PCDHGA5
原鈣粘蛋白γA7抗體 PCDHGA7
原鈣粘蛋白γA8抗體 PCDHGA8
原鈣粘蛋白γA9抗體 PCDHGA9
原鈣粘蛋白γA11抗體 PCDHGA11
原鈣粘蛋白γA12抗體 PCDHGA12
原鈣粘蛋白β12抗體 PCDHB12
原鈣粘蛋白β3抗體 PCDHB3
原鈣粘蛋白γB1抗體 PCDHGB1
原鈣粘蛋白γB2抗體 PCDHGB2
原鈣粘蛋白γB4抗體 PCDHGB4
原鈣粘蛋白γB6抗體 PCDHGB6
原鈣粘蛋白γC3抗體 PCDHGC3
原鈣粘蛋白γC4抗體 PCDHGC4
Protein 2) 胰島素樣生長因子結合蛋白-2(多肽) 0.5mg
IGFBP-3 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 3)C-term 胰島素樣生長因子結合蛋白-3抗原 0.5mg
IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3) 胰島素樣生長因子2 mRNA 結合蛋白3抗原 0.5mg
IKB Beta (Inhibitor of KB) KB抑制蛋白β(多肽) 0.5mg
IKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha) KB抑制蛋白α抗原 0.5mg
IL-12(Ierleukin-12) 白介素12抗原(白細胞介素-12) 0.5mg
IL-12(Ierleukin-12)human peptide 白介素12抗原(人) 0.5mg
IL-12R Beta2/IL12RB2 peptide 白細胞介素-12受體β2抗原 0.5mg
IL-13(Ierleukin-13) 白介素13抗原 0.5mg
IL-14/Taxilin alpha 白介素14抗原 0.5mg
IL-15(Ierleukin-15) 白細胞介素-15抗原 0.5mg
IL-16(Ierleukin-16) 白介素16抗原 0.5mg
IL-16/LCF(ierleukin-16)(Lymphocyte Chemotactic Factor) 白細胞介素-16抗原 0.5mg
IL-17(Ierleukin-17) 白介素-17抗原 0.5mg
IL-17(Ierleukin-17)human 白介素-17抗原(人) 0.5mg
IL-18/IGIF(Ierleukin-18) 白細胞介素-18/干擾素γ誘導因子 0.5mg
Ai-IL-18R alpha/CD218a 白細胞介素-18受體α鏈抗體 0.2ml
IL-23R(Ierleukin-23 receptor) 白介素-23受體抗原 0.5mg
IL-1 Alpha (Ierleukin-1 Alpha ) 白介素1α抗原 0.5mg