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小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;MEF操作步驟

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更新時(shí)間:2017-07-25 12:36:31瀏覽次數(shù):721次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;MEF操作步驟售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

細(xì)胞名稱  小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;MEF操作步驟
形態(tài)特性   成纖維細(xì)胞樣 
生長(zhǎng)特性  貼壁生長(zhǎng) 
特征特性   取孕9天的615小鼠胚胎,去除腦、心臟等培養(yǎng)建立。該細(xì)胞可用作飼養(yǎng)層細(xì)胞,支持胚胎干細(xì)胞ES的生長(zhǎng)并維持ES未分化的狀態(tài)。當(dāng)作為飼養(yǎng)層細(xì)胞時(shí),MEF需經(jīng)絲裂霉素C處理停止生長(zhǎng)。建議作為ES細(xì)胞的飼養(yǎng)層時(shí),MEF不要超過(guò)6代。 
培養(yǎng)條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%CS 
傳代方法   1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況  P1
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS 
支原體檢測(cè)  培養(yǎng)法(-) 
STR   -
同工酶  
染色體    
使用權(quán)限  A類

細(xì)胞名稱小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;MEF操作步驟
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
價(jià)格來(lái)電可享受優(yōu)惠

冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
操作步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
優(yōu)勢(shì):
1、細(xì)胞株種類齊全,包括腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等
2、*,專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指導(dǎo)
3、購(gòu)買(mǎi)本公司的細(xì)胞株,免費(fèi)復(fù)蘇
4、客戶收到細(xì)胞后一天回傳細(xì)胞圖片,三天回傳細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)圖片,五天內(nèi)有問(wèn)題公司負(fù)責(zé)重發(fā),超過(guò)五天時(shí)限至一個(gè)月內(nèi)重發(fā)細(xì)胞收半價(jià),超過(guò)一個(gè)月重發(fā)全額收費(fèi)。
5、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系,優(yōu)秀的科研隊(duì)伍,*的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細(xì)胞株、抗體、血清、培養(yǎng)基、常用生化試劑、耗材。
N-乙酰轉(zhuǎn)移酶1(NAT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
氯離子通道輔助蛋白1(CLCA1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
*肽酶抑制因子Kunitz型2(SPINT2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
NADP依賴性蘋(píng)果酶2(ME2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
干擾素γ誘導(dǎo)單核因子(MIγ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
賴氨酰氧化酶樣蛋白2(LOXL2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
原鈣黏素γA2(PCDHγA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
賴氨酰氧化酶樣蛋白1(LOXL1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
*Ⅶ(F7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
心臟肌球蛋白結(jié)合蛋白C(MYBPC3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
UL16結(jié)合蛋白2(ULBP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
信號(hào)素4A(SEMA4A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
Tolloid樣蛋白1(TLL1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
絡(luò)絲蛋白(RL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
*酶(Arg)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
含RNA結(jié)合冷休克域蛋白E1(CSDE1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
C-型凝集素域家族11成員A(CLEC11A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
*蛋白酶23(PRSS23)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
巢蛋白2(NID2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
巢蛋白2(NID2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)    
 phospho-CREB-1(Ser133)  磷酸化CREB-1抗體 
 phospho-CREB-1(Ser129)  磷酸化CREB-1抗體 
 phospho-CREB-1(Ser142)  磷酸化CREB-1抗體 
 phospho-CREB-1(Ser121)  磷酸化CREB-1抗體 
 CREM  *反應(yīng)元件調(diào)節(jié)蛋白抗體 
 phospho-CREM (Ser271 +Ser 274)  磷酸化*反應(yīng)元件調(diào)節(jié)蛋白抗體 
 TNFC/lymphotoxin Beta  腫瘤壞死因子C/淋巴毒素β抗體 
 CRF/CRH  促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子抗體 
 CRF/CRH  促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子抗體 
 MIG7  富含半*蛋白質(zhì)MIG7抗體 
 CRHR1/CRFR1  促腎上腺皮質(zhì)釋放激素受體1抗體 
 CRHR2  促腎上腺皮質(zhì)釋放激素受體2抗體 
 CSIG  細(xì)胞衰老抑制基因抗體 
 Cripto-1(NT)  畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗體(N端) 
 CCDC85B  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白85B抗體 
 PTOV1  前列腺腫瘤高表達(dá)蛋白1抗體 
 Cripto-1  畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗體(C端) 
 Cripto 1 monoclonal (CT)  畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子單克隆抗體(C端) 
 Cripto 1 monoclonal  畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子單克隆抗體 
 CSFV Polyprotein  豬瘟病毒抗體 
 SMN1  運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元生存蛋白1 
 CSMD1  CSMD1抗體 
 CRTAM  CRTAM抗體 
 CRX1  CRX抗體 
 CSP  環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲(chóng))抗體 
 C-SKI/v-SKI  C-SKI抗體 
 NR2F2/NR2F1  載脂蛋白AI調(diào)節(jié)蛋白1抗體 
 Calcitonin  降鈣素抗體 
 Calcitonin  降鈣素抗體


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