【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人胚胎皮膚成纖維細胞;HES操作步驟
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一男性胚胎的皮膚組織。2005年由*昆明細胞庫建立。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
操作步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢:
1、細胞株種類齊全,包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等
2、*,專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株,免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片,三天回傳細胞生長狀態圖片,五天內有問題公司負責重發,超過五天時限至一個月內重發細胞收半價,超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠,完善、穩定的實驗體系,優秀的科研隊伍,*的實驗設備、準確可靠的實驗結果,是您可靠的合作伙伴
6、此外,我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
附試驗法)
葡萄糖轉運蛋白10(GLUT10)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
葡萄糖轉運蛋白11(GLUT11)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
葡萄糖轉運蛋白7(GLUT7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
葡萄糖轉運蛋白14(GLUT14)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
葡萄糖轉運蛋白5(GLUT5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
葡萄糖轉運蛋白6(GLUT6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
葡萄糖轉運蛋白9(GLUT9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
葡萄糖轉運蛋白8(GLUT8)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
鈉鉀氯協同轉運蛋白1(NKCC1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
陰離子/糖轉運蛋白(AST)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
鈉/葡萄糖協同轉運蛋白1(SGLT1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
鈉/葡萄糖協同轉運蛋白2(SGLT2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
X-轉運蛋白3(Xtrp3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
*轉運蛋白2(GLYT2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
牛磺酸轉運蛋白(TAUT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
X-轉運蛋白2(Xtrp2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
*轉運蛋白1(GLYT1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
*轉運蛋白(FOLT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
尿酸鹽轉運蛋白1(URAT1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
白磷酸酶2Cα抗體
PP1C gamma 蛋白磷酸酶γ1抗體
PP2A alpha/beta 蛋白質磷酸酶-2A抗體
PP2CA/PPM1A 蛋白磷酸酶2C亞型α抗體
phospho-PPM1A(Ser375) 磷酸化蛋白磷酸酶2C亞型α抗體
PP2Ac/PP4C 磷酸酯酶-2Ac抗體
PPAR-delta/beta D型-過氧化酶活化增生受體抗體
PPAR alpha α型-過氧化酶活化增生受體抗體
phospho-PPAR alpha(Ser12) 磷酸化α型-過氧化酶活化增生受體抗體
PPAR gamma 過氧化酶活化增生受體γ抗體
Phospho-PPAR Gamma (ser112) 磷酸化過氧化酶活化增生受體γ抗體
PPIA/Cyclophilin A 親環蛋白(親環素)PPIA抗體
PPIB/Cyclophilin B 親環蛋白(親環素)PPIB抗體
PPIG 親環蛋白(親環素)PPIG抗體
Phospho-PPIG (Ser376) 磷酸化親環蛋白(親環素)PPIG抗體
PPIL1 親環素相關蛋白1抗體
AKT/PKB 蛋白激酶B
phospho-AKT/PKB(Ser473) 磷酸化蛋白激酶B抗體
phospho-Akt(Thr308) 磷酸化蛋白激酶B抗體
phospho-AKT1/AKT2(Thr308+Thr309) 磷酸化蛋白激酶B抗體
phospho-AKT1(Ser129) 磷酸化蛋白激酶B抗體
phospho-Akt(Thr450) 磷酸化蛋白激酶B抗體
Phospho-HDAC4(Ser246)/HDAC5(Ser259)/HDAC7(Ser155) 磷酸化組蛋白去乙酰化酶4/5/7抗體
Phospho-HDAC4(Ser632)/HDAC5(Ser498)/HDAC7(Ser486) 磷酸化組蛋白去乙酰化酶