【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
1.產品名稱：小鼠視網膜前體細胞操作步驟
2.組織來源：視網膜組織
3.產品規格：5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介：
小鼠視網膜前體細胞分離自視網膜組織；視網膜居于眼球壁的內層，是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層，由外向內分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節細胞層、神經纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側有一視神經。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。*神經元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上，而視錐細胞則在中心凹處zui多。第二層叫雙節細胞，約有10到數百個視細胞通過雙節細胞與一個神經節細胞相，負責聯絡作用。第三層叫節細胞層，專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面，經由視神經到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區，其分辨能力zui強。
本公司的小鼠視網膜前體細胞采用*消化法結合培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經Nestin免疫熒光鑒定，純度可達85%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息：
DMEM-F12、B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態圖片，五天內有問題公司負責重發，超過五天時限至一個月內重發細胞收半價，超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠，完善、穩定的實驗體系，優秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
活化轉錄因子3抗原 Nogo-66 1-40(NEP 1-40)
毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗原 NPY/Neuropeptide Y(1-36)
活化轉錄因子6抗原 Neuroprotective peptide/Gly-HN(Nuclear-encoded Humanin [HN(N)] Gly14)
鈉鉀ATP酶通道蛋白抗原 Neuronal thread protein AD7c-NTP
ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗原 Oxytetracycline/BSA
*加壓素受體2抗原 Oxytetracycline/OVA
極光激酶B抗原 OVA (ovalbumin)
孤菲肽（痛敏肽）（抗原） Acetylated-P53(Lys382)
程序性死亡配體1（多肽） Pokemon
孤菲肽受體（痛敏肽受體）（抗原） p70 S6 kinase beta
軸索過度生長抑制因子-A（抗原） Protein A
軸索過度生長抑制因子受體（多肽抗原） P-GP(P-glycoprotein)
相關死亡促進因子Bad抗原 Phospho-RIP2 (Ser176)
相關死亡促進因子Bad抗原 Ractopamine/BSA
磷酸化相關死亡促進因子抗體 Ractopamine/KLH
Bcl-2同源拮抗劑Bak（多肽） rHBsAg
一氧化氮合成酶-1（抗原） Rabbit IgG/Alexa Fluor 647
一氧化氮合成酶-2（抗原） streptomycin/KLH
蛇毒巴曲酶抗原 SAHH
一氧化氮合成酶-3（抗原） SSDD/Steroid sulfatase
神經肽 Y（抗原） streptomycin/BSA
*受體（抗原） SP (Substance P)
神經生長因子-3（抗原） SDHA
神經生長因子4/5（抗原） SHBG
神經生長因子（抗原） Streptavidin/Cy5
Bcl-xL蛋白抗原 Streptavidin, SA
磷酸化(Ser62)Bcl-xL蛋白抗原 SHBG
丁酰*脂酶抗原(N端) Survivin
48T
HSP47 ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白47 48T
GC ELISA Kit 大鼠內源性糖皮質激素 48T
CS ELISA Kit 大鼠檸檬酸合酶 48T
L-LDH ELISA Kit 大鼠L-鼠乳酸脫氫酶 48T
ACS ELISA Kit 大鼠脂酰*合成酶 48T
CACT ELISA Kit 大鼠肉毒堿脂酰轉移酶 48T
pACCase ELISA Kit 大鼠磷酸化乙酰*羧化酶 48T
MT ELISA Kit 大鼠金屬硫蛋白 48T
c ELISA Kit 大鼠心肌特異性肌鈣蛋白T 48T
AChE ELISA Kit 大鼠乙酰*酯酶 48T
CDT ELISA Kit 大鼠糖缺失性轉鐵蛋白 48T
TBA ELISA Kit 大鼠總膽汁酸 48T
BMG/ Beta2-MG ELISA Kit 大鼠β2微球蛋白 48T
RBP ELISA Kit 大鼠*結合蛋白 48T
GNRHR-Ab ELISA Kit 大鼠*釋放激素受體抗體 48T
MBP ELISA Kit 大鼠主要堿性蛋白 48T
ECP ELISA Kit 大鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白 48T
CaN ELISA Kit 大鼠鈣調磷酸酶 48T
INHBP ELISA Kit 大鼠抑制素結合蛋白 48T
TPO-Ab ELISA Kit 大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體 48T
AIF ELISA Kit 大鼠凋亡誘導因子 48T
dsDNA ELISA Kit 大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體 48T
ALP ELISA Kit 大鼠堿性磷酸酶 48T
ADAMTS13/vWF-cp ELISA Kit 大鼠血管性血友病因
