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ELISA試劑盒常用的檢查妙招

閱讀:246發布時間:2015-2-12

*、ELISA試劑盒的常用的檢查方法
良好的ELISA板應該是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之間、同一板各孔之間、同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工藝的差別,各種產品的質量差異很大,因此,每一批號的ELISA板在使用前須事先檢查其性能。
常用的檢查方法為:以一定濃度的人IgG包被ELISA板各孔,洗滌后每孔內加入適當稀釋度的酶標抗人IgG抗體,保溫后洗滌,加底物顯色,終止酶反應后,分別測每孔溶液的吸光度。控制反應條件,使各孔讀數在吸光度0.8左右。計算全部讀數的平均值。所有單個讀數與全部讀數的均數之差,應小于10%。
第二、ELISA試劑盒標本的采集及保存:
1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3.細胞培養物上清或其它生物標本:請1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:以上標本置4℃保存應小于1周,-20℃或-80℃均應密封保存,-20℃不應超過1個月,-80℃不應超過2個月;標本溶血會影響zui后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
第三、ELISA試劑盒的嚴格要求
在魚類白介素1βELISA試劑盒 中一般有二次抗原抗體反應,即加標本后和加結合物后,此時反應的溫度和時間應按規定的要求,保溫容器是水浴箱,可使溫度迅速平衡。各ELISA板不應疊在一起。為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕紗布的濕盒中。濕盒應該是金屬的,傳熱容易。如用保溫箱,空濕盒應預先放在其中,以平衡溫度,這在室溫較低時更為重要。加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
第四、ELISA試劑盒特異性
魚類甲狀腺素(T4)ELISA試荊盒用于檢測待測物質,經檢測與其它相儀物質無明顯交叉反應.由于受到技術及樣本來源的限制,不可能完成對所有相關或相儀物質交叉反應檢測,因此本試劑盒有可能與未經檢測的其它物質有交叉反應.


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