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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司


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人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株;7WCY1.0復(fù)蘇

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)代理商

所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2017-02-13 09:58:32瀏覽次數(shù):366次

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產(chǎn)品簡介

人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株;7WCY1.0復(fù)蘇現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品名稱生長特性發(fā)貨地貨期
人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株;7WCY1.0復(fù)蘇貼壁生長上海3-5天

細(xì)胞名稱  人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株;7WCY1.0復(fù)蘇
形態(tài)特性   多角
生長特性  貼壁生長
特征特性   采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法穩(wěn)定轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞突變型PS1(C41OY)基因和野生型APP基因,所得細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)APP及PS1蛋白。 
培養(yǎng)條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS;250ug/ml G418+2.5ug/ml puromycin
傳代方法   1:3傳代;2~3天1次。
傳代情況  不詳
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)  培養(yǎng)法(-)
STR   -
同工酶  
染色體   
使用權(quán)限  A類

人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株;7WCY1.0復(fù)蘇 來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株;7WCY1.0復(fù)蘇操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
人人胱抑素F(CST7)免疫試劑盒    Human Cystatin-F,CST7 ELISA kit
人胱抑素B(CSTB/CST6/STFB)免疫試劑盒    Human Cystatin-B,CSTB/CST6/STFB ELISA kit
人胱抑素A(CSTA/STF1/STFA)免疫試劑盒    Human Cystatin-A,CSTA/STF1/STFA ELISA kit
人胱硫醚β-合酶(CBS)免疫試劑盒    Human cystathionine β-synthase,CBS ELISA Kit
人胍基丁胺脲水解酶/凝集酶(AGMAT)免疫試劑盒    Human AGMAT ELISA Kit
人瓜氨酸免疫試劑盒    Human Citrulline ELISA Kit
人骨織素(Ostn)免疫試劑盒    Human osteocrin,Ostn ELISA kit
人骨形成蛋白6(BMP-6)免疫試劑盒    Human BMP-6 ELISA Kit二苯基羰酰二肼    1,5-Diphenylcarbazide    140-22-7
二苯基亞砜    Phenyl sulfoxide    945-51-7
二苯基乙酰氯    Diphenylacetyl chloride    1871-76-7
二芐基甲酮    1,3-Diphenylacetone    102-04-5
二芐基硫醚    Dibenzyl sulphide    538-74-9
二甲鈉    Sodium cacodylate trihydrate    6131-99-3
二甲亞砜 99.7+%    Dimethyl sulfoxide    67-68-5
甲縮醛;二甲氧基甲烷;甲醛縮二甲醇;二甲醇縮甲醛    Methylal;DiMethoxy-Methane; ForMal;ForMaldehyde diMethyl acetal;    109-87-5
1,2-乙二硫醇;二硫代乙二醇;1,2-二巰基乙烷;1,2-乙烷二硫醇    1, 2-Ethanedithiol;Dithioglycol;1,2-DiMercaptoethane;Dithioethyleneglycol;Ethylene Mercaptan;Ethylone diMercaptan    540-63-6
人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株;7WCY1.0復(fù)蘇二硫化鉬    MOLYBDENUM(IV) SULFIDE    1317-33-5
二硫化碳    Carbon disulfide;Dithiocarbonic anhydride    75-15-0
二氯磷酸苯    Phenyl dichlorophosphate    770-12-7

 

 


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