【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱:SK-OV-3(人卵巢癌細胞)操作步驟
細胞形態
上皮細胞樣
背景描述
SK-OV-3細胞是由G·Trempe和L·J·Old于1973年從卵巢腫瘤病人的腹水分離得到。SK-OV-3細胞對腫瘤壞死因子和幾種細胞毒性藥物包括白喉毒素、*和*均耐受。SK-OV-3細胞在裸鼠中致瘤,且形成與卵巢原位癌*的中度分化的腺癌。
生長培養基
McCoy's 5A(貨號:PM150710)+10% FBS(貨號:164210-500)+1% P/S(貨號:PB180120)
培養條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
操作步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等
2、*,專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株,免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片,三天回傳細胞生長狀態圖片,五天內有問題公司負責重發,超過五天時限至一個月內重發細胞收半價,超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠,完善、穩定的實驗體系,優秀的科研隊伍,*的實驗設備、準確可靠的實驗結果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
28S rRNP(Human 28S ribosome RNP antibody) ELISA Kit 人28S抗核糖體抗體 48T
ANA(Human anti-nucleolus antibody) ELISA Kit 人抗核仁抗體 48T
gp210(Human Anti-glucoprotein 210) ELISA Kit 人抗核膜糖蛋白210抗體 48T
LC1(Human anti-liver cytosolantibody type 1) ELISA Kit 人抗肝細胞胞質1型抗體 48T
ABM-Ab(Human alveoli basement membrane zone antibody) ELISA Kit 人抗肺泡基底膜抗體 48T
ATG(Human anti-thymocyte globulin) ELISA Kit 人抗胸腺細胞球蛋白 48T
EBMZ(Human epidermal basement membrane zone) ELISA Kit 人抗表皮細胞基底膜抗體 48T
ACA(Human anti-centrol and centrosome antibody) ELISA Kit 人抗中性粒/中心體抗體 48T
AAA(Human anti-albumin antibody) ELISA Kit 人抗白蛋白抗體 48T
PCA-1/Yo(Human purkinje cell autoantibody) ELISA Kit 人抗浦肯野細胞抗體/抗Yo抗體 48T
Human anti-Sa-antibody ELISA Kit 人抗Sa抗體 48T
ANNA-2/Ri(Human neuronal nuclear autoantibody) ELISA Kit 人抗神經元核抗體2型/抗Ri抗體 48T
hnRNP/RA33(Human heterogeneous nuclear ribonucleoprotein compies/anti-RA33-antibody) ELISA Kit 人異質型核糖核蛋白復合物/抗RA33抗體 48T
anti-Q-Ab(Human anti-Q fever antibody) ELISA Kit 人抗Q熱抗體 48T
PM-Scl/PM-1(Human polymyositis-sclerosis antibody) ELISA Kit 人抗多發性肌炎硬皮病抗體 48T
Human anti-PL7-antibody ELISA Kit 人PL7抗體/抗蘇氨酰tRNA合成酶 48T
PL12/AlaRS(Human anti-PL12-antibody) ELISA Kit 人PL12抗體/抗丙氨酰tRNA合成酶 48T
Human anti-Mi2-antibody ELISA Kit 人抗Mi2抗體 48T
Human anti-Ku-antibody ELISA Kit 人抗Ku抗體 48T
裝配銜接蛋白180抗體 AP180
液泡蛋白分選受體SORCS抗體 SORCS1
滑膜肉瘤X染色體相關2抗體 SSX2
突觸相關蛋白102抗體 MPP3
PSD95結合蛋白3抗體 SAPAP3
肺表面活性蛋白C抗體 SP-C
5-羥色胺受體1D抗體 5HT1D Receptor
5-羥色胺受體1E抗體 5HT1E Receptor
5-羥色胺受體1F抗體 5HT1F Receptor
5-羥色胺受體2A抗體 5HT2A Receptor
5-羥色胺受體2B抗體 5HT2B Receptor
5-羥色胺受體3A抗體 5HT3A Receptor
5-羥色胺受體3D+3E抗體 5HT3D + 5HT3E Receptor
5-羥色胺受體3D抗體 5HT3D Receptor
5-羥色胺受體4抗體 5HT4 Receptor
5-羥色胺受體5A抗體 5HT5A receptor
5-羥色胺受體7抗體 5HT7 Receptor
SCEL蛋白抗體 SCEL
相關抗原8抗體 SPAG8
T淋巴細胞識別的鱗狀細胞癌抗原抗體 SART1
S100A2抗體 S100 alpha 2
細胞周期G2/M期快速誘導蛋白SPDYA抗體 SPDYA
5-羥色胺受體6抗體 5HT6 Receptor
ATP依賴解旋酶SMARCA2抗體 SMARCA2
S期激酶相關蛋白1抗體 SKP1
SHFM3蛋白抗體 SHFM3
硫氧還蛋白1抗體 SRXN1
信號轉導銜接蛋白1抗體 STAM
磷酸化*蛋白激酶Fyn/同步原癌基因抗體 phospho-SLK (Tyr530)
*棕櫚酰轉移酶2抗體 SPTLC2
磷酸化細胞信號轉導分子SMAD3抗體 Phospho-Smad3 (Ser425)
磷酸化細胞信號轉導分子SMAD3抗體 Phospho-Smad3 (Ser208)
磷酸化細胞信號轉導分子SMAD2抗體 Phospho-Smad2(Thr220)
磷酸化核突觸蛋白α抗體 phospho-Alpha synuclein (Tyr125)
磷酸化核突觸蛋白α抗體 phospho-Alpha synuclein(Ser129)
磷酸化神經突觸素1抗體 phospho-SYN1(Ser549)
磷酸化神經突觸素1抗體 phospho-SYN1(Ser603)
磷酸化神經突觸素1抗體 phospho-SYN1(Ser62+Ser67)
磷酸化神經突觸前膜胞內蛋白抗體 phospho-STXBP1 (Ser515)
組蛋白甲基轉移酶SMYD3抗體 SMYD3
滑膜肉瘤X斷點蛋白8抗體 SSX8
磷酸化信號轉導和轉錄激活因子6抗體 phospho-STAT6(Thr645)
磷酸化原癌基因蛋白18 Phospho-Stathmin(Ser25)
*/*蛋白激酶38抗體 STK38
分選連接蛋白1抗體 SNX1
GTP酶激活因子STARD8抗體 STARD8