大鼠I型前膠原羧基端肽(PICP)elisa試劑盒費(fèi)用 Rat PICP ELISA Kit
大鼠I型前膠原羧基端肽(PICP)elisa試劑盒費(fèi)用 【實(shí)驗(yàn)用途】PICP,Ⅰ型前膠原羧基末端前肽。Ⅰ型前膠原蛋白是占骨有機(jī)基質(zhì)的90%的Ⅰ型膠原合成的前體,其兩端的羧基末端前肽(PICP)和氨基末端前肽(PINP)被兩個(gè)特異性的蛋白水解酶解離. 由于PICP的解離和Ⅰ型膠原的合成比例為1:1,故在組織間液中的PICP含量是反映Ⅰ型膠原合成的靈敏和特異性的定量指標(biāo),并且已證實(shí)血清PICP水平與骨形成的組織計(jì)量學(xué)參數(shù)和鈣動(dòng)力學(xué)研究結(jié)果呈顯著正相關(guān)。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)*(biotin)標(biāo)記。樣品和*標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
大鼠I型前膠原羧基端肽(PICP)elisa試劑盒費(fèi)用試劑配制
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、*標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、*標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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大鼠I型前膠原羧基端肽(PICP)elisa試劑盒費(fèi)用液體類標(biāo)本:
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1)血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5)組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
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GCG 4233-96-9 藥理實(shí)驗(yàn)單體 沒食子兒沒食子酸酯
紫玉蘭Magnolia liliflora none 74048-71-8 C22H28O5 ≥98% 鐵鎳基鑄造高溫合金雜質(zhì)成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(G016 4
Kaempferiin苷482-38-2山柰苷20mg/支
Carbinoxamine 馬來酸卡比沙明標(biāo)準(zhǔn)品3505-38-2200mg
Digitoxin 洋地黃毒苷 71-63-6 C41H64O13 ≥95%
白亮獨(dú)活Heracleum candicans Rivulobirin E 237407-59-9 C32H30O11 ≥95%
牡荊速數(shù)李糖苷VitqxihcmnosidqHPLC≥98%;20mg/支
當(dāng)歸素;比克芷內(nèi)酯; 比克芷素 Byakangelicin 19573-01-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材火炭母121477-200501TLC法鑒別
(C13:0,C15:1,C17:2,C15:0,C17:1)純度:≥99%
大鼠I型前膠原羧基端肽(PICP)elisa試劑盒費(fèi)用棕櫚酸視黃酯標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
膠乳粒子標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(20μm)Latexpaiclesofstandardsubstance(20m)10mL
Isoginkgetin 異銀杏雙黃同 548-19-6
Stearate (AS)硬脂酸標(biāo)準(zhǔn)品557-04-0 5g
*D 3877-86-9 HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
大鼠I型前膠原羧基端肽(PICP)elisa試劑盒費(fèi)用的操作要點(diǎn):
1)標(biāo)本的采取和保存:可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本;
2)試劑的準(zhǔn)備:所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,這一保溫過程稱為溫育。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動(dòng)洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的后一步溫育反應(yīng),此時(shí)酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。儀器準(zhǔn)備為酶標(biāo)儀。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定。