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大鼠腦膠質瘤細胞;C6復蘇

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更新時間:2017-02-13 08:53:31瀏覽次數:271次

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產品簡介

大鼠腦膠質瘤細胞;C6復蘇現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!

詳細介紹

大鼠腦膠質瘤細胞;C6復蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

細胞名稱  大鼠腦膠質瘤細胞;C6復蘇
形態特性   成纖維細胞樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   C6是由Benda等用N-亞硝基甲脲誘導的大鼠膠質瘤克隆,并經過一系列的體外培養和動物傳代交替后建成的。該細胞表達S-100;產生生長激素;糖皮質激素作用下可以產生磷酸甘油脫氫酶。當細胞從低密度生長至回合狀態時,S-100產量增加10倍。 
培養條件   F12K  馬血清,15%,牛血清,2.5
傳代方法   1:2~1:3
傳代情況  
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養法(-)
STR  
同工酶  
染色體  
使用權限  A類

產品名稱生長特性發貨地貨期
貼壁生長上海3-5天

細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
柯薩奇病毒(Cox V)抗體(IgG)免疫試劑盒    Human Coxsackie virus(Cox V)antibody(IgG)ELISA Kit
人抗組織轉*酶(tTG)抗體(IgG)免疫試劑盒    Human Anti-tissue transglutaminase(tTG)antibody(IgG)ELISA kit
x人抗中性粒細胞胞漿抗體(cANCA)IgM 免疫試劑盒    human anti-neutrophil cytoplasmic antibody,cANCA IgM ELISA Kit
人抗中性粒/中心體抗體(ACA)免疫試劑盒    Human anti-centrol and centrosome antibody,ACA ELISA Kit
人抗增殖細胞核抗原(PCNA)抗體免疫試劑盒    Human proliferating cell nuclear antigen(PCNA)antibody ELISA Kit
人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)免疫試劑盒    Human anti-scleroderma 70 antibody,SCL70/topoⅠELISA Kit
人抗抑制素B抗體(IgG)免疫試劑盒    Human anti-Inhibin B antibody IgG Elisa kit
人抗異質型核糖核蛋白抗體/抗RA33抗體(anti-hnRNP-ab/anti-RA33-ab)免疫試劑盒    Human anti-hnRNP-ab/anti-RA33-ab ELISA Kit
人抗異*氨酰tRNA連接酶,細胞質(IARS)抗體免疫試劑盒    Human anti isoleucine-tRNA ligase,cytoplasmic(IARS)antibody ELISA kitL-白氨醇    L(+)-Leucinol    7533-40-6
L-苯丙氨醇    L-Phenylglycinol    3182-95-4
L-苯*甲酯鹽酸鹽    ;    7524-50-7
L-苯*乙酯鹽酸鹽    Ethyl L-phenylalaninate hydrochloride    3182-93-2
L-苯甘氨醇    (S)-(+)-2-Phenylglycinol    20989-17-7
L-*;;;L-2-氨基-4-甲硫基丁酸    L-Methionine    63-68-3
L-*芐酯對甲苯磺酸鹽    L-Leucine benzyl ester p-toluenesulfonate salt    1738-77-8
L-*鹽酸鹽    L(+)-Ornithine hydrochloride    3184-13-2
L-哌啶-2-羧酸    L(-)-Pipecolinic acid    3105-95-1
L-蘋果酸    L(-)-Malic acid    97-67-6
L-乳酸脫氫酶(+4℃)    NA    

 

 

 


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