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抗人pirin單抗雜交瘤細(xì)胞；IIIA3bC1E12D1培養(yǎng)

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產(chǎn)品簡介

抗人pirin單抗雜交瘤細(xì)胞；IIIA3bC1E12D1培養(yǎng)細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

產(chǎn)品名稱	抗人pirin單抗雜交瘤細(xì)胞；IIIA3bC1E12D1培養(yǎng)
貨期	3－5天
發(fā)貨地	上海

細(xì)胞名稱 抗人pirin單抗雜交瘤細(xì)胞；IIIA3bC1E12D1培養(yǎng)
形態(tài)特性   淋巴母細(xì)胞樣
生長特性半貼壁生長
特征特性   可產(chǎn)生單克隆抗體。
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C30
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類

復(fù)蘇操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
豚鼠孕激素(progestogen)免疫試劑盒   Guinea pig progestogen Elisa kit
豚鼠乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)免疫試劑盒   Guinea pig hepatitis B virus surface antigen,HBsAg ELISA kit
豚鼠乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)免疫試劑盒   Guinea pig anti-hepatitis B virus surface antibody,HBsAb ELISA kit
豚鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒   Guinea Pig amyloid A,SAA ELISA Kit
豚鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒   Guinea pig angiotensin Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit
豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)免疫試劑盒   Guinea Pig plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA Kit
豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)免疫試劑盒   Guinea Pig advanced glycation end products,AGEs ELISA Kit
豚鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離蛋白(ECP)免疫試劑盒   Guinea Pig eosinophil cationic protein,ECP ELISA KitVM培養(yǎng)基   shēng huà shì jì   容量：       100克
TRPR（梅毒）   shēng huà shì jì   容量：       25片/盒
RNase&DNase清除劑   shēng huà shì jì   容量：       25克
RIPA組織細(xì)胞快速裂解液   shēng huà shì jì   容量：       10片/箱
Rink-Amide樹脂   shēng huà shì jì   容量：       1公斤
Rink Amide AM樹脂   shēng huà shì jì   容量：   RT   5克
PH試紙   shēng huà shì jì   容量：
Pfu酶   shēng huà shì jì   容量：   2～8℃，避光   1克
PEA瓊脂   shēng huà shì jì   容量：       10張/盒
PCR純化Kit   shēng huà shì jì   容量：       1公斤
PBS緩沖液   shēng huà shì jì   容量：   保存：-20℃   50次/250ul/支
PALCAM添加劑   shēng huà shì jì   容量：       1米