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磺胺甲惡唑檢測試劑盒

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更新時間：2018-12-20 15:18:43瀏覽次數(shù)：767次

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Ⅲ型前膠原氨基端肽試劑盒

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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

經(jīng)營模式：生產(chǎn)廠家

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聯(lián)系人：王先生（經(jīng)理）

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產(chǎn)品簡介

磺胺甲惡唑檢測試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。

詳細(xì)介紹

磺胺甲惡唑檢測試劑盒注意事項(xiàng)
1 使用試劑盒前請仔細(xì)閱讀說明書。
2 不要使用過期試劑盒。
3 試劑盒使用前，將試劑恢復(fù)至室溫（25±2℃），建議至少回溫2小時。
4 標(biāo)準(zhǔn)品中含有三聚氰胺，使用時應(yīng)特別注意，操作時應(yīng)帶手套。
5 終止液中含有硫酸，使用時防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。
6 不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不能混用，否則會影響試驗(yàn)結(jié)果。
7 不同批號試劑盒中的試劑不得混用；不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不得混用，否則會影響

磺胺甲惡唑檢測試劑盒用戶自備試劑：
1． 10mM TBS（pH7.2~7.4）
三羥基氨基甲烷 1.21g
氯化鈉 7.6g
加蒸餾水 800mL，濃鹽酸調(diào) pH 值至 7.2~7.4，后定容至 1000mL
TBS-T：TBS+Tween 20（0.05%體積比）
2．抗原修復(fù)液（依檢測抗原不同而選擇不同的修復(fù)液）
10mM pH6.0 檸檬酸緩沖液
檸檬酸 0.38g
檸檬酸三鈉 2.45g
加蒸餾水 900mL，濃鹽酸調(diào) pH 值至 6.0，后定容至 1000mL或：0.5M EDTA 修復(fù)液（pH8.0）
EDTA·2H2O 186.1g
檸檬酸三鈉 2.45g加蒸餾水 700mL，用 10mM NaOH 調(diào) pH 值至 8.0，后定容至 1000Ml
3. 緩沖甘油封固劑 10 mL
4. Tween 20 5 mL石蠟包埋組織切片免疫染色
實(shí)驗(yàn)步驟（建議方案）：
石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度
磺胺甲惡唑檢測試劑盒試劑盒所含試劑：
試劑 A 磺胺甲惡唑檢測試劑盒透液：0.1% Triton-X 100 10 mL（選用）
試劑 B 封閉緩沖液（封閉用） 20 mL
試劑 C （*分裝）已稀釋的即用型 ABCG2 一抗（2.5ml）
試劑 D （*分裝）*化羊抗兔 IgG 1 支（濃度 1.5 mg/mL，稀釋比為 1:300~1:500）50 μL+抗體稀釋液 20ml
試劑 E HRP-SA 復(fù)合物 1 支（濃度 1 μM，稀釋比 1:50~1:200）100 μL
試劑 F DAB 顯色液 5ml
1.烤片：將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr；
2.脫蠟：切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min；
3.水化：切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%乙醇 2min；75%乙醇 2min，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min；
4.抗原修復(fù)：根據(jù)抗體說明書*方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫度達(dá)到98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min，TBS 洗滌（2×2min）（體修復(fù)方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，
5 步封閉。5.封閉：滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min；
6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜；
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
8.封閉：滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min；
9.加二抗：滴加用抗體稀釋液稀釋的*化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育30 min；
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
11.封閉：滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min；
12.加 HRP-SA：滴加用抗體稀釋液稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37℃濕盒中孵育 30 min；
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）；
14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色；
15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明；
16.封片：待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片；
17.觀察成像：顯微鏡下觀察成像。