【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱:MPC-83(小鼠胰腺腺泡細胞)操作步驟
細胞形態
背景描述
生長培養基
RPMI-1640(貨號:PM150110)+10% FBS(貨號:164210-500)+1% P/S(貨號:PB180120)
培養條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
操作步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等
2、*,專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株,免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片,三天回傳細胞生長狀態圖片,五天內有問題公司負責重發,超過五天時限至一個月內重發細胞收半價,超過一個月重發全額收費。
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6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
phospho-RAD9(Ser380)
磷酸化細胞周期檢查控制蛋白質抗體 phospho-RAD9(Ser387)
磷酸化細胞周期檢查控制蛋白質抗體 phospho-RAD9(Tyr28)
磷酸化原癌基因c-Raf抗體 phospho-c-Raf(Ser301)
磷酸化原癌基因c-Raf抗體 phospho-c-Raf(Ser494)
磷酸化原癌基因c-Raf抗體 phospho-c-Raf(Ser43)
磷酸化原癌基因c-Raf抗體 phospho-c-Raf(Ser471)
磷酸化原癌基因c-Raf抗體 phospho-c-Raf(Tyr341)
磷酸化原癌基因c-Raf抗體 phospho-c-Raf(Thr269)
磷酸化原癌基因c-Raf抗體 phospho-c-Raf(Ser339)
磷酸化視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體 Phospho-Rb (Ser612)
磷酸化視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體 Phospho-P105 RB (Ser788)
磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體 phospho-RPS6KB1(Ser417)
磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體 phospho-RPS6KB1(Ser427)
磷酸化視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體 Phospho-Rb (Ser795)
磷酸化視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體 Phospho-Rb (Thr826)
磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體 phospho-RPS6KB1(Thr 412)
磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體 phospho-RPS6KB1(Ser434)
磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體 phospho-RPS6KB1(Ser421)
磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體 phospho-RPS6KB1(Ser441+Thr444)
磷酸化Rho相關蛋白激酶2抗體 phospho-ROCK2(Thr396)
磷酸化Rho相關蛋白激酶2抗體 phospho-ROCK2(Thr249)
磷酸化Rho相關蛋白激酶2抗體 phospho-ROCK2(Tyr256)
RXR Alpha(retinoid-X receptor alpha) 核受體RXRα抗原 0.5mg
S6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase) 6-磷酸*脫氫酶抗原 0.5mg
S100B S100B蛋白抗原 0.5ml
S100B(S100 calcium binding protein B)(human, mouse, rat, bovine, Rabbit, chicken) S100B蛋白多肽 0.5mg
S-100A1 (S100 calcium-binding protein A1) 鈣結合蛋白S100A1抗原 0.5mg
SATB1(special AT-rich sequence binding protein) 核基質結合區結合蛋白1抗原 0.5mg
SCF (Stem Cell Factor) 干細胞生長因子抗原 0.5mg
SCN9A/NAV1.7(Sodium channel protein type 9 subunit alpha) 電壓開啟的鈉離子通道SCN9A抗原 0.5mg
CXCL14(CXC-chemokine ligand 16) CXC趨化因子14抗原 0.5mg
CXCL16 peptide CXC趨化因子16抗原 0.5mg
Sema3A (semaphorin 3A) 臂板蛋白3A(多肽) 0.5mg
Sema3F (semaphorin 3F) 臂板蛋白3F抗原 0.5mg
SFRP1(Secreted frizzled related protein 1) 分泌型卷曲相關蛋白1抗原 0.5mg
SGLT1(sodium-glucose cotransporter1) 鈉-葡萄糖共轉運載體1抗原 0.5mg
Shadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor) 新朊蛋白/朊蛋白相關蛋白/沙杜(Shadoo)蛋白抗原 0.5mg
Shiga-like toxin IIe varia subunit A 0139[Escherichia coli 0139] 大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體(O139菌型) 0.5mg
Shiga-like toxin IIe varia subunit A[Escherichia coli 0139] 大腸桿菌志賀樣毒素菌體蛋白(O139菌型) 0.5mg
SHP2 peptide 蛋白*磷酸酶2抗原 0.5mg
SIP1 peptide 運動神經元存活蛋白結合蛋白1抗原 0.5mg
SIRT1(sirtuin 1) 沉默調節蛋白1抗原 0.5mg
Skp2 peptide 細胞S相激酶相關蛋白抗原 0.5mg
SLC4A4(solute carrier family 4:sodium bicarbonate cotransporter NBC1) *協同轉運蛋白4-A4 0.5mg
Slc4a7/Nbcn1(solute carrier family 4, sodium bicarbonate cotransporter, member 7) *協同轉運蛋白4-A7抗原 0.5mg
Smac/DIABLO(the second mitochondrial activator