細胞名稱:RTE(大鼠氣管上皮細胞)實驗方法
細胞形態
多角形
背景描述
生長培養基
MEM(貨號:PM150410)+20% FBS(貨號:164210-500)+1% P/S(貨號:PB180120)
培養條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
優勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等
2、*,專業的細胞培養技術指導
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操作步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
磷酸化丙酮酸脫氫酶α1抗體 phospho-PDHA1(Ser293)
3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體 PDPK1
磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體 Phospho-PDPK1(Tyr373 + Tyr376)
p53結合蛋白1抗體 p53BP1
磷酸化蛋白激酶C亞性D型抗體 phospho-PKC delta (Tyr52)
磷酸化蛋白激酶C亞性D型抗體 phospho-PKC delta (Thr505/507)
蛋白激酶C zeta 抗體 PKC zeta
嗜酸性粒細胞顆粒關鍵堿性蛋白抗體 PRG2
胰島素原抗體 Proinsulin
原蛋白轉化酶4抗體 PCSK4
細胞膜鈣ATP酶1抗體 PMCA1
磷酸烯醇丙酮酸羧激酶抗體 PCK1
多聚合酶α抗體 PAPOA
多聚合酶g抗體 PAPOG
神經內分泌肽QRFP抗體 QRFP
巰基氧化酶1抗體 Quiescin Q6
喹啉酸磷酸核糖基轉移酶抗體 QPRT/QAPRTase
RNA結合蛋白QK1抗體 QK1
維甲酸誘導蛋白3抗體 RAI3
Rap*核苷酸交換因子2抗體 RAPGEF2
Rap*核苷酸交換因子(GEF)5抗體 RAPGEF5/Repac
Rho家族GTP酶2抗體 RND2/Rho7
受體輔助蛋白1抗體 REEP1
環指蛋白135抗體 RNF135
環指蛋白146抗體 RNF146
RAS相關蛋白Rab5B抗體 Rab5b
胞膜間內質網調節蛋白1抗體 RINT1
減數分裂同源蛋白1抗體 RMND1
RAS家族關聯結構域蛋白7抗體 RASSF7
環指蛋白74抗體(重組激活基因1) RNF74
重組激活基因2蛋白抗體 RAG2
受體表達蛋白5/息肉相關蛋白抗體 REEP5
P-GP(P-glycoprotein) P-糖蛋白抗原 0.5mg
Pepsinogen C peptide *原C蛋白抗原 0.5mg
PGC-1 Alpha(peroxisome proliferator-activated receptor- Gamma coactivator 1 Alpha) 過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α抗原 0.5mg
PGRN (progranulin) 顆粒蛋白前體抗原 0.5mg
PHB(Prohibitin) 抑制素/腫瘤抑制因子抗原 0.5mg
PKA(Protein Kinase A) 蛋白激酶A(多肽) 0.5mg
PLAU/uPA (Plasminogen activator,urokinase) *型纖溶酶原激活因子(多肽) 0.5mg
Podoplanin Protein 平足蛋白抗原 0.5mg
Pokemon (POK Erythroid Myeloid Oogenic factor) “撲克蒙”蛋白又稱“波克曼”蛋白 0.5mg
Polycystin 1(Polycystic Kidney Disease 1) 多囊腎蛋白1抗原 0.5mg
Polycystin 2(polycystic kidney disease 2) 多囊腎蛋白2抗體 0.5mg
phospho-AKT1/PKB1/2/3(pThr473)peptide 磷酸化蛋白激酶B抗原(*磷酸化位點:473) 0.5mg
RKIP(Raf kinase inhibitor protein) Raf激酶抑制蛋白抗原 0.5mg
pre-X protein[Hepatitis B virus]N-Terminus 乙肝病毒pre-X蛋白抗原(N端) 0.5mg
pre-X protein(CT)[Hepatitis B virus C-Terminus] 乙肝病毒pre-X蛋白抗原(C端) 0.5mg
PHD3 (Egln3; HIF-prolyl hydroxylase 3) *羥化酶(多肽) 0.5mg
ADAMTS-7(a disiegrin-like and metalloprotease-7 ) 新型金屬基質蛋白酶(抗原) 0.5mg
Adiponectin 脂聯素(多肽片斷抗原)