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火雞皰疹病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明

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  • 型號 50T
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更新時間:2020-11-18 14:12:23瀏覽次數:812

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產品簡介

火雞皰疹病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明是從土壤農桿菌 CP4 菌株中分離得到的抗除草劑草甘膦基因,是轉基因植物研究中常用的一種篩選標記基因,因此本公司根據探針法 qPCR 原理開發了專門用于檢測的試劑盒。

詳細介紹

實時熒光定量PCR:
實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統定量只能終點檢測的局限,實現了每一輪循環均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據標準曲線獲得定量結果。因此,實時熒光定量PCR無需內標是建立在兩個基礎之上的:
1)Ct值的重現性PCR循環在到達Ct值所在的循環數時,剛剛進入真正的指數擴增期(對數期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現性*,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內擴增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數存在線性關系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量準確,重現性的定量方法,已得到*的*,廣泛用于基因表達研究、轉基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。

產品名稱

英文名稱

貨號

火雞皰疹病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明

Herpesvirus of Turkey (HVT)

EY-P6810

熒光化學物質:

實時熒光定量PCR所使用的熒光物質可分為兩種:熒光探針和熒光染料?,F將其原理簡述如下:
1. TaqMan熒光探針:PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5'-3'外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物形成*同步。而新型TaqMan-MGB探針使該技術既可進行基因定量分析,又可分析基因突變(SNP),有望成為基因診斷和個體化用藥分析的技術平臺。
2. SYBR熒光染料:在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料非特異性地摻入DNA雙鏈后,發射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加*同步。SYBR僅與雙鏈DNA進行結合,因此可以通過溶解曲線,確定PCR反應是否特異。
3. 分子信標:是一種在5和3末端自身形成一個8個堿基左右的發夾結構的莖環雙標記寡核苷酸探針,兩端的核酸序列互補配對,導致熒光基團與淬滅基團緊緊靠近,不會產生熒光。PCR產物生成后,退火過程中,分子信標中間部分與特定DNA序列配對,熒光基因與淬滅基因分離產生熒光 。

熒光定量PCR服務:
公司推出,該技術不僅實現了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規PCR相比,它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點,目前該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化;比較不同組織的mRNA表達差異;驗證基因芯片,siRNA干擾的實驗結果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術服務,全部實驗皆使用進口試劑完成,主要定量PCR儀器。
1、熒光定量PCR服務要求:
(01)請您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總RNA(大于 5 ug/樣品);或直接提供純化好的DNA(大于 5 ug/樣品)。
(02)請提供已知的全長基因序列。
(03)請提供盡可能詳細的背景資料:DNA/RNA 來源等
2、熒光定量PCR操作程序
(01)引物(探針)設計與合成。
(02)提取DNA/RNA,樣本逆轉錄成cDNA。
(03)進行Real Time PCR實驗,進行實驗結果分析。
(04)實驗完成后,提供完整的實驗報告(含軟件分析結果)及引物等實驗材料。
3、熒光定量PCR的收費標準:
  我公司根據客戶的樣品數量進行不同的收費標準。

幾種傳統熒光定量PCR方法簡介:

1)內參照法:
在不同的PCR反應管中加入已定量的內標和引物,內標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內標也被擴增。在PCR產物中,由于內標與靶模板的長度不同,二者的擴增產物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內標為對照定量待檢測模板。
2)競爭法:
選擇由突變克隆產生的含有一個新內切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內切酶消化PCR產物,競爭性模板的產物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產物分開,分別測定熒光強度,根據已知模板推測未知模板的起始拷貝數。
3)PCR-ELISA法:
利用或生物素等標記引物,擴增產物被固相板上特異的探針所結合,再加入抗或生物素酶標抗體-辣根過氧化物酶結合物,終酶使底物顯色。常規的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內標,作出標準曲線,也可實現定量檢測目的。

腺嘌呤核苷,英文名或英文縮寫:Adenosine,級別:BR,60%,規格:800u  Ratbonealkalinephosphatase,BALPELISA試劑盒大鼠骨堿性酶(BALP)ELISA試劑盒規格:96T/48T

298-93-11唑藍Thiazolyl Blue  Humancoloncancer-specificaigen-3,CCSA-3ELISA試劑盒人大腸癌專一抗原3(CCSA-3)ELISA試劑盒規格:96T/48T

PEG8000,30%IN1.6MNACL聚乙二醇8000溶液生物技術級淡黃色液體RTsigma  HumanFactor-relatedAigen,FAgELISAKit人第八因子相關抗原(FAg)ELISA試劑盒規格:96T/48T

α-代肉桂醛 α-Chlorocinnamaldehyde,97% 18365-42-9 5G 通用試劑  牛雌二醇(E2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

硫化鎘/鎘黃/鎘桔黃/硫鎘礦/Cadmium sulfide CP,95%, 100 國產  人腫瘤壞死因子受體相關因子6(AF6)免疫試劑盒 Human tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,AF6 ELISA kit
蘋果酸脫氫酶測試盒(測血清)shēng huà shì jì容量:500/  大鼠鈣調蛋白依賴性蛋白激酶激酶(CaMKK)免疫試劑盒 Rat Calmodulin-depende protein kinase kinase,CaMKK ELISA Kit

Pre-hybridizationsolution 10ml 國產  CLIAKitforVAELISAKit大鼠維生素A規格:48T/96T

DL-蘋果酸25  內切核酸酶III處理DNA損傷彗星熒光檢測試劑盒20

5--2-;2--5- 5-qthyl-2-Mqthylpyridinq;2-Mqthyl-5-qthylpyridinq;5-qthyl-2-picolinq;cldqhydq collidinq;cldqhydinq;5-qthyl-α-picolinq;3-qthyl-6-Mqthylpyridinq;MqP 104-90-2  ELISAKitORM人類粘蛋白規格:48T/96T

LEUPEPTIN亮抑酶肽蛋白組學級25MG103476-89-7Frozen  小鼠ATP結合盒轉運蛋白A1(ABCA1)ELISA試劑盒 ,英文名: ABCA1 ELISA Kit
基酸乙酯,英文名或英文縮寫:etxyl carbamate,級別:高純,97%,規格:1毫克  小鼠Ⅲ型前膠原肽(PP)ELISA試劑盒 ,英文名: PP ELISA Kit

(-)-BUTACLAMOL xy7noCHLORIDE  裸鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA檢測試劑盒NudemouseAlpha-fetoprotein,AFPELISAKit 96T/48T

D-OrnithineHCL(R)-2,5-二基戊酸單鹽酸鹽1BR,98%  CD30分子(CD30)免疫試劑盒 Human cluster of differeiation 30,CD30 ELISA Kit

流代甜菜減 3-(Dimqthyl-octylczcniumyl)propcnq-1-sulfonctq 12178-76-4  英文名稱MouseproteinkinaseBELISAKit小鼠蛋白激酶B(PKB)規格:96T/48T

Dipxenylaminesulfonicacidwo7iumsalt二本胺-4-磺酸鈉1公斤CP,85%  冰凍切片神經元高爾基法(GOLGI)染色試劑盒20
火雞皰疹病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明寶石紅55025  組織脂酰輔酶A合成酶(ACYLCOASYHETASE)總活性酶連續循環比色法定量檢測試劑盒20

12633-95-3阿利新藍8GSALCIAN BLUE 8GX  HumanGelsolin,GSELISAKit人凝溶膠蛋白(GS)ELISA試劑盒規格:96T/48T

N,N'-二本基脲,英文名或英文縮寫:1,3-Dipxenylurea,級別:SP,規格:25  人細胞外信號調節激酶(ERK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

3-甲氧基-4-... 4-Hydroxy-3-methoxyacetophenone,98% 498-02-2 25G 通用試劑  豬饑餓激素(GHRL)免疫試劑盒 Pig Appetite-regulating hormone,GHRL ELISA kit

月桂醋;十二烷醋 Lcuric ccid 143-07-7  HumanSolubleClusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit 人可溶性白細胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

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