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敘利亞倉鼠皮膚細胞;GH-S1培養

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品       牌

廠商性質代理商

所  在  地上海

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更新時間:2017-02-13 11:03:19瀏覽次數:472次

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產品簡介

敘利亞倉鼠皮膚細胞;GH-S1培養細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

產品名稱敘利亞倉鼠皮膚細胞;GH-S1培養
貨期3-5天
發貨地上海

細胞名稱  敘利亞倉鼠皮膚細胞;GH-S1培養
形態特性   成纖維細胞樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞系來源于一雌性敘利亞倉鼠的皮膚組織。2002年由*昆明細胞庫建立。 
培養條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%NBS
傳代方法   1:2傳代;3-4天一次
傳代情況  P4
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  熒光法(-)
STR   -
同工酶  
染色體  
使用權限  A類

復蘇操作要點: 
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
硫酸鈦    TITANIUM(IV) SULFATE    27960-69-6
十二水合硫酸鐵銨    Ammonium ferric sulfate dodecahydrate    7783-83-7
硫酸亞汞    MERCUROUS SULFATE    7783-36-0
硫酸亞鈦    TITANIUM (III) SULFATE    19495-80-8
*銨;馬爾氏鹽;低鐵礬;亞鐵銨礬;硫酸低鐵銨;六水合*銨;*銨;六水合硫酸鐵銨;六水合硫酸鐵(Ⅱ)銨    Ferrous aluM;Ferrous aMMoniuM sulfate;Mohr'salt    7783-85-9
硫酸亞錫    Stannous sulfate    7488-55-3
硫酸鹽    NA    
硫酸銦 無水    Indium sulfate    13464-82-9
硫酸鷹爪豆堿(+4℃)    (-)-Sparteine sulfate pentahydrate    6160/12/9
硫酸*    PROTAMINE SULFATE    53597-25-4人白血病抑制因受體(LIFR)免疫試劑盒    Human LIFR ELISA Kit
人白細胞酯酶(LE)免疫試劑盒    Human Leukocyte esterase,LE ELISA Kit
人白細胞免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)免疫試劑盒    human LILRB4 ELISA Kit
人白細胞抗原DR(HLA-DR)免疫試劑盒    Human Leukocyte Antigen-DR,HLA-DR ELISA Kit
人白細胞活化黏附因(ALCAM)免疫試劑盒    Human ALCAM ELISA Kit
人白細胞調節素(LR)免疫試劑盒    Human leukoregulin,LR ELISA Kit
人白色念珠菌(C.albicans)免疫試劑盒    Human Candida albicans ELISA kit
人白三烯E4(LTE4)免疫試劑盒    Human leukotriene E4,LT-E4 ELISA Kit
人白三烯D4(LTD4)免疫試劑盒    Human leukotriene D4,LTD4 ELISA Kit
人白三烯C4(LTC4)免疫試劑盒    Human Leukotriene C4,LT-C4 ELISA Kit
人白三烯B4(LTB4)免疫試劑盒    Human Leukotriene B4,LT-B4 ELISA Kit

 

 


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