AGL1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10圖片細(xì)胞的種類:
*種:
是凍存產(chǎn)品,由液氮直接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶。一般不*這種,也較少使用這種方式,因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式,快遞時(shí)間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購(gòu)買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè),*進(jìn)口來源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
AGL1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10圖片操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營(yíng)養(yǎng)豐富,可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃,225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時(shí),30℃培養(yǎng)可降低錯(cuò)誤重組的概率,若轉(zhuǎn)化control pUC19計(jì)算轉(zhuǎn)化效率,則需37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。
6. 將平板倒置放于37℃或30℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
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AGL1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10圖片注意事項(xiàng):
1. 感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過長(zhǎng),長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。
? 雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2C7
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H446
MAP2K4 Others Mouse 小鼠 MKK4 / MEK4 / MAP2K4 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
L6565細(xì)胞,小鼠L6565白血病克隆細(xì)胞系 人胃癌細(xì)胞,MKN-28細(xì)胞 猴源細(xì)胞
非必需氨基酸 100XNEAA
TIMP1 Others Human 人 TIMP-1 / TIMP1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人上皮細(xì)胞;MCF-10A
IL5 Others Mouse 小鼠 IL5 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p7
Dami細(xì)胞,巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞 黑色素瘤,MM96L細(xì)胞 人卵巢畸胎瘤細(xì)胞;PA-1
615小鼠前胃癌瘤株;Fc
CD40 Others Human 人 CD40 / TNFRSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2C7
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H446
MAP2K4 Others Mouse 小鼠 MKK4 / MEK4 / MAP2K4 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
L6565細(xì)胞,小鼠L6565白血病克隆細(xì)胞系 人胃癌細(xì)胞,MKN-28細(xì)胞 猴源細(xì)胞
非必需氨基酸 100XNEAA
TIMP1 Others Human 人 TIMP-1 / TIMP1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
LYSOZYME,EGGWHITE*超純級(jí)白色結(jié)晶粉末FROZENsigma
109-73-9正丁胺;1-丁胺;1-基丁烷n-ButylaMine;1-AMinobutane
化銫5克
4-(2-)嗎啉 4-(2-Hydroxyethyl)morpholine,99% 622-40-2 100G 通用試劑
(S, S)-環(huán)己 (1S,2S)-(+)-1,2-Diaminocyclohexane,≥9... 21436-03-3 250MG 通用試劑
莫西沙星,英文名或英文縮寫:Moxifloxacin,級(jí)別:BR,10%,規(guī)格:25毫升
7726-95-6溴水BroMine water
DL-α-基,英文名或英文縮寫:DL-2-Aminobutyric acid,級(jí)別:BR,99%,規(guī)格:1克
腦磷脂 Cephalin,≥98% 90989-93-8 5MG 通用試劑
甘酸二肽 Gly-Gly (cell culture tested, ≥99%) 556-50-3 25G 基酸
AGL1 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10圖片牛肉蛋白胨1克2~8℃,避光
叔丁基過氧化輕溶液(+4℃) tqrt-Butyl xy7nopqroxidq 72-91-
N-Acetylaniline 103-84-4
2-乙氧基苯胺 2-Ethoxyaniline,98.0% 94-70-2 250ML 通用試劑
OED24K型酶制劑、抗生素發(fā)酵工業(yè)消泡劑/Antifoam OED24K BR 250毫升 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
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