Cell Counting Kit-8簡稱CCK-8試劑盒，是一種基于WST-8（化學名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽），適用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。
Figure.1 CCK-8（WST-8）反應機制
實驗原理：
WST-8屬于MTT的升級產品，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產物（formazan）。顏色的深淺與細胞的增殖成正比，與細胞毒性成反比。使用酶標儀在450mM波長處測定OD值，間接反映活細胞數量。
用途：
CCK-8法應用非常廣泛，如藥物篩選、細胞增 殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等。
為什么將Cell Counting Kit (CCK-8) 作為細胞增殖與毒性檢測佳選擇：
- 如下表，CCK-8法與其他細胞增殖/毒性檢測方法的優勢比較，結果不言而喻！
| 檢測方法 | MTT法 | XTT法 | WST-1法 | CCK-8法 |
| 甲臜產物的水溶性 | 差（需加有機溶劑溶解后再檢測） | 好 | 好 | 好 |
| 產品性狀 | 粉末 | 2瓶溶液 | 溶液 | 1瓶溶液 |
| 使用方法 | 配成溶液后使用 | 現配現用 | 即開即用 | 即開即用 |
| 檢測靈敏度 | 高 | 很高 | 很高 | 高 |
| 檢測時間 | 較長 | 較短 | 較短 | zui短 |
| 檢測波長 | 560-600nm | 420-480nm | 420-480nm | 430-490nm |
| 細胞毒性 | 高，細胞形態*消失 | 很低，細胞形態不變 | 很低，細胞形態不變 | 很低，細胞形態不變 |
| 試劑穩定性 | 一般 | 較差 | 一般 | 很好 |
| 批量樣品檢測 | 可以 | 非常適合 | 非常適合 | 非常適合 |
| 便捷程度 | 一般 | 便捷 | 便捷 | 非常便捷 |
* 細胞毒性非常低，因此加入WST-8顯色后，可以在不同時間反復用酶標儀讀數從而找到佳測定時間
* 酚紅和血清對CCK法的檢測不會造成干擾（扣除空白孔即可）
如何選擇合適的CCK-8檢測試劑盒？
目前市面上能提供的【CCK-8】細胞增殖／毒性檢測試劑盒有國產分裝或原產的，國產分裝的CCK-8試劑盒在質量穩定性上有不足。而原產于國內實驗室的CCK-8試劑盒有些具有較好的檢測結果，在批次之間的穩定性上較難控制。至于*供應CCK-8試劑盒的進口品牌并不多，就連Abcam、Thermo，Sigma等等幾個品牌都不能夠提供CCK-8試劑盒，而其它品牌在性價比上遠遜于Abbkine產品。
作為Abbkine品牌旗下細胞分析旗艦產品，Cell Counting Kit (CCK-8)，Abbkine研發工程師為其傾注了大量的投入，不斷摸索優化佳的配方，每一份努力只為讓科研工作者更加簡單，，穩定地獲取珍貴的科研數據。
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| 產品名稱及描述 | 貨號 | 產品說明 |
| Cell Counting Kit-8 (CCK-8) | KTC011001 | 詳情 |
本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經配制好的含有WST-8的CCK-8溶液，無須再進行任何配制等操作 。無須使用同位素，所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內完成。不必洗滌細胞，不必收集細胞，也不必采用額外的步驟去溶解formazan。可以用于大批量樣品的檢測。
《【CCK-8】細胞增殖／毒性檢測試劑盒綜合對比》
| 品牌（規格） | Abbkine | Sigma | Dojindo |
| 100次 | 200 元 | 703.17 元 | 350 元 |
| 500次 | 640 元 | 2779.92 元 | 890 元 |
| 2000次 | 2050 元 | 13899.6 元(3000次） | —— |
| 10000次 | 7180 元 | —— | 8380 元 |
實驗注意事項：
- 建議先做幾個孔摸索接種細胞的數量和加入CCK-8試劑后的培養時間。
- 有條件的情況下建議采用多通道移液器，可以減少平行孔間的差異。加入CCK-8試劑時，建議斜貼著培養板壁加，不要插到培養基頁面下加，容易產生氣泡，會干擾OD值讀數。
- 白細胞可能需要培養較長時間。
- 當使用標準96孔板時，貼壁細胞的zui小接種量至少為1,000 個/孔 (100 μL 培養基)。檢測白細胞時的靈敏度相對較低，因此*接種量不低于2,500 個/孔 (100 μL 培養基)。如果要使用24孔板或6孔板實驗，請先計算每孔相應的接種量，并按照每孔培養基總體積的10%加入CCK-8溶液。
- 如果沒有450nm的濾光片，可以使用吸光度在430-490 nm之間的濾光片，但是450nm濾光片的檢測靈敏度高。
- 如果待測物質有氧化性或還原性的話，可在加CCK-8之前更換新鮮培養基，去掉藥物的影響。當然藥物影響比較小的情況可以不更換培養基，直接扣除培養基中加入藥物后的空白吸收即可。
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CCK-8實驗操作指南：
CCK-8常見問題匯總：
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