人硫氧化還原蛋白(Trx)elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) Human Thioredoxin,Trx ELISA Kit
人硫氧化還原蛋白(Trx)elisa試劑盒說(shuō)明書(shū) 【實(shí)驗(yàn)用途】硫氧化還原蛋白Thioredoxin(Trx)是一種重要的氧化還原調(diào)節(jié)分子,廣泛存在于生物體內(nèi),與Trx還原酶和NADPH共同組成一個(gè)廣譜的蛋白二硫鍵還原系統(tǒng),在穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)氧化還原環(huán)境與調(diào)節(jié)蛋白-蛋白,蛋白-核酸相互作用等方面起重要作用。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測(cè)相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)*(biotin)標(biāo)記。樣品和*標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過(guò)PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)因子呈正相關(guān)。
人硫氧化還原蛋白(Trx)elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、*標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、*標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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人硫氧化還原蛋白(Trx)elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)液體類(lèi)標(biāo)本:
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1)血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5)組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
小鼠Endoglin蛋白(ENG)ELISA試劑盒 ,英文名: ENG ELISA Kit
人酸激酶(PK)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanpyruvatekinase,PKELISAKit 96T/48T
大鼠*(Gln)免疫試劑盒 Rat glamine,Gln ELISA Kit
CLIAKitforVGCC(Humanvoltage-gatedcalciumchannel)ELISAKit人鈣離子通道抗體規(guī)格:48T/96T
酶解法PCR清潔試劑盒20次
ELISAKitOVAsIgG人卵清蛋白特異性IgG規(guī)格:48T/96T
小鼠細(xì)胞色素氧化酶(CC0)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human lymphocyte function associated aigen 3 (LFA-3/CD58) ELISA Kit 人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒
Humanfibronectioelatedaigen,FRAELISAKit 人纖維連接素相關(guān)抗原(FRA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenImmunoglobulinE,IgEELISA試劑盒雞免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞CYP1A2蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次
Mousegrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit小鼠生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠新生甲狀腺素elisa試劑盒 小鼠新生甲狀腺素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠新生甲狀腺素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠新生甲狀腺素試劑盒、小鼠新生甲狀腺素elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素elisa試劑盒 小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素試劑盒、小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠心肌肌鈣蛋白elisa試劑盒 小鼠心肌肌鈣蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠心肌肌鈣蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠心肌肌鈣蛋白試劑盒、小鼠心肌肌鈣蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白異質(zhì)體elisa試劑盒 小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白異質(zhì)體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白異質(zhì)體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白異質(zhì)體試劑盒、小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白異質(zhì)體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
白細(xì)胞介素-12超家族
小鼠卵巢成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
BST2 Others Mouse 小鼠 TETHERIN / BST2 / CD317 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
P9小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞 P9 mouse bone marrow somal cells 1640+10%FBS
T-104AII型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
SW 1353(人骨肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CBRH-7919(大鼠肝癌細(xì)胞)
CM-M042小鼠直腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨細(xì)胞分化培養(yǎng)基MCDM
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S3 細(xì)胞,Hela細(xì)胞 HEL299(紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0910
MESDC2 Others Human 人 MESDC2 / MESD 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人硫氧化還原蛋白(Trx)elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)白細(xì)胞介素-12超家族
小鼠卵巢成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
BST2 Others Mouse 小鼠 TETHERIN / BST2 / CD317 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
P9小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞 P9 mouse bone marrow somal cells 1640+10%FBS
T-104AII型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
SW 1353(人骨肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CBRH-7919(大鼠肝癌細(xì)胞)
人硫氧化還原蛋白(Trx)elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)的操作要點(diǎn):
1)標(biāo)本的采取和保存:可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本;
2)試劑的準(zhǔn)備:所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后??乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,這一保溫過(guò)程稱(chēng)為溫育。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動(dòng)洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的后一步溫育反應(yīng),此時(shí)酶催化無(wú)色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。儀器準(zhǔn)備為酶標(biāo)儀。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定。