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小鼠半乳糖凝集素-3ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

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小鼠半乳糖凝集素-3(Galectin-3)ELISA試劑盒操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
32ng/L    5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
16ng/L    4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
8ng/L    3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
4ng/L    2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2ng/L    1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。 
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.小鼠半乳糖凝集素-3(Galectin-3)ELISA試劑盒測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
131236-250    牛血清白蛋白封堵液    250mL
131247-250    4% 多聚甲醛 (RNA )    250 mL
131248-250    4% 多聚甲醛    250 mL
131276-250    Baker 甲醛鈣中性固定液    250 mL
131277-250    Lillie 甲醛中性固定液    250 mL
131278-250    戊二醛磷酸緩沖固定液    250 mL
131280-250    Zetterqvist 固定液    250 mL
131281-250    乙醇 - 甲醛固定液    250 mL
131282-250    多聚甲醛 - 磷酸緩沖固定液    250 mL
131283-250     多聚甲醛 - 氫氧化鈉固定液    250 mL
131288-250    Maximov 固定液    250 mL
131289-250    PLP 固定液    250 mL
131290-250    PLPD 固定液    250 mL
131291-250    Methacarn 固定液    250 mL
131292-250    PFG 固定液    250 mL
131293-250    對(duì)苯醌固定液    250 mL
131294-250    ECD-G 固定液    250 mL
131296-50    細(xì)胞周期與凋亡檢測(cè)試劑盒(PI 法)    50 次
140105-250    Zamboni 固定液    250 mL
140209-250    考馬斯亮藍(lán) R-250 染液    250mL
140218-10    DB3.1 感受態(tài)細(xì)胞    10×100μL
140234-100    SYBR Green II 核酸染料    100 μL
140277-100    酸水解酪素    100g
小鼠半乳糖凝集素-3(Galectin-3)ELISA試劑盒

 


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