1.產品名稱:小鼠外周血單核細胞實驗方法
2.組織來源:外周血
3.產品規格:5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介:
小鼠外周血單核細胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中*提出外周血這一新概念。單核細胞起源于骨髓中的造血干細胞,并在骨髓中發育。當它們從骨髓進入血液時仍然是尚未成熟的細胞。與其他血細胞比較,單核細胞內含有更多的非特異性脂酶,并且具有更強的吞噬作用。單核細胞在血液中停留2-3天后遷移到周圍組織中,細胞體積繼續增大,直徑可達50-80μm,細胞內所含的溶酶體顆粒和線粒體的數目也增多,成為成熟的細胞。固定在組織中的單核細胞稱為組織巨噬細胞,它們經常大量存在于淋巴結、肺泡壁、骨髓、肝和脾等器官。激活了的單核細胞和組織巨噬細胞能生成并釋放多種細胞毒、干擾素和白細胞介素,參與機體防衛機制,還產生一些能促進內皮細胞和平滑肌細胞生長的因子。在炎癥周圍單核細胞能進行細胞分裂,并包圍異物。
本公司的小鼠外周血單核細胞采用密度梯度離心法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶;細胞經CD14免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息:
DMEM[H]、FBS、Penicillin、Streptomycin等
優勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等
2、*,專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株,免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片,三天回傳細胞生長狀態圖片,五天內有問題公司負責重發,超過五天時限至一個月內重發細胞收半價,超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠,完善、穩定的實驗體系,優秀的科研隊伍,*的實驗設備、準確可靠的實驗結果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
Fibrinogen from bovine plasma
胰島素降解酶(抗原) factor VIII
人胰島素樣生長因子-I受體 FASN/Fatty Acid Synthase 1
胰島素樣生長因子結合蛋白-5(抗原) FLG(filaggrin)peptide
胰島素(抗原) FADS1
APC活化蛋白C抗原 GABA/KLH
脂肪炎癥因子Apelin抗原 GABA/BSA
Apelin receptor抗原 GSK-3 Beta, (Glycogen Synthase Kinase-3)
APG4B細胞自噬相關抗原 Gentamicin/FITC
載脂蛋白A1抗原 GSK-3 Alpha
凝聚素α/β抗原 phospho-GSK-3 Beta(Ser9)
胰島素受體-α(抗原) GSK3 alpha + beta (phospho Y279 + Y216)
胰島素受體-α(抗原) GAPDH
胰島素受體-β(抗原) GAD-65 (glutamate decarboxylase)
胰島素受體底物-1(抗原) GSK-3 Beta(NT) (Glycogen Synthase Kinase-3 Beta)
水通道蛋白-3抗原 Gamma-Synuclein/SNCG
胰島素受體底物-2(抗原) GLP-1R peptide
水通道蛋白-1抗原 Gentamicin/BSA
胰島素受體底物-3(抗原) GST-Tag
胰島素受體底物-4(抗原) Gentamicin/OVA
human Serum albumin
前列腺素E2抗原 Beta-HCG (Human chorionic gonadotropin Beta)
整合素-β3(抗原) HMGB1 (High Mobility Group Box protein 1)
水通道蛋白-9抗原 (多肽抗原) Hirudin
瘦素(多肽抗原) HPV16 E6 protein
瘦素受體(長)(抗原) Hepcidin-25
雄激素受體(多肽) 4 Hydroxynonenal/BSA
絲裂原活化蛋白激酶(抗原) IFN- Gamma(Interferon Gamma)Human
絲裂原活化蛋白激酶激酶 IL-17(Interleukin-17)
RBC(Rat anti-red cell antibody )ELISA Kit 大鼠抗紅細胞抗體 48T
CD3(Rat Cluster of differentiation 3,CD3) ELISA Kit 大鼠CD3分子 48T
JNK (Rat c-Jun N-terminal kinases,JNK) ELISA Kit 大鼠c-Jun氨基末端激酶 48T
MHB(Rat Methemoglobin,MHB) ELISA Kit 大鼠高鐵血紅蛋白 48T
DAO(Rat diamine oxidase,DAO) ELISA Kit 大鼠二胺氧化酶 48T
MT/MLT (Rat Melatonin,MT/MLT) ELISA Kit 大鼠褪黑素 48T
FGF-10(Rat fibroblast growth factor-10,FGF-10 )ELISA Kit 大鼠成纖維細胞生長因子10 48T
sPLA2 (Rat secreted phospholipase A2,sPLA2) ELISA Kit 大鼠分泌型磷脂酶A2 48T
cPLA2(Rat Cytosolic Phospholipase A2,cPLA2 )ELISA Kit 大鼠胞漿型磷脂酶A2 48T
I CTP (Rat Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type I collagen, I CTP) ELISA Kit 大鼠Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽 48T
Tn-T (Rat Troponin T,Tn-T )ELISA Kit 大鼠肌鈣蛋白T 48T
CD8 大鼠CD8分子 48T
(EGFR)ELISA Kit 大鼠表皮生長因子受體 48T
(IL-2sR)ELISA Kit 大鼠白介素2可溶性受體 48T
(Ntn1)ELISA Kit 大鼠軸突生長誘向因子1 48T
(LDH)ELISA Kit 大鼠乳酸脫氫酶 48T
(MAG Ab)ELISA Kit 大鼠抗髓鞘相關糖蛋白抗體 48T
(CTX- I )ELISA Kit 大鼠Ⅰ型膠原C端肽 48T