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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司


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DNA 堿性膠上樣液 ,6×1.5mL實(shí)驗(yàn)步驟

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品       牌

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

DNA 堿性膠上樣液 ,6×1.5mL實(shí)驗(yàn)步驟運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸、4℃保存(miRNAon、miRNA Marker 需要-20C 保存)。保存期為一年。

詳細(xì)介紹

DNA 堿性膠上樣液 ,6×1.5mL實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品及特點(diǎn):
尿素-聚丙烯酰胺凝膠電泳(Urea PAGE)是目前分離 200 nt 以下的小片段 RNA,尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法,但是單獨(dú) 配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn):
1. 一站式,含有電泳所需要的所有試劑,即開(kāi)即用,十分方便,免去了 實(shí)驗(yàn)人員稱取有毒物品。
2. 靈活,可以根據(jù)需要配制各種濃度的 Urea-PAGE,以便對(duì)長(zhǎng)度各異 的 RNA 進(jìn)行電泳。
3. 電泳后可直接用于 UV 觀察、銀染、膠回收、Northern 雜交和放射自 顯影等。
4. 使用新型緩沖液,可以防止甘油的干擾。
DNA 堿性膠上樣液 ,6×1.5mL實(shí)驗(yàn)步驟產(chǎn)品介紹:

DNA 堿性膠上樣液 ,6×1.5mL實(shí)驗(yàn)步驟使用方法:
一、準(zhǔn)備工作 1. 用固相 RNase 清除劑清潔工作的臺(tái)面和器皿(詳見(jiàn)該產(chǎn)品的使用手冊(cè))。 2. 配制 1 X 電泳緩沖液 將適量的 10X 電泳緩沖液用 RNase-free 水稀釋 10 倍,得到 1X 電泳緩 沖液待用。 3. 配制 10%過(guò)硫酸銨溶液 精確稱取約 100 mg 過(guò)硫酸銨到一干凈的 1.5 mL 離心管中,按每 1 mg 過(guò)硫酸銨加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水,搖晃致溶, 立即使用。注意:放置時(shí)間不要超過(guò)一周。
二、配制凝膠 1. 估計(jì)所需要的凝膠溶液的體積,一般配制一塊 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的膠需要 15 mL 凝膠溶液,配制一塊 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的膠 需要 120 mL 凝膠溶液。 2. 新鮮的 40%的丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液的配制:在裝有 60g 丙烯酰 胺干粉的瓶中加入約 130 mL 自備的去離子水,然后將全部甲叉雙丙烯酰 胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙烯酰胺溶液沖洗出來(lái)以避免粉末有 毒粉末飄出。甲叉雙丙烯酰胺溶解度低,不會(huì)溶解在這少量溶液中)。充 分搖晃混勻后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是這樣可以在下步留出足夠空間加尿素。
3. 根據(jù)所需要的凝膠溶液的體積,在一的干凈的三角瓶中按下表加入各成分 (此處以配制 100mL 濃度為 15%的凝膠為例):

4. 攪拌并加熱到 40-50℃左右,直到尿素*溶解。
5. 冷卻到室溫后,將三角瓶接上真空系統(tǒng)抽真空處理 10-15 分鐘以充分去 除溶液中的氧氣(氧氣會(huì)降低聚合反應(yīng)效率)。但如果實(shí)驗(yàn)條件有限,此 步也可以省略。
6. 邊搖晃溶液變加入 50 uL TEMED 和 500 uL 10%過(guò)硫酸銨。注意:即 使選擇其他工作濃度的 Acrylamide/Bis,TEMED 和 10%過(guò)硫酸銨的用 量也不需要隨之改變。但如果配置的凝膠溶液的體積變化,TEMED 和 10%過(guò)硫酸銨的用量也要按比例改變。
7. 再充分搖晃約 30 秒后迅速灌膠,然后插入樣品梳。
8. 室溫放置 30-60 分鐘使膠凝固。
9. 將凝膠板放置在電泳裝置上后,在上下層分別加入適當(dāng)量的 1X 電泳緩沖 液。如果不馬上使用,需要有濕紙將上樣孔端蓋住以防凝膠過(guò)度干燥。
10. 拔出梳子后用加樣槍吸取電泳緩沖液,充分將每個(gè)加樣空中未聚合的 Acrylamide/Bis、尿素和氣泡吹打出來(lái)。

〖CAS號(hào)〗:709-50-2
C7H14O6=194.18
〖級(jí)別〗:BR
〖含量〗:≥98%(GC)
〖熔點(diǎn)〗:109~112℃
〖比旋光度〗:-31~-35o(C=5,H2O)
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:白色粉末,溶于水:100mg/ml
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
D-山梨糖
〖英文名稱〗:D-(+)-Sorbose
〖其他名稱〗:D(+)-山梨糖
〖CAS號(hào)〗:3615-56-3
C6H12O6=180.16
〖級(jí)別〗:BR
〖含量〗:≥98%(GC)

DNA 堿性膠上樣液 ,6×1.5mL實(shí)驗(yàn)步驟胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯TSB-YE2600g廣泛用于細(xì)菌的培養(yǎng),特別用于食品中李斯特氏菌的增菌培養(yǎng)(GB/T4789.30-200005,ISO標(biāo)...
E.E. 肉湯 (緩沖葡萄糖亮綠膽汁肉湯) (CM0317) Oxoid incubation media E.E. 肉湯 (緩沖葡萄糖亮綠膽汁肉湯) (CM0317) Oxoid
深紅酵母 支/瓶
LactoseBroth
肉湯培養(yǎng)基I 250g 用于沙門(mén)氏菌選擇性增菌培養(yǎng)。
Fraser肉湯增菌液FBSR0x5支試劑A和試劑B各一支添加于225ml(026080)中配成FB
DNase 瓊脂 (CM0321) Oxoid incubation media DNase 瓊脂 (CM0321) Oxoid
深黃被孢霉 模式菌株 支/瓶
去氧膽酸鹽瓊脂(DC)250g用于大腸菌固體平板測(cè)定
Brothmedium
PALCAM瓊脂凍干配套試劑SR00支每支添加于(026070)中配成PALCAM瓊脂。
平板計(jì)數(shù)瓊脂 (CM0325) Oxoid incubation media 平板計(jì)數(shù)瓊脂 (CM0325) Oxoid
蜃樓耶爾森氏菌 支/瓶
DesoxycholaactoseAgar
瓊脂培養(yǎng)基J 250g 用于沙門(mén)氏菌選擇性分離培養(yǎng)
李氏增菌液LB2凍干配套試劑SR00支每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。
1號(hào)抗生素培養(yǎng)基(Seed 瓊脂) (CM0327) Oxoid incubation media 1號(hào)抗生素培養(yǎng)基(Seed 瓊脂) (CM0327) Oxoid
生孢梭菌 糖化菌 支/瓶
MR-VP培養(yǎng)基250g用于大腸桿菌的甲基紅和VP試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))
AgarmediumJ(Deoxycholatecitrateagar)
李氏增菌液LB試劑SR00支每支添加于225ml(026040)中配成LB
霍亂菌培養(yǎng)基TCBS (CM0333) Oxoid incubation media 霍亂菌培養(yǎng)基TCBS (CM0333) Oxoid
生香霉 模式菌株。抗菌防腐劑的含量測(cè)定 支/瓶
MethylRedVogesProskauerBroth
瓊脂培養(yǎng)基K 250g 用于沙門(mén)氏菌選擇性分離培養(yǎng)
EB增菌液凍干配套試劑SR0090支添加于225ml(0260成EB增菌液。
Mueller-Hinton 瓊脂 (CM0337) Oxoid incubation media Mueller-Hinton 瓊脂 (CM0337) Oxoid
繩狀青霉 溶菌試驗(yàn) 支/瓶
西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂250g用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))
AgarmediumK(Xylose,lysine,deoxycholateagar)
酸(酪蛋白水解物) 50


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