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技術文章

人cAMP反應元件結合免疫ELISA分析

閱讀:339發布時間:2016-3-21

ELISA試劑盒實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人 cAMP 反應元件結合蛋白(CREB)水平。用純
化的人 cAMP 反應元件結合蛋白(CREB)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微
孔中依次加入 cAMP反應元件結合蛋白(CREB),再與HRP標記的cAMP反應元件結合蛋白
(CREB)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。 TMB
在 HRP 酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中
的 cAMP 反應元件結合蛋白(CREB)呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD
值),通過標準曲線計算樣品中人cAMP反應元件結合蛋白(CREB)濃度。
試劑盒組成
1 20 倍濃縮洗滌液 30ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標試劑 6ml×1 瓶 8 標準品(180ug/L) 0.5ml×1 瓶
3 酶標包被板 12 孔×8 條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張   
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個

標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

注意事項
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未
用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值
大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10.  如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
使用目的:
本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中 cAMP 反應元件結合蛋白(CREB)含
量。

CRBN    cereblon蛋白抗體
CTRP5    補體C1q和腫瘤壞死因子相關蛋白5抗體
CUG-BP1    胞苷尿苷鳥苷結合蛋白1抗體
Chordin    原腸胚雙向形成相關蛋白抗體
CDC123    細胞分裂周期蛋白CDC123抗體
CLN3    神經細胞蠟樣質脂褐質沉積病蛋白CLN3抗體
CKLFH3    趨化素樣因子超家族成員3抗體
CHMP1B    染色質修飾蛋白1B抗體
CIRBP    冷誘導RNA結合蛋白抗體
CLASP1    細胞連接相關蛋白1抗體

ELISA試劑盒


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