【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
1.產品名稱:小鼠腎動脈內皮細胞操作步驟
2.組織來源:腎組織
3.產品規格:5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介:
小鼠腎動脈內皮細胞分離自腎組織;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內代謝產物及某些廢物、毒物,同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質,如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、*等,以調節水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能,生成腎素、促紅細胞生成素、活性*3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內環境的穩定,使新陳代謝得以正常進行。腎動脈的分支為葉間動脈,穿行于腎柱內,上行至皮質與髓質交界處,形成與腎表面平行的弓狀動脈。小葉間動脈向被膜發出毛細血管,并向周圍的腎小體發出入球小動脈,進入腎小囊后形成球形的毛細血管網,再匯集成出球小動脈,出腎小體。直小動脈分支形成毛細血管網,再匯合成直小靜脈,入弓狀靜脈、葉間靜脈,zui后匯合成腎靜脈經腎門出腎,注入下腔靜脈。腎動脈既是腎的營養血管,又是腎的機能血管,與腎泌尿機能密切相關。腎動脈在腎實質內形成兩個毛細血管網:腎小球毛細血管網,血壓較高,利于血漿濾過形成原尿;球后毛細血管網,血壓較低,利于腎小管的重吸收。腎動脈內皮細胞是腎動脈的重要結構細胞之一,在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。腎動脈內皮細胞主要功能有:①在血漿濾過形成原尿的過程中起重要作用,②在腎小管的重吸收過程中起重要作用,③保持凝血和纖溶的動態平衡。
本公司的小鼠腎動脈內皮細胞采用*-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶;細胞經CD31/vWF免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息:
M199、FBS、內皮細胞生長添加劑、Heparin、Ascorbic Acid、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
操作步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等
2、*,專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株,免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片,三天回傳細胞生長狀態圖片,五天內有問題公司負責重發,超過五天時限至一個月內重發細胞收半價,超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠,完善、穩定的實驗體系,優秀的科研隊伍,*的實驗設備、準確可靠的實驗結果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
*G Fc片段
人嗜環蛋白/親環素B
人C4結合蛋白
人補體片段3c
人補體7
人β淀粉樣蛋白1-42
人chemerin
人*Ⅻ
人*ⅩⅢ
人*Ⅲ
人補體1q
人血小板膜糖蛋白Ⅳ
人*α1
人補體調節蛋白
人血小板堿性蛋白
人類白細胞抗原C
人類白細胞抗原E
人類白細胞抗原A
人血清淀粉樣蛋白P
人甘露糖凝集素受體
人纖溶酶/纖維蛋白溶酶
人B細胞受體
人表面膜免疫球蛋白M
人表面膜免疫球蛋白D
人殺傷細胞免疫球蛋白樣受體
人殺傷細胞凝集素樣受體
人活化蛋白C
人蛋白C
人血小板因子3
人*原片段F1+2
人甘露糖結合蛋白/甘露糖結合凝集素
人膜攻擊復合物
人優球蛋白
人游離血紅蛋白
人*1
人一氧化碳血紅蛋白
人血小板相關免疫球蛋白
人血小板相關補體3
人血栓素A2
人血紅蛋白H
人血紅蛋白C
人纖維蛋白
anti-CXCL10/IP-10 /FITC 熒光素標記CXCL10趨化因子10/干擾素誘導蛋白10抗體IgG 0.2ml
Anti-CXCL11/ITAC/FITC 熒光素標記干擾素誘導T細胞趨化因子抗體IgG 0.2ml
Anti-SDF-1/CXCL12 /FITC 熒光素標記基質細胞衍生因子-1抗體IgG 0.2ml
Anti-CXCL13/BLC-1/FITC 熒光素標記B-淋巴細胞趨化因子抗體IgG 0.2ml
Anti-CXCL14/FITC 熒光素標記CXC趨化因子14抗體IgG 0.2ml
Anti-CXCL15/Lungkine/FITC 熒光素標記趨化因子CXCL15體IgG 0.2ml
Anti-CXCL16/FITC 熒光素標記CXC趨化因子16抗體IgG 0.2ml
Anti-CXC-R1 /FITC 熒光素標記細胞表面趨化因子受體1抗體IgG 0.2ml
Anti-CXC-R2/FITC 熒光素標記細胞表面趨化因子受體2抗體IgG 0.2ml
Anti-CXCR3/CD183/FITC 熒光素標記細胞表面趨化因子受體3抗體/G蛋白偶聯受體IgG 0.2ml
Anti-CXCR3/CD183(rat,mo) /FITC 熒光素標記兔抗大、小鼠細胞表面趨化因子受體3抗體IgG 0.2ml
Anti-CXCR5/CD185/FITC 熒光素標記細胞表面趨化因子受體5抗體IgG 0.2ml
Anti-CXCR6/FITC 熒光素標記細胞表面趨化因子受體6抗體IgG 0.2ml
Anti-CXCR7/RDC1/FITC 熒光素標記細胞表面趨化因子受體7抗體IgG 0.2ml
Anti-CXorf36/FITC 熒光素標記脫羧酶蛋白體36抗體IgG 0.2ml
Anti-CXorf36/FITC 熒光素標記脫羧酶蛋白體36抗體IgG 0.2ml
Anti-Cyclin A/FITC 熒光素標記周期素A抗體IgG 0.2ml
Anti-Cyclin B1/FITC 熒光素標記周期素B1抗體IgG 0.2ml
Anti-Phospho-Cyclin B1 (Ser147) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化周期素B1抗體IgG 0.2ml
Anti-Phospho-Cyclin B1 (Ser133) /FITC 熒光素