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小鼠肌源性干細胞實驗方法

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更新時間：2017-07-27 15:56:25瀏覽次數(shù)：322次

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上海邦景實業(yè)有限公司

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聯(lián)系人：陳小姐（銷售）

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產(chǎn)品簡介

小鼠肌源性干細胞實驗方法售后：收到細胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題（如污染，死亡，快遞運輸?shù)仍颍r，應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真致銷售人員，我們將盡快為您解決。

詳細介紹

1.產(chǎn)品名稱：小鼠肌源性干細胞實驗方法

2.組織來源：肌肉組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

小鼠肌源性干細胞分離自肌肉組織；肌源性干細胞（MDSCs）屬于成體多能干細胞，具有多細胞系分化和自我更新能力。通過誘導(dǎo)刺激，MDSCs可以分化為脂肪、骨骼、軟骨、平滑肌和神經(jīng)細胞等多種細胞和組織類型；作為基因治療和組織工程的供體細胞，已成為治療心肌梗死、Duchenne氏肌營養(yǎng)不良等疾病的研究熱點；近年來，肌源性干細胞在治療尿失禁等方面的應(yīng)用逐步得到重視。需注意的是，肌源性干細胞主要存在于骨骼肌組織中，只是成熟組織的很少部分細胞；平時處于靜止狀態(tài)，在細胞應(yīng)激和組織缺失時才會激活；并且隨著年齡的增加，所含細胞數(shù)量逐漸減少，而目前臨床疾病的治療主要是針對成體進行。肌源性干細胞的體外擴增對細胞移植和干細胞介導(dǎo)的基因治療至關(guān)重要。對肌源性干細胞的擴增研究發(fā)現(xiàn)，EGF、FGF-2和SCF可以通過減數(shù)分裂或促使不分裂細胞進入有絲分裂周期，從而刺激細胞增生。更重要的是，細胞因子誘導(dǎo)的體外擴增可以通過自我更新不刺激細胞分化，從而保持干細胞表型。

本公司的小鼠肌源性干細胞采用膠原酶-*-*聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心、差速貼壁法，zui后通過肌源性干細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經(jīng)CD34、Desmin、CD45免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

5.培養(yǎng)基信息：

DMEM[H]、FBS、HS、Chicken Embryo Extract(CEE)、Penicillin、Streptomycin等

細胞名稱	小鼠肌源性干細胞實驗方法
規(guī)格	5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
價格	來電可享受優(yōu)惠

優(yōu)勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內(nèi)膜細胞等
2、*，專業(yè)的細胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購買本公司的細胞株，免費復(fù)蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態(tài)圖片，五天內(nèi)有問題公司負責(zé)重發(fā)，超過五天時限至一個月內(nèi)重發(fā)細胞收半價，超過一個月重發(fā)全額收費。
5、經(jīng)濟、實惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實驗體系，優(yōu)秀的科研隊伍，*的實驗設(shè)備、準確可靠的實驗結(jié)果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
*還原酶抗原
A型人流感病毒H1N1-M2蛋白多肽
A型豬流感病毒H1N1-M2蛋白
流感病毒A抗原
流感病毒A抗原
組蛋白H2AX多肽抗原
流感病毒A抗原
流感病毒A抗原
透明質(zhì)酸酶/*抗原
HA tag標簽多肽
HA tag標簽（分支多肽）
肝細胞生長因子激活物抑制因子抗原
人類血紅蛋白α1抗原
乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗原
乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗原
肝炎病毒X蛋白(HBxAg)C端抗原
人α亞基人絨毛膜*多肽抗原
膀胱腫瘤抗原
c-erbB-2受體抗體(N端)
c-erbB-2受體抗原(N端)
肝細胞生長因子抗原
人類皰疹病毒8抗原
人類皰疹病毒8抗原
人類皰疹病毒8抗原
缺氧誘導(dǎo)因子1β 抗原
缺氧誘導(dǎo)因子2α 抗原
組蛋白H1b抗原
組織蛋白去乙酰化酶1抗原
Flag Tag標簽多肽
標簽DYKDDDDK Tag分支肽
T7 tag標簽抗原
V5 tag多肽抗原
KT3 tag標簽抗原
VSV-G tag標簽抗原
HLA-DR抗原
人類白細胞抗原E
高遷移率族蛋白A1抗原
高遷移率族蛋白A2抗原
血紅素氧合酶-1/熱休克蛋白-32抗原
48T
TAT ELISA Kit 大鼠*抗*復(fù)合物   48T
ATR ELISA Kit 大鼠抗*受體   48T
TR ELISA Kit 大鼠*受體   48T
cTn- I ELISA Kit 大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ   48T
PI3K ELISA Kit 大鼠磷酸肌醇3激酶   48T
PKB ELISA Kit 大鼠蛋白激酶B   48T
sIgA ELISA Kit 大鼠分泌型免疫球蛋白A   48T
HO-2 ELISA Kit 大鼠血紅素氧合酶2   48T
Cr ELISA Kit 大鼠骨膠原交聯(lián)   48T
C I CP ELISA Kit 大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽   48T
DPD ELISA Kit 大鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉   48T
PY ELISA Kit 大鼠吡啶交聯(lián)物   48T
OPN ELISA Kit 大鼠骨橋素   48T
ALP-B ELISA Kit 大鼠骨特異性堿性磷酸酶B   48T
TFR/CD71 ELISA Kit 大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體   48T
Cys-C ELISA Kit 大鼠半*蛋白酶抑制劑/胱抑素C   48T
F VIII Ag ELISA Kit 大鼠第八因子相關(guān)抗原   48T
M2-PK ELISA Kit 大鼠丙酮酸激酶M2型同工酶   48T
AChRab ELISA Kit 大鼠乙酰*受體抗體   48T
GABA ELISA Kit 大鼠γ氨基丁酸   48T
5-HT ELISA Kit 大鼠5羥色胺   48T
SP-R ELISA Kit 大鼠P物質(zhì)受體   48T
SP ELISA Kit 大鼠P物質(zhì)   48T