硝酸纖維素膜,13×20cm1張實驗步驟使用方法:
一、交換反應(yīng) 1. 實驗前需自備的試劑:7 M 醋酸銨、*乙醇、70%乙醇等
2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液: 成分 加入的體積 自備的 5’磷酸化 DNA 片段 14 μL(≤5 pmoles 的 5′末端) 5×交換反應(yīng)緩沖液 5 μL [γ -32P] ATP 5 μL T4 多聚核苷酸激酶(10 U/μL) 1 μL 滅菌的超純水 補足到 25 μL 注:5 pmoles 的 5’末端約等于 0.17 μg 的長 100 bp 的雙鏈 DNA。
3. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 70℃加熱 5~10 分鐘使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀時使其終濃度達 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
7. 離心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。 8. 用適當 Buffer 溶解沉淀。 注:通過第 5~8 步操作幾乎可以除去大部分未反應(yīng)的[γ-32P] ATP,如要 *將其除去時,乙醇沉淀后用凝膠過濾等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白質(zhì)時,請在第
8 步之后進行。
硝酸纖維素膜,13×20cm1張實驗步驟產(chǎn)品介紹:
硝酸纖維素膜,13×20cm1張實驗步驟磷酸化反應(yīng)標記:
A. 去磷酸化反應(yīng)
1. 實驗前需自備的試劑:TE 飽和酚/、3 M NaCl 、*乙醇、70% 乙醇、牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)等 2. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液: 成分 加入的體積 自備的 DNA 片段 133 μL(≤10 μg) 1 M Tris-HCl,pH 8.0 15 μL 牛小腸堿性磷酸酶 (CIAP,10~20 U/μL)
2 μL 滅菌的超純水 補足到 150 μL
3. 50℃反應(yīng) 30 分鐘。
4. 加入 150 μL 的 TE 飽和酚//(25:24:1),充分混勻。
5. 離心,取上層(水層)移到另一個微量離心管中。
6. 重復(fù)操作 4~5。
7. 加入 7.5 μL 的 3 M NaCl(zui終濃度 150 mM)。
8. 加入 375 μL(2.5 倍量)的冷無水乙醇,-20℃放置 30~60 分鐘。
9. 離心回收沉淀,用 1 mL 70%的冷乙醇清洗后,沉淀真空干燥。 10. 使用 20 μL 的 TE Buffer 溶解沉淀。
硝酸纖維素膜,13×20cm1張實驗步驟磷酸化反應(yīng)(前反應(yīng)):
1. 在微量離心管中制備下列反應(yīng)液:

2. 37℃反應(yīng) 30 分鐘。
3. 下面的操作與交換反應(yīng)的第 4-8 步操作相同。
合成 DNA 寡核苷酸的標記:
當摻入水平很低的時候,需要使用本步驟,即通過體積排阻色譜或過濾試 劑盒除去未反應(yīng)的標記。Sephadex G-50 層析柱(需另購)對于去除未摻入 的 dNTPs 效果很好,它還能大幅減少小于 20 個堿基的 DNA 寡核苷酸和小于 20 bp 的雙鏈 DNA 的量。使用之前需要在 70℃加熱 5~10 分鐘以使 T4 多 聚核苷酸激酶失活。Sephadex G-25 層析柱可以用來純化長度不小于 10 個 堿基的寡核苷酸。
RaKa-Ray培養(yǎng)基250g用于啤酒中乳酸菌檢測和分離培養(yǎng)
雙歧桿菌BS培養(yǎng)基 Bifidobacterium BS Medium 用于雙歧桿菌分離培養(yǎng)
強化梭菌培養(yǎng)基 RCM 250克 梭菌的增菌培養(yǎng)和計數(shù)
Tinsdale瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于白喉桿菌的分離培養(yǎng),每培養(yǎng)基中需添加血清以及250ubationmediaTinsdale瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于白喉桿菌的分離培養(yǎng),每培養(yǎng)基中需添加血清以及2501
PSAgar
Raka-RayMedium
李氏菌選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)(MMA) Modified Mcbride Agar Base 用于單增李氏菌選擇性分離(SN標準)
TBB培養(yǎng)基 Tybobutyricum Broth Base 250克 乳酪產(chǎn)品中梭菌的計數(shù)
2250sdale瓊脂基礎(chǔ)添加劑5ml×盒每支用于中incubationmedia2250sdale瓊脂基礎(chǔ)添加劑5ml×盒每支用于中
腸球菌肉湯 250g 用于腸球菌增菌培養(yǎng)
肉湯培養(yǎng)基250g用于初次分離細菌的增菌培養(yǎng)
糖發(fā)酵基礎(chǔ)肉湯 Bromcresol Purple Broth Base 適用于微生物檢驗中各種糖發(fā)酵實驗,無菌加入各種糖醇類物質(zhì)(SN標準)
SCHAEDLER厭氧菌瓊脂 SCHAEDLER Agar 250克 厭氧菌的分離培養(yǎng)
亞碲酸鉀血瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于白喉桿菌的分離培養(yǎng),需添加亞碲酸鉀及羊血incubationmedia亞碲酸鉀血瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于白喉桿菌的分離培養(yǎng),需添加亞碲酸鉀及羊血
EnterococcusBroth
xtroseBrothMedium
李氏菌增菌肉湯(LB1,LB2)基礎(chǔ) Listeria Enrichment Broth Base 添加奈啶酮酸,吖啶黃素,即為LB1,LB2,用于李氏菌二步增菌(GB標準)
WILKINS-CHALGREN厭氧菌瓊脂 WILKINS-CHALGREN Agar 250克 厭氧菌的分離培養(yǎng)
哆醇Y培養(yǎng)基瓶用于哆醇測定incubationmedia哆醇Y培養(yǎng)基瓶用于哆醇測定
腦心浸萃液肉湯 250g 用于營養(yǎng)苛求細菌的增菌培養(yǎng)
UBA培養(yǎng)基500g用于啤酒檢驗
七葉苷培養(yǎng)基 Esculin Medium 生化試驗培養(yǎng)基,用于細菌七葉苷利用試驗(SN標準)
產(chǎn)氣莢膜梭菌瓊脂 MCP Agar 250克 產(chǎn)氣莢膜梭菌的計數(shù)和培養(yǎng)
Korthof培養(yǎng)基250g/瓶用于鉤端螺體的增菌培養(yǎng),每培養(yǎng)基中需添加兔(羊、或馬)血清8mlincubationmediaKorthof培養(yǎng)基250g/瓶用于鉤端螺體的增菌培養(yǎng),每培養(yǎng)基中需添加兔(羊、或馬)血清8ml
BrainHeartInfusionBroth
商業(yè)無菌檢驗培養(yǎng)基
半固體動力培養(yǎng)基 Motility Test Medium(Semisolid) 用于動力觀察,菌種保存,H抗原位相變異試驗等(SN標準)
GAM瓊脂 Anaerobic Agar 250克 用于梭菌和其他厭氧菌的分離培養(yǎng)
EMJH培養(yǎng)基250g/瓶用于鉤端螺體的增菌培養(yǎng),每90ml培養(yǎng)基中添加260ubationmediaEMJH培養(yǎng)基250g/瓶用于鉤端螺體的增菌培養(yǎng),每90ml培養(yǎng)基中添加2601
腦心浸液瓊脂(BHIA) 250g 用于營養(yǎng)苛求細菌的增菌培養(yǎng)
f–Fraser培養(yǎng)基 Half-Fraser Medium 用于李氏菌的增菌培養(yǎng)
PY培養(yǎng)基 PY Medium 250克 產(chǎn)氣莢膜梭菌的培養(yǎng)
大腸桿菌/大腸菌顯色培養(yǎng)基l用于快速、準確同時檢測大腸桿菌和大腸菌,培養(yǎng)24小時,大腸桿菌顯紫色,大腸菌顯紅色incubationmedia大腸桿菌/大腸菌顯色培養(yǎng)基l用于快速、準確同時檢測大腸桿菌和大腸菌,培養(yǎng)24小時,大腸桿菌顯紫色,大腸菌顯紅色
MEI培養(yǎng)基 1000ml 用于一步濾膜法顯色檢測或計數(shù)水中的腸球菌
硝酸纖維素膜,13×20cm1張實驗步驟靈敏度試驗:合格
水溶解試驗:合格
乙醇溶解試驗:合格
〖灼燒殘渣〗:18.0~24.0%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:橙棕色結(jié)晶。253~254℃時分解。溶于水和乙醇,微溶于丙同和乙二醇乙迷,幾乎不溶于其他有機溶劑。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)酸堿指示劑,金屬著色劑。常用1%鈉鹽作指示劑
〖保存〗:RT
茜素黃R鈉鹽
〖英文名稱〗:Alizarin yellow R sodium salt;Sodium 5-[(4-nitrophenyl)azo]salicylate;Mordant Yellow 3R
〖其他名稱〗:對硝基苯偶氮*;茜草素黃R鈉鹽;媒染黃3R;茜素黃鈉鹽
〖CAS號〗:1718-34-9
C13H8N3NaO5=309.21
〖級別〗:IND