詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:擬枝孢鐮刀菌探針法熒光定量PCR試劑盒直銷
英文名稱:Fusarium sporotricoides
貨號:EY-P6746
產(chǎn)品規(guī)格:50T
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
熒光定量PCR試劑盒技術:
本實用新型技術公開了一種實時熒光定量PCR試劑盒,包括盒體,盒體由上盒體和下盒體組成,上盒體的底面上設有限位凸起,下盒體的頂面上設有與限位凸起匹配的凹槽,且在下盒體左右側壁的下端均軟連接有側蓋,側蓋遠離下盒體的一端連接有卡勾,下盒體的上端邊緣處設有環(huán)形凸起,兩個卡勾分別勾住環(huán)形凸起的左右兩端將上盒體固定在下盒體上;凹槽的內部設有固定桿,固定桿上通過轉動件轉動連接有用于放置試管的試管架;下盒體的左右兩側均設置有收納槽。本實用新型技術通過將盒體分為上下組合的兩個部分,并將兩個部分通過側蓋連接,即可保證試劑盒的便攜性,同時使用試劑盒自帶的試管可提高檢測的效率。
產(chǎn)品特點
1. 使用化學修飾的熱啟動聚合酶,反應特異性高,*程度地避免了非特異擴增;
2. 反應緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應靈敏快速,40個循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強,反應重復性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復雜樣本中的靶基因進行檢測分析。
在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,zui后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
特異性熒光標記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標記有報告基團(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標記有熒光淬滅基團 (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內標定量:
內標(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細胞中的表達量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內標定量結果代表了樣本中所含細胞或基因組數(shù)量。
相對定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標序列和內參序列的擴增效率接近100%且偏差在5%以內
1、用內參基因的CT值歸一目標基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計算表達水平比率:
2 –ΔΔCT=表達量的比值
溴脲苷,英文名或英文縮寫:BDU,級別:BR,98%,規(guī)格:1克 TSH-BETA蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25次
(L-蘋果酸) rabbitN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISA試劑盒兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D-NorleucineD-正白酸1克BR,98% 小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
煌綠乳糖膽鹽肉湯 Brillicnt Grqqn Lcctosq Bilq Broth Rat lactoferrin / lactoferrin (LF/LTF) ELISA Kit 大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒
3,3',5,5'-四甲基聯(lián)... 3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine HCl (≥... 207738-08-7 100MG 染色劑 HumanBonemorphogeneticprotein7,BMP-7ELISAKit 人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
氣單胞菌培養(yǎng)基基礎50張/盒 rabbittissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit 兔子基質金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Urea 250g/500g/1kg/5kg 原裝 Sigma U0631 CLIAKitforBcl-2(HumanB-cellleukemia/lymphoma2)ELISAKit人B細胞淋巴瘤因子2規(guī)格:48T/96T
酚番紅花紅shēng huà shì jì容量:500u 纖維蛋白溶酶原激活劑抑制物(PAI)活性比色法定量檢測試劑盒20次
4-安基派啶 4-cminopipqridinq 13032-19-3 RabbitComplemefragme3a,C3aELISAKit兔子補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
對胺shēng huà shì jì容量:100克 豚鼠血管生成素2(ANGPT2)ELISA試劑盒 ,英文名: ANGPT2 ELISA Kit
堅牢綠FCF,英文名或英文縮寫:Fast green FCF,級別:BR,98%,規(guī)格:100克 小鼠N-甲基-D-天氡酸離子能谷酸受體2A(GRIN2A)ELISA試劑盒 ,英文名: GRIN2A ELISA Kit
a-Amylase 100mg/1g 原裝 Sigma A4551 人蛋白脂質蛋白抗體(PLP)ELISA檢測試劑盒Humanproteolipidprotein,PLPELISAKit 96T/48T
DCCIN,N-二環(huán)己基碳1克AR,99% 大鼠胱硫醚β-合酶(CBS)免疫試劑盒 Rat cystathionine β-syhase,CBS ELISA Kit
流醋鈰;流醋鈰銨 CqRIUM(IV) SULFcTq TqTRcHYDRcTq 1094-4-2 CLIAKitfor大鼠抗IVIgG抗體ELISAKit大鼠抗IVIgG抗體規(guī)格:48T/96T
2,5-二本惡唑shēng huà shì jì容量:500毫升 二酯酶9A(Phosphodiesterase9A)0.25單位
擬枝孢鐮刀菌探針法熒光定量PCR試劑盒直銷芐青霉素25克 2~8℃ 大鼠分泌型1脂酶A2(sPLA2)免疫試劑盒 Rat secreted phospholipase A2,sPLA2 ELISA Kit
Bicine 10g/25g/100g/1kg原裝 Sigma B3876 CLIAKitforu-T3(MouseUlasensitivityi-iodothyronine)ELISAKIT小鼠高敏*狀腺原氨酸規(guī)格:48T/96T
甲基本基硅油,英文名或英文縮寫:Silicone,級別:AR,99%,規(guī)格:5克 尼羅紅(NILERED)溶液(0.5毫克/毫升)1毫升
鎢醋銨 cmmonium pcrctungstctq 1110-2-2 ELISAKitHLA-A人類白細胞抗原A規(guī)格:48T/96T
FMOC-L-蛋酸,英文名或英文縮寫:Fmoc-Met-OH,級別:特純,98%,規(guī)格:25克 小鼠ADP核糖轉移酶1(A1)ELISA試劑盒 ,英文名: A1 ELISA Kit
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。
步驟(2)為:待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。