兔II型膠原Col IIelisa試劑盒費(fèi)用的操作要點(diǎn):
1)標(biāo)本的采取和保存:可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本;
2)試劑的準(zhǔn)備:所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的后一步溫育反應(yīng),此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。儀器準(zhǔn)備為酶標(biāo)儀。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定。
兔II型膠原Col IIelisa試劑盒費(fèi)用 Rabbit Collagen Type II/Col II ELISA Kit
兔II型膠原Col IIelisa試劑盒費(fèi)用 【實(shí)驗(yàn)用途】Collagen Type II(II型膠原):為構(gòu)成基底膜主要成份,反映基底膜膠原更新率,含量增高可較靈敏反映出肝纖過程,是肝纖的早期標(biāo)志之一。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)*(biotin)標(biāo)記。樣品和*標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
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兔II型膠原Col IIelisa試劑盒費(fèi)用試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、*標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、*標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
兔II型膠原Col IIelisa試劑盒費(fèi)用液體類標(biāo)本:
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1)血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5)組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
小鼠4羥基壬烯酸(4-HNE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat cyclin D1 (Cyclin-D1) ELISA Kit 大鼠細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒
Humanglucocoicoidreceptor-α,GR-αELISAKit 人糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanComplemefragme4b,C4bELISA試劑盒人補(bǔ)體片斷4b(C4b)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織CDK2/CYCLINA激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanProteoglycan,PGELISAKit人蛋白聚糖(PG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Neuroophic factor of rat glial cell line derived (GDNF) ELISA Kit 大鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒
Humanneurofilameprotein,NFELISAKit 人神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanactivatedproteinC,APCELISA試劑盒人活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
脂質(zhì)過氧化物反式十八碳四烯酸(cis-parinaricacid)ELISA定量測定試劑盒48/96次
MouseAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白 -1 g (mouse MIP-1 g ) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 R&D
小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白 -1β(mouse MIP-1β) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 R&D
小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白 -2(mouse MIP-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 R&D
小鼠巨嗜細(xì)胞炎性蛋白 -1 a (mouse MIP-1 a /CCL3) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T *
FAM3B Protein Human 重組人 FAM3B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
M14 人黑色素瘤細(xì)胞
CD300A Others Mouse 小鼠 CD300A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
MDA-MB-468人癌細(xì)胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-468 L-15+10%FBS
615小鼠癌瘤株;Ca759
人胚皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-ESF-1 人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CL-0300NCI-H661(人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
IL1R1 Others Mouse 小鼠 IL1R1 / CD121a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠胰腺星狀細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
A9小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞 A9 mice subcutaneous connective tissue cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS
IL1B Protein Rat 重組大鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (pro form, His 標(biāo)簽)
NEC(人食管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 NIH/3T3(胚胎成纖維細(xì)胞)
兔II型膠原Col IIelisa試劑盒費(fèi)用FAM3B Protein Human 重組人 FAM3B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
M14 人黑色素瘤細(xì)胞
CD300A Others Mouse 小鼠 CD300A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
MDA-MB-468人癌細(xì)胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-468 L-15+10%FBS
615小鼠癌瘤株;Ca759
人胚皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-ESF-1 人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL