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顯色培養基操作流程

閱讀:130發布時間:2018-10-22

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顯色培養基操作流程

1. 固體和半固體樣品:稱取 25 g 樣品置盛有 225 mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質杯內,8000 r/min~10000 r/min 均質 1 min~2 min,或放入盛有225 mL 稀釋液的無菌均質袋中,用拍擊式均質器拍打 1 min~2 min,制成 1:10 的樣品勻液。

2 液體樣品:以無菌吸管吸取 25 mL 樣品置盛有 225 mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌錐形瓶瓶內預置適當數量的無菌玻璃珠中,充分混勻,制成 1:10 的樣品勻液。

3 用 1 mL 無菌吸管或微量移液器吸取1:10 樣品勻液 1 mL,沿管壁緩慢注于盛有 9 mL 稀釋液的無菌試管中注意吸管或吸頭不要觸及稀釋液面,振搖試管或換用1 支無菌吸管反復吹打使其混合均勻,制成 1:100 的樣品勻液。

4 按 6.1.3 操作程序,制備 10 倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次,換用 1 次 1 mL 無菌吸管或吸頭。

5 根據對樣品污染狀況的估計,選擇 2 個~3 個適宜稀釋度的樣品勻液液體樣品可包括原液,在進行 10 倍遞增稀釋時,吸取 1 mL 樣品勻液于無菌平皿內,每個稀釋度做兩個平皿。同時,分別吸取 1 mL 空白稀釋液加入兩個無菌平皿內作空白對照。

6 及時將 15 mL~20 mL 冷卻至 46 ℃的平板計數瓊脂培養基可放置于 46  ±1  ℃℃恒溫水浴箱中保溫傾注平皿,并轉動平皿使其混合均勻。


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