人胰高血糖素(GC)elisa試劑盒說明書試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、*標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、*標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人胰高血糖素(GC)elisa試劑盒說明書 Human glucagon,GC ELISA Kit
人胰高血糖素(GC)elisa試劑盒說明書 【實驗用途】胰高血糖素(glucagon) 亦稱胰增血糖素或抗胰島素或胰島素B。它是伴隨胰島素由脊椎動物胰臟的胰島α細(xì)胞分泌的一種激素。與胰島素相對抗,起著增加血糖的作用。于1953年,被分離沉淀而取得結(jié)晶。它是以N-末端*為起點,C末端*為終點的29個氨基酸殘基組成的一條單鏈肽(分子量約為3500),分子內(nèi)不具有S-S鍵。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)*(biotin)標(biāo)記。樣品和*標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
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人胰高血糖素(GC)elisa試劑盒說明書液體類標(biāo)本:
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1)血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5)組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
人胰高血糖素(GC)elisa試劑盒說明書的操作要點:
1)標(biāo)本的采取和保存:可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本;
2)試劑的準(zhǔn)備:所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的后一步溫育反應(yīng),此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。儀器準(zhǔn)備為酶標(biāo)儀。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定。
小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human motilin (MTL) ELISA Kit 人胃動素(MTL)ELISA試劑盒
HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGHELISAKit 人免疫反應(yīng)性生長激素(irGH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCoicosterone,COELISA試劑盒人皮質(zhì)同/腎上腺同(CO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織CHK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanProteinPhosphatase,PPELISAKit人蛋酸酶(PP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠*型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human calf iestinal alkaline phosphatase (CIAP) ELISA Kit 人牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒
HumanHydroxyproline-RichGlycoprotein,HRGPELISAKit 人羥*糖蛋白(HRGP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Human26Sproteasome,26SPSMELISA試劑盒人26S蛋白酶體(26SPSM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母纖維素酶(cellulase)活性熒光定量檢測試劑盒20次
Mouseapelin12,AP12ELISAKit小鼠apelin12(AP12)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
FIGF Protein Mouse 重組小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
HT1080 人成纖維肉瘤細(xì)胞
IFNGR1 Others Mouse 小鼠 IFNGR1 / CD119 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
UM-UC-3人膀胱移行細(xì)胞癌 UM-UC-3 human bladder ansitional cell carcinoma MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS
牛腎細(xì)胞;MDBK
大鼠心肌細(xì)胞(RCM)(1×106) Ca Ski, 人細(xì)胞 Human
CL-0370J774A.1(小鼠單核巨噬細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
ART4 Others Mouse 小鼠 ART4 / CD297 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠支氣管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
HOC 肝卵圓細(xì)胞 HOC of hepatic oval cells DMEM+10% FBS
IL1B Protein Canine 重組狗 IL-1 beta / IL1B 蛋白
NCI-H295R(人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SK-N-SH(神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)
人胰高血糖素(GC)elisa試劑盒說明書FIGF Protein Mouse 重組小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
HT1080 人成纖維肉瘤細(xì)胞
IFNGR1 Others Mouse 小鼠 IFNGR1 / CD119 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
UM-UC-3人膀胱移行細(xì)胞癌 UM-UC-3 human bladder ansitional cell carcinoma MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS
牛腎細(xì)胞;MDBK
大鼠心肌細(xì)胞(RCM)(1×106) Ca Ski, 人細(xì)胞 Human