干細(xì)胞實(shí)驗(yàn)內(nèi)標(biāo)法的操作：
① 將已知量的內(nèi)標(biāo)樣加入標(biāo)準(zhǔn)樣品，制成混合標(biāo)樣，并配制一系列的已知濃度的工作標(biāo)樣。混合標(biāo)樣中標(biāo)樣與內(nèi)標(biāo)樣的摩爾比不變。
② 注入色譜柱，以（標(biāo)樣峰面積/內(nèi)標(biāo)樣峰面積）為響應(yīng)值。
③ 根據(jù)響應(yīng)值與工作標(biāo)樣濃度之間存在的線性關(guān)系，即W=f×A，制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。
④ 將已知量的內(nèi)標(biāo)樣加入未知樣品，注入色譜柱，得到欲測組分的響應(yīng)值。
⑤ 根據(jù)已知的系數(shù)f，即可求出欲測組分的濃度。
注意事項(xiàng)
1. 正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括:
（1） 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
（2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。
（3） 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定（見酶標(biāo)記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
干細(xì)胞MODS 間充質(zhì)干細(xì)胞成骨細(xì)胞分化生長添加物 5 ml
MADS 間充質(zhì)干細(xì)胞脂肪細(xì)胞分化生長添加物 5 ml
MSCGS 間充質(zhì)干細(xì)胞生長添加物 5 ml
MSCGS-2 間充質(zhì)干細(xì)胞生長添加物-無血清 5 ml
MSCGS-acf 間充質(zhì)干細(xì)胞生長添加物-無動物成分 5 ml
MCDS 間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨細(xì)胞分化生長添加物 5 ml
MEpiCGS 上皮細(xì)胞生長添加物 5 ml
FBS 胎牛血清 10 ml
FBS 胎牛血清 25 ml
T/E */EDTA消化液 100 ml
TNS *中和液 100 ml
NECDS 非酶細(xì)胞裂解液 100 ml
CFM 細(xì)胞凍存液 50 ml
SF-CFM 無血清細(xì)胞凍存液 50 ml
TB 臺盼藍(lán) 50 ml
DPBS 磷酸鹽緩沖注 500 ml
HBSS * 500 ml
PLL 多聚賴氨酸 1 mg/ml 1 ml
PLL 多聚賴氨酸10 mg/ml 1 ml
FBS 胎牛血清 500 ml
P/S */*溶液 5 ml
P/S */*溶液 100 ml
AMS 抗真菌溶液 50 ml
ABAMS 抗霉菌溶液 50 ml
CCGW 細(xì)胞培養(yǎng)超純水 500 ml
MDS 肌細(xì)胞分離液 100 ml
BPE 牛腦垂體提取物 25 mg
BPE 牛腦垂體提取物 100 mg
ITS 胰島素鐵硒傳遞蛋白 100x 10 ml
L-Gue 左旋*溶液 200 mM 100 ml
NEAA 非必需氨基酸 100X 100 ml干細(xì)胞
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