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犬腎細胞系/野生型;MDCK/wild特性

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更新時間:2017-02-13 11:32:38瀏覽次數:442次

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產品簡介

犬腎細胞系/野生型;MDCK/wild特性現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!

詳細介紹

犬腎細胞系/野生型;MDCK/wild特性來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

細胞名稱  犬腎細胞系/野生型;MDCK/wild特性
形態特性   上皮細胞樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞系源自一只雌性英國可卡犬的腎臟組織,由S.H. Madin and N.B. Darby于1958年建立。該細胞為角蛋白陽性細胞。 
培養條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況  C7
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR   STR鑒定
同工酶  
染色體  
使用權限  A類

產品名稱生長特性發貨地貨期
貼壁生長上海3-5天

細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
人P0蛋白抗體(IgG)免疫試劑盒    Human myelin protein zero antibody IgG ELISA Kit
人OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成酶抗體(OJ/IleRS)免疫試劑盒    Human anti-OJ-antibody,OJ/IleRS ELISA Kit
人N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-*(AcSDKP)免疫試劑盒    Human N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit
人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)免疫試劑盒    Human N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG ELISA Kit
人N-甲基-D-天冬氨酸受體(NMDAR)免疫試劑盒    Human N-methyl-D-aspartic Acid Receptor,NMDAR ELISA Kit
人N鈣黏蛋白/神經鈣黏蛋白(N-Cad)免疫試劑盒    Human N-Cad ELISA kit
人N端中段骨鈣素(N-MID-OT)免疫試劑盒    Human N-MID-OT ELISA Kit
人N端前腦鈉素(NT-proBNP)免疫試劑盒    Human N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP ELISA KIT乳酸脫氫酶(+4℃)    L-Lactic dehydrogenase    9001-60-9
乳糖一水    Lactose Monohydrate    5989-81-1
乳糖膽鹽發酵管培養基    NA    
乳糖膽鹽培養基    Lactose Bile Medium    
乳糖蛋白胨培養基    Lactose medium    
乳糖發酵培養基    Lactose Ferment Broth    
乳糖肉湯    LACTOSE BROTH FOR MICROBIOLOGY*    
軟骨素酶 (-20℃)    CHONDROITINASE ABC    9024-13-9
噻吩-2.5-二羧酸97%    2,5-Thiophenedicarboxylic acid    4282-31-9
噻吩-2-磺酰氯    2-Thiophenesulfonyl chloride    16629-19-9
噻吩-2-甲醛    ;    1998/3/3
噻唑藍    Thiazolyl Blue    298-93-1

 

 


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