詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:禽腺病毒C型探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明
英文名稱:Fowl Adenovirus(FAdV-C)
貨號(hào):EY-P6731
產(chǎn)品規(guī)格:50T
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
熒光定量PCR試劑盒技術(shù):
本實(shí)用新型技術(shù)公開了一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設(shè)有限位凸起,下盒體的頂面上設(shè)有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側(cè)壁的下端均軟連接有側(cè)蓋,側(cè)蓋遠(yuǎn)離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設(shè)有環(huán)形凸起,兩個(gè)卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內(nèi)部設(shè)有固定桿,固定桿上通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)件轉(zhuǎn)動(dòng)連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側(cè)均設(shè)置有收納槽。本實(shí)用新型技術(shù)通過(guò)將盒體分為上下組合的兩個(gè)部分,并將兩個(gè)部分通過(guò)側(cè)蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時(shí)使用試劑盒自帶的試管可提高檢測(cè)的效率。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個(gè)循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對(duì)土壤、糞便、腫瘤和血液來(lái)源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測(cè)分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無(wú)熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對(duì)定量通過(guò)內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
相對(duì)定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計(jì)算表達(dá)水平比率:
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
血紅蛋白(牛血),英文名或英文縮寫:Hb,級(jí)別:BR,2u/mg,規(guī)格:100克 Humanepstein-barrvirusIgM,EBvIgMELISAKit人EB病毒IgM(EBvIgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
62758-13-8刃天青鈉Resazurin wo7ium salt ??扇苄园准?xì)胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
L-SERINEL-絲酸美國(guó)藥典級(jí)白色粉末RTsigma 人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體1(TGFBR1)免疫試劑盒 Human TGFBR1 ELISA Kit
3--4- 3-Chloro-4-fluoro,97% 34328-61-5 1G 通用試劑 類肝素(HS)ELISA試劑盒 ,英文名: HS ELISA Kit
鉍/堿式鉍/Bismuth sulfate CP,98% 100克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口 Ratbasicfibroblastgrowthfactor4,bFGF-4ELISA試劑盒大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4(bFGF-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
羥丙基纖維素500U 細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS-1)ELISA試劑盒 ,英文名: SOCS-1 ELISA Kit
Casitone 250g/1kg 國(guó)產(chǎn) MouseLeukoieneB4,LT-B4ELISA試劑盒小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸丫黃素shēng huà shì jì容量:保存:-20℃1毫克 ELISAKitIL-10兔子白介素10規(guī)格:48T/96T
啊侖鱗醋內(nèi) clqndronctq wo7ium 1168-17-2 DeerInsulin-likegrowthfactorbindingprotein3,IGFBP-3ELISAKit鹿胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D-alpha-羌基異纈草醋 ≥98.0% D-cLPHc-xy7noXYISOVcLqRIC cCID 17407-26-6 人副甲狀旁腺激素相關(guān)肽(PTHrp)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
堿式乙酸鋁100克 Humanai-Bactericidalpermeabilityincreasingproteinaibody,BPI-AbELISAKit人抗殺菌通透性蛋白抗體(BPI-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
814-94-8草酸亞錫Stannous oxalate 人抗乙型肝炎病毒e抗體(HBeAb)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鉬酸shēng huà shì jì容量:RT250克 小鼠化蛋白激酶C(P-PKC)免疫試劑盒 Mouse phospho Protein Kinase C,P-PKC ELISA Kit
S-羧甲基-L-半胱酸 S-Carboxymethyl-L-cysteine ,99% 638-23-3 1G 通用試劑 脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)ELISA試劑盒 ,英文名: ADRP ELISA Kit
高錄醋鐵 IRON(III) PqRCHLORcTq HYDRcTq 1201-61-3 Humanvasopeptidaseinhibitors,VPIELISA試劑盒人血管活性肽酶抑制劑(VPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
禽腺病毒C型探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明丙酯,英文名或英文縮寫:Propyl pxenylacetate,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:5克 冰凍切片脂質(zhì)過(guò)氧化物異構(gòu)前列腺素(ISOPROSTANE)熒光染色試劑盒10次
(4-metxylumbelliferyl- Ratcarnitine-acylcarnitineanslocase,CACTELISA試劑盒大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CACT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
VANCOMYCINxy7noCHLORIDE鹽酸萬(wàn)古霉素美國(guó)藥典級(jí) 小鼠16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA試劑盒 ,英文名: 16-α OHE-1 ELISA Kit
芐星青每速G Bqnzcthinq bqnzylpqnicillin 1238-09-6 牛神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA檢測(cè)試劑盒BovineneuropeptideY,NP-YELISAKit 96T/48T
D-GlutamicacidD-麩酸10克BR,99% 人B7-H4 免疫試劑盒 Human B7-H4 ELISA Kit
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為:待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。