【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

1.產(chǎn)品名稱：小鼠NG2細(xì)胞操作步驟

2.組織來源：腦組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

小鼠NG2細(xì)胞分離自腦組織；大腦分左右兩個(gè)半球，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面，即外側(cè)面（約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3）、內(nèi)側(cè)面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和*溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。NG2細(xì)胞是在發(fā)育和成年中樞神經(jīng)系統(tǒng)的灰質(zhì)和白質(zhì)束中發(fā)現(xiàn)的，因表達(dá)NG2蛋白多糖而得名。NG2細(xì)胞先前被假定代表少突膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞，后來使用轉(zhuǎn)基因的研究表明，NG2細(xì)胞在體內(nèi)不僅能夠產(chǎn)生少突膠質(zhì)細(xì)胞，還能產(chǎn)生原漿性星形膠質(zhì)細(xì)胞以及某些情況下的神經(jīng)元。NG2細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中不同于神經(jīng)元、成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞的一類細(xì)胞亞群。此外，在發(fā)育和成年中樞神經(jīng)系統(tǒng)的多個(gè)區(qū)域，發(fā)現(xiàn)NG2細(xì)胞和神經(jīng)元之間存在*的突觸，暗示NG2細(xì)胞除了可能作為分化成多種細(xì)胞的可塑性前體細(xì)胞群，還可能會(huì)和神經(jīng)元從而形成一個(gè)*的神經(jīng)膠質(zhì)網(wǎng)絡(luò)。

本公司的小鼠NG2細(xì)胞采用*消化、培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶；細(xì)胞經(jīng)NG2免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

5.培養(yǎng)基信息：

DMEM[H]、FBS、Penicillin、Streptomycin等

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢：
1、細(xì)胞株種類齊全，包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株，如：人滑膜細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞，人細(xì)胞，人腎近曲小管上皮細(xì)胞，肝癌細(xì)胞，心肌細(xì)胞，子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*，專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細(xì)胞株，免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片，三天回傳細(xì)胞生長狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問題公司負(fù)責(zé)重發(fā)，超過五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià)，超過一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。

*標(biāo)記的兔抗水貂IgG TCF7L2(transcription factor 7-like 2)
Cy3標(biāo)記的兔抗水貂IgG TDP-43/TARDBP (tar DNA binding protein)
Cy5標(biāo)記的兔抗水貂IgG Tenascin
Cy5.5標(biāo)記的兔抗水貂IgG TEM 1/CD248(Tumor endothelial marker 1 precursor)
Cy7標(biāo)記的兔抗水貂IgG TFF3 (trefoil factor3)
PE標(biāo)記的兔抗水貂IgG TFPI-2 (tissue factor pathway inhibitor-2)
PE-Cy3標(biāo)記的兔抗水貂IgG TIEG1/KLF10(TGF-beta inducible early response gene 1)
PE-CY5標(biāo)記的兔抗水貂IgG TGF- BetaR1/ALK (TGF-beta receptor type I)
APC標(biāo)記的兔抗水貂IgG Erdj5/DNAJC10
Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗水貂IgG Tie1/JTK14 peptide
Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗水貂IgG Tie2(Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2)
Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗水貂IgG Rarres2/TIG2/Chemerin(Retinoic acid receptor responder protein 2)
Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗水貂IgG TLR3 (Toll-like receptor 3)
PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗水貂IgG TLR4/CD284 (Toll-like receptor 4)
PE-Cy7標(biāo)記的兔抗水貂IgG TLR5/CD285 (Toll-like receptor 5)
堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的兔抗水貂IgG TM(Thrombomodulin)
FITC標(biāo)記的兔抗水貂IgG Tn-C(Tenascin-C)C-Terminus
羅丹明標(biāo)記的兔抗水貂IgG TNF-alpha
膠體金標(biāo)記的兔抗水貂IgG TNF- Beta(Tumor Necrosis Factor- Beta)
羅丹明標(biāo)記的驢抗人IgG TNFAIP1(Tumor necrosis factor-alpha-induced protein 1)

SmIg(Human Surface Membrane Immunoglobulin) ELISA Kit  人細(xì)胞膜表面免疫球蛋白   48T
PA(Human prealbumin) ELISA Kit  人前白蛋白   48T
CG(Human Cryoglobulin) ELISA Kit  人冷球蛋白   48T
EMP(Human erythrocyte membrane protein) ELISA Kit  人紅細(xì)胞膜蛋白   48T
MHB(Human Methemoglobin) ELISA Kit  人高鐵血紅蛋白   48T
LMWH(Human low molecular weight heparin) ELISA Kit  人低分子肝素   48T
C3SP(Human Complement 3 split product) ELISA Kit  人補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物   48T
C3bR(Human Complement fragment 3b rccptor) ELISA Kit  人補(bǔ)體片段3b受體   48T
C1INH(Human Complement 1 inhibitor autoantibody) ELISA Kit  人補(bǔ)體1抑制物抗體   48T
BF(Human factor B) ELISA Kit  人B因子   48T
HLA-G(Human leukocyte antigen G) ELISA Kit  人類白細(xì)胞抗原G   48T
C3b(Human Complement fragment 3b) ELISA Kit  人補(bǔ)體片斷3b   48T
C4b(Human Complement fragment 4b) ELISA Kit  人補(bǔ)體片斷4b   48T
C4d(Human Complement fragment 4d) ELISA Kit  人補(bǔ)體片斷4d   48T
C5b(Human Complement fragment 5b) ELISA Kit  人補(bǔ)體片斷5b   48T
IgH(Human immunoglobulin heavy chain) ELISA Kit  *重鏈   48T
IgHV(Human immunoglobulin heavy chain variable region) ELISA Kit  *重鏈可變區(qū)   48T
poly-IgR(polyimmunoglobulinreceptor) ELISA Kit  人多免疫球蛋白受體   48T
Hb-AGE(Human hemoglobin-advanced glycosylation end products) ELISA Kit  人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物   48T
mIgA(Human membrane IgA) ELISA Kit  人表面膜免疫球蛋白A   48T
Ig-j(Human immunoglubin joining chain) ELISA Kit  *j鏈   48T
HB- Beta(Human Beta-subunits of hemoglobin) ELISA Kit  人血紅蛋白β亞基   48T
SIgA(Human secretory immunoglobulin A) ELISA Kit  人分泌型免疫球蛋白A   48T