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上海邦景實業有限公司
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閱讀:243發布時間:2017-10-27
細胞株檢驗方法
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復至室溫。
2.取所需用量酶標板條,設空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻,置37℃反應30分鐘。
5.扣去孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復洗滌5次,拍干。
6.每孔加酶標記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應30分鐘。
7.洗滌,同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應10分鐘。
9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調零,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。
注意事項
1. 在使用前,一抗二抗均應測試其合適的稀釋度。
2. 多聚甲醛的固定是不穩定的,標本經多聚甲醛固定后,應再用去污劑處理,如果標本在水溶液中浸泡的時間過長,則會使交聯結構解體。因此,應避免固定后的標本在水溶液中浸泡的時間過長。
3. 信號微弱的解決方法:
① 提高一抗和二抗的濃度以增強敏感性 ,這必須測試各種濃度抗體的滴度;
② 延長一抗和二抗的孵育時間。由于細胞染色時抗原吸附在固相載體上,抗原抗體結合時間較在溶液中長。孵育時間可因實驗設計作適當調整,但少于20min抗體和抗原幾乎不能有效結合。在以上兩點中,應摸索出一個條件以產生有效信號且保持良好的背景。這就需要反復試驗,因為每組抗體和抗原的情況會有所不同;
③ 改變檢測方法,用共聚焦顯微鏡觀察,可提高敏感性。
細胞株Col I 型膠原細胞檢測試劑盒 48 tests/48 well plate
Fibro 纖維母細胞粘附檢測試劑盒 48 tests/48 well plate
MTT MTT細胞活力和增殖檢測試劑盒 1000 tests/96 well plate
WST WST-1細胞活力和增殖檢測試劑盒 1000 tests/96 well plate
CSA 細胞衰老檢測試劑盒 50 tests/53 mm plate
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NO 一氧化氮色標法檢測試劑盒 250 tests/96 well plate
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CSK 活/死細胞染色試劑盒 1000 tests/96 well plate
GAPDH 比色法GAPDH分析試劑盒 1000 tests/96 well plate
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CCCSCK
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MYCO 支原體PCR檢測試劑盒 100tests
CAT 過氧化氫酶活性分析試劑盒 100tests
CAS 細胞凋亡蛋白酶-3分析試劑盒 100tests
GPX *過氧化物酶分析試劑盒 100tests
EndoFectagen® 內皮細胞轉染試劑盒 250 Transfections
FibroFectagen® 成纖維細胞轉染試劑盒 200 Transfections
EpiFectagen® 上皮細胞轉染試劑盒 100 Transfections
MesenFectagen® 間充質干細胞轉染試劑盒 250 Transfections
AstroFectagen®星形細胞轉染試劑盒 250 Transfections
KeratoFectagen® 角質細胞轉染試劑盒 200 Transfections
SMCFectagen® 平滑肌細胞轉染試劑盒 250 Transfections
NeuroFectagen® 神經細胞轉染試劑盒 200 Transfections細胞株
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