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上海撫生實業有限公司
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閱讀:277發布時間:2019-3-5
成纖維細胞生長因子23試劑盒
操作步驟:
1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在、第二孔中分別加標準品100μl,然后在、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻;混勻后從第五孔、第六孔中各取50μl分別加到第七孔、第八孔中價格,再在第七孔、第八孔中分別取50μl加到第九孔、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后隔空加樣量都為50μl,濃度分別為1200ng/L,800ng/L,400ng/L,200ng/L,100ng/L。)
2.加樣:分別在設空白(空白對照孔不加樣品幾酶標試劑,其余各步操作相同)、待測養品孔。在酶標包被樣板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40ng/L,然后再加待測樣品10ng/L(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。重復50次,拍干。
5.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
6.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
7.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立傳黃色)。
8.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行
注意事項:
1.試劑盒從冷藏環境中去除應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,西施是可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果
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