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矢車菊苷α2(CENTα2)ELISA試劑盒說明書

閱讀:286發布時間:2015-05-15

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矢車菊苷α2(CENTα2)ELISA試劑盒說明書
本試劑僅供研究使用  標本:體液

矢車菊苷α2(CENTα2)ELISA試劑盒說明書試驗原理:
BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將BFGF和*標記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA 檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關系。

矢車菊苷α2(CENTα2)ELISA試劑盒說明書自備材料
1.蒸餾水。
2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性
1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

矢車菊苷α2(CENTα2)ELISA試劑盒說明書操作注意事項
1.試劑應按標簽儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7.底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9.按照中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

矢車菊苷α2(CENTα2)ELISA試劑盒說明書樣品收集、處理及保存方法
1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準備
標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。

2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

矢車菊苷α2(CENTα2)ELISA試劑盒說明書操作步驟
1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值。

局限
6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。

矢車菊苷α2(CENTα2)ELISA試劑盒說明書性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

矢車菊苷α2(CENTα2)ELISA試劑盒說明書結果判斷與分析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的BFGF標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的BFGF含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值范圍:0-800pg/ml

4、敏感度: 1.0 pg/ml

 bFGF-4  大鼠堿性成纖維細胞生長因子4  規格: 48T/96T

 bFGF  大鼠堿性成纖維生長因子  規格: 48T/96T

 TAb  大鼠甲狀腺素抗體  規格: 48T/96T

 T4  大鼠甲狀腺素  規格: 48T/96T

 TG  大鼠甲狀腺球蛋白  規格: 48T/96T

 TPO  大鼠甲狀腺過氧化物酶  規格: 48T/96T

 PTHrP  大鼠甲狀旁腺激素相關蛋白  規格: 48T/96T

 PTH  大鼠甲狀旁腺激素  規格: 48T/96T

 AFP  大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白  規格: 48T/96T

 Methylase  大鼠甲基化酶  規格: 48T/96T

 SDF-1β/CXCL12  大鼠基質細胞衍生因子1β  規格: 48T/96T

 SDF-1a/CXCL12  大鼠基質細胞衍生因子1a  規格: 48T/96T

 TIMP-4  大鼠基質金屬蛋白酶抑制因子4  規格: 48T/96T

 TIMP-3  大鼠基質金屬蛋白酶抑制因子3  規格: 48T/96T

 TIMP-2  大鼠基質金屬蛋白酶抑制因子2  規格: 48T/96T

 TIMP-1  大鼠基質金屬蛋白酶抑制因子1  規格: 48T/96T

 MMP-9  大鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B  規格: 48T/96T

 MMP-8  大鼠基質金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶  規格: 48T/96T

 MMP-7  大鼠基質金屬蛋白酶7  規格: 48T/96T

 MMP-5  大鼠基質金屬蛋白酶5  規格: 48T/96T

 MMP-4  大鼠基質金屬蛋白酶4  規格: 48T/96T

 MMP-3  大鼠基質金屬蛋白酶3  規格: 48T/96T

 MMP-2  大鼠基質金屬蛋白酶2/明膠酶A  規格: 48T/96T

 MMP-13  大鼠基質金屬蛋白酶13  規格: 48T/96T

 MMP-10  大鼠基質金屬蛋白酶10  規格: 48T/96T

 MMP-1  大鼠基質金屬蛋白酶1  規格: 48T/96T

 Myosin  大鼠肌球蛋白  規格: 48T/96T

 MYO/MB  大鼠肌紅蛋白  規格: 48T/96T

 MYO/MB  大鼠肌紅蛋白  規格: 48T/96T

 Tn-Ⅰ  大鼠肌鈣蛋白Ⅰ  規格: 48T/96T

  ACV-RAb  大鼠活化素A受體抗體  規格: 48T/96T

 Activin-A  大鼠活化素A  規格: 48T/96T

 APC  大鼠活化蛋白C  規格: 48T/96T

 LHRH  大鼠黃體生成素釋放激素  規格: 48T/96T

 cAMP  大鼠*  規格: 48T/96T

 cGMP  大鼠環磷酸鳥苷  規格: 48T/96T

 CsA  大鼠*A  規格: 48T/96T

 EPOR  大鼠紅細胞生成素受體  規格: 48T/96T

 EPO  大鼠紅細胞生成素  規格: 48T/96T

 sm Actinin-α   大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α   規格: 48T/96T

 NF-κB p65  大鼠核因子-κB亞基p65親和肽  規格: 48T/96T

 RANKL  大鼠核因子κB受體活化因子配基  規格: 48T/96T

  PPAR-γ  大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ  規格: 48T/96T

 PPAR-α  大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α  規格: 48T/96T

 C4a  大鼠過敏毒素/補體片斷4a  規格: 48T/96T

 Casp-9  大鼠胱天蛋白酶9  規格: 48T/96T

 Casp-3  大鼠胱天蛋白酶3  規格: 48T/96T

 ON  大鼠骨粘連蛋白  規格: 48T/96T

 BMP-6  大鼠骨形成蛋白6  規格: 48T/96T

 BMPs  大鼠骨形成蛋白  規格: 48T/96T

 ALP-B  大鼠骨特異性堿性磷酸酶B  規格: 48T/96T

 OPN  大鼠骨橋素  規格: 48T/96T

 Cr  大鼠骨膠原交聯  規格: 48T/96T

 OT/BGP  大鼠骨鈣素/骨*蛋白  規格: 48T/96T

 BMPR-Ⅱ  大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ  規格: 48T/96T

 BMPR-1A  大鼠骨成型蛋白受體1A  規格: 48T/96T

 BMP-7  大鼠骨成型蛋白7  規格: 48T/96T

 BMP-4  大鼠骨成型蛋白4  規格: 48T/96T

 BMP-2  大鼠骨成型蛋白2  規格: 48T/96T

 OPGL  大鼠骨保護素配體  規格: 48T/96T

 OPG  大鼠骨保護素  規格: 48T/96T

 GAD-Ab  大鼠*脫羧酶自身抗體  規格: 48T/96T

 OFQ/N  大鼠孤腓肽  規格: 48T/96T

 Lebtospira  大鼠鉤端螺旋體IgG  規格: 48T/96T

 T  大鼠睪酮  規格: 48T/96T

 u-T4  大鼠高敏甲狀腺素  規格: 48T/96T

 U-TSH  大鼠高靈敏度促甲狀腺激素  規格: 48T/96T

 HGF  大鼠肝細胞生長因子  規格: 48T/96T

 SCFR  大鼠干細胞因子受體  規格: 48T/96T

 SCF/MGF  大鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子  規格: 48T/96T

 IP-10/CXCL10  大鼠干擾素誘導蛋白10  規格: 48T/96T

 CR  大鼠鈣結合蛋白  規格: 48T/96T

 CAM  大鼠鈣調素  規格: 48T/96T

 CaN  大鼠鈣調磷酸酶  規格: 48T/96T

 CAMK 2  大鼠鈣/鈣調素依賴性蛋白激酶2  規格: 48T/96T

 CPSA  大鼠復合前列腺特異性抗原  規格: 48T/96T

 sIgA  大鼠分泌型免疫球蛋白A  規格: 48T/96T

 SP-A  大鼠肺表面活性物質相關蛋白A  規格: 48T/96T

 DPPⅣ  大鼠二肽基肽酶Ⅳ  規格: 48T/96T

 CA  大鼠兒茶酚胺  規格: 48T/96T

 DAT  大鼠多巴胺轉運蛋白  規格: 48T/96T

 D2R  大鼠多巴胺D2受體  規格: 48T/96T

 D1R  大鼠多巴胺D1受體  規格: 48T/96T

 D1R  大鼠多巴胺D1受體  規格: 48T/96T

 DA  大鼠多巴胺  規格: 48T/96T

 TE  大鼠端粒酶  規格: 48T/96T

 M-AChR  大鼠毒蕈堿型乙酰*受體  規格: 48T/96T

 AZT  大鼠*  規格: 48T/96T

 AIF  大鼠凋亡誘導因子  規格: 48T/96T

 FASL  大鼠凋亡相關因子配體  規格: 48T/96T

 FAS/CD95  大鼠凋亡相關因子  規格: 48T/96T

 FⅧAg  大鼠第八因子相關抗原  規格: 48T/96T

 Resistin  大鼠抵抗素  規格: 48T/96T

 HIF-1α  大鼠低氧誘導因子1α  規格: 48T/96T

 LDL-IC  大鼠低密度脂蛋白免疫復合物  規格: 48T/96T

大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA Kit,48T/96T  大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA Kit,48T/96T  規格: 48T/96T

 PP  大鼠蛋白磷酸酶  規格: 48T/96T

 PKB  大鼠蛋白激酶B  規格: 48T/96T

 CCK  大鼠膽囊收縮素/腸促*肽  規格: 48T/96T

 CETP  大鼠*酯轉移蛋白  規格: 48T/96T

 MCP-4/CCL13  大鼠單核細胞趨化蛋白4  規格: 48T/96T

 MCP-3/CCL7  大鼠單核細胞趨化蛋白3  規格: 48T/96T

 MCP-2/CCL8  大鼠單核細胞趨化蛋白2  規格: 48T/96T

 MCP-1/CCL2/MCAF  大鼠單核細胞趨化蛋白1  規格: 48T/96T

 Big ET  大鼠大內皮素  規格: 48T/96T

 Big ET  大鼠大內皮素  規格: 48T/96T

 PRL  大鼠催乳素  規格: 48T/96T

 GNRHR-Ab  大鼠*釋放激素受體抗體  規格: 48T/96T

 GnRHR  大鼠*釋放激素受體  規格: 48T/96T

 GnRH  大鼠*釋放激素  規格: 48T/96T

 GRH  大鼠促生長激素釋放激素  規格: 48T/96T

 ACTH  大鼠促腎上腺皮質激素  規格: 48T/96T

 CRH  大鼠促腎上皮質激素釋放激素  規格: 48T/96T

 FSH  大鼠促卵泡素  規格: 48T/96T

 TRH  大鼠促甲狀腺素釋放激素  規格: 48T/96T

 TSH  大鼠促甲狀腺素  規格: 48T/96T

 LH  大鼠促黃體激素  規格: 48T/96T

 E3  大鼠雌三醇  規格: 48T/96T

 E  大鼠雌激素  規格: 48T/96T

 ER  大鼠雌二醇受體  規格: 48T/96T

 E2  大鼠雌二醇  規格: 48T/96T

 VLA  大鼠遲現抗原  規格: 48T/96T

 SOD  大鼠超氧化物歧化酶  規格: 48T/96T

 hs-CRP  大鼠超敏C反應蛋白  規格: 48T/96T

 iFABP  大鼠腸脂肪酸結合蛋白  規格: 48T/96T

 CFH  大鼠補體因子H  規格: 48T/96T

 C  大鼠補體片斷  規格: 48T/96T

 C3a  大鼠補體片斷3a  規格: 48T/96T

 C4  大鼠補體蛋白4  規格: 48T/96T

 C3  大鼠補體蛋白3  規格: 48T/96T

 M2-PK  大鼠丙酮酸激酶M2型同工酶  規格: 48T/96T

 MDA  大鼠丙二醛  規格: 48T/96T

 EGF  大鼠表皮生長因子  規格: 48T/96T

 PY  大鼠吡啶交聯物  規格: 48T/96T

 BTA  大鼠膀胱腫瘤抗原  規格: 48T/96T

 Cys-C  大鼠半*蛋白酶抑制劑/胱抑素C  規格: 48T/96T

 LIFR  大鼠白血病抑制因子受體  規格: 48T/96T

 ALCAM  大鼠白細胞活化黏附因子  規格: 48T/96T

 CD44  大鼠白細胞分化抗原44  規格: 48T/96T

 CD30  大鼠白細胞分化抗原30  規格: 48T/96T

 LTE4  大鼠白三烯E4  規格: 48T/96T

 LTC4  大鼠白三烯C4  規格: 48T/96T

 LTB4  大鼠白三烯B4  規格: 48T/96T

 IL-4  大鼠白介素4  規格: 48T/96T

 IL-3  大鼠白介素3  規格: 48T/96T

 IL-2R  大鼠白介素2受體  規格: 48T/96T

 IL-2sRβ  大鼠白介素2可溶性受體β鏈  規格: 48T/96T

 IL-2sRα  大鼠白介素2可溶性受體α鏈  規格: 48T/96T

 IL-27  大鼠白介素27  規格: 48T/96T

 IL-23  大鼠白介素23  規格: 48T/96T

 IL-2  大鼠白介素2  規格: 48T/96T

 IL1Ra  大鼠白介素1受體拮抗劑  規格: 48T/96T

 IL-1sRⅡ  大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ  規格: 48T/96T

 IL-1sRⅠ  大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ  規格: 48T/96T

 IL-1β  大鼠白介素1β   規格: 48T/96T

 IL-1α  大鼠白介素1α  規格: 48T/96T

 IL-18  大鼠白介素18  規格: 48T/96T

 IL-17  大鼠白介素17  規格: 48T/96T

 IL-16  大鼠白介素16  規格: 48T/96T

 IL-15  大鼠白介素15  規格: 48T/96T

 IL-13  大鼠白介素13  規格: 48T/96T

 IL-12/P70  大鼠白介素12  規格: 48T/96T

 IL-12/P40  大鼠白介素12  規格: 48T/96T

 IL-11  大鼠白介素11  規格: 48T/96T

 IL-10  大鼠白介素10  規格: 48T/96T

 IL-1  大鼠白介素1  規格: 48T/96T

 Orexin A  大鼠阿立新A  規格: 48T/96T

 IFI16/p16  大鼠γ干擾素誘導蛋白16/p16  規格: 48T/96T

 IFN-γ  大鼠γ干擾素  規格: 48T/96T

 GABA  大鼠γ氨基丁酸  規格: 48T/96T

 β-TG  大鼠β血小板球蛋白/β血栓環蛋白  規格: 48T/96T

 BTC  大鼠β細胞素  規格: 48T/96T

 βOHB  大鼠β羥丁酸  規格: 48T/96T

 β-EPR  大鼠β內啡肽受體  規格: 48T/96T

 β-EP  大鼠β內啡肽  規格: 48T/96T

 IFN-β/IFNB  大鼠β干擾素  規格: 48T/96T

 β-Defensins  大鼠β-防御素  規格: 48T/96T

 Aβ1-42  大鼠β淀粉樣蛋白1-42  規格: 48T/96T

 Aβ1-40  大鼠β淀粉樣蛋白1-40  規格: 48T/96T

 BMG/β2-MG  大鼠β2微球蛋白  規格: 48T/96T

 β2-GP1 IgA/G/M  大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M  規格: 48T/96T

 α-glucosidase  大鼠α葡萄糖苷酶  規格: 48T/96T

 α-GST  大鼠α*S轉移酶  規格: 48T/96T

 IFN-α  大鼠α干擾素  規格: 48T/96T

 AFU  大鼠αL巖藻糖苷酶  規格: 48T/96T

 α1-MG  大鼠α1微球蛋白  規格: 48T/96T

 α1-AGP  大鼠α1酸性糖蛋白  規格: 48T/96T

 TLR-9/CD289  大鼠Toll樣受體9  規格: 48T/96T

 TIEG1  大鼠TGF-β誘導早期基因1  規格: 48T/96T

 S-100  大鼠S100蛋白  規格: 48T/96T

 S-100B  大鼠S100B蛋白  規格: 48T/96T

 P-Selectin/CD62P  大鼠P選擇素  規格: 48T/96T

 P53  大鼠P53  規格: 48T/96T

大鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-* 大鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-* 規格: 48T/96T

 NAG  大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶  規格: 48T/96T

 NT-proBNP  大鼠N端前腦鈉素  規格: 48T/96T

 NT-proBNP  大鼠N端前腦鈉素  規格: 48T/96T

 PAL  大鼠L苯*解氨酶  規格: 48T/96T

 Flt3L  大鼠FMS樣*激酶3配體  規格: 48T/96T

 Flt3  大鼠FMS樣*激酶3  規格: 48T/96T

 E-Selectin/CD62E  大鼠E選擇素  規格: 48T/96T

 E-Cad  大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白  規格: 48T/96T

 CNP  大鼠C型鈉尿肽  規格: 48T/96T

 C-Peptide  大鼠C肽  規格: 48T/96T

 CRP  大鼠C反應蛋白  規格: 48T/96T

 CXCR3  大鼠CXC趨化因子受體3  規格: 48T/96T

 BF  大鼠B因子  規格: 48T/96T

 Bcl-2  大鼠B細胞淋巴瘤因子2  規格: 48T/96T

 Bid  大鼠BH3結構域凋亡誘導蛋白  規格: 48T/96T

 AP12  大鼠apelin 12  規格: 48T/96T

 8-iso-PG  大鼠8異前列腺素  規格: 48T/96T

 8-OHdG  大鼠8羥基脫氧鳥苷  規格: 48T/96T

 6-keto-PGF1a  大鼠6酮前列腺素F1a  規格: 48T/96T

 6-K-PG  大鼠6酮前列腺素  規格: 48T/96T

 5-HT  大鼠5羥色胺  規格: 48T/96T

 5-NT  大鼠5核苷酸酶  規格: 48T/96T

 Col Ⅳ  大鼠Ⅳ型膠原  規格: 48T/96T

 PⅢNP  大鼠Ⅲ型前膠原肽  規格: 48T/96T

 PⅢNT  大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽  規格: 48T/96T

 Col Ⅲ  大鼠Ⅲ型膠原  規格: 48T/96T

 Col Ⅱ  大鼠Ⅱ型膠原  規格: 48T/96T

 26S PSM  大鼠26S蛋白酶體  規格: 48T/96T

  OH  大鼠25羥*3  規格: 48T/96T

 PⅠCP  大鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽  規格: 48T/96T

 CⅠCP  大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽  規格: 48T/96T

 PCⅠ  大鼠Ⅰ型前膠原  規格: 48T/96T

 NTX  大鼠Ⅰ型膠原N末端肽  規格: 48T/96T

 Col Ⅰ  大鼠Ⅰ型膠原  規格: 48T/96T

 17-KS  大鼠17-酮類固醇  規格: 48T/96T

 17-OHP  大鼠17羥孕酮  規格: 48T/96T

 17-OHCS  大鼠17羥皮質類固醇  規格: 48T/96T

 15-LO/LOX  大鼠15脂加氧酶  規格: 48T/96T

 1,3-βD glu  大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶  規格: 48T/96T

 SBA  大豆凝集素  規格: 48T/96T

 E.coli P  大腸桿菌宿主殘留蛋白檢測試劑盒  規格: 48T/96T

 cath-K  倉鼠組織蛋白酶K  規格: 48T/96T

 TBG  倉鼠甲狀腺結合球蛋白  規格: 48T/96T

 MMP-9  倉鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B  規格: 48T/96T

 RANKL  倉鼠核因子κB受體活化因子配基  規格: 48T/96T

 PHA  菜豆凝集素  規格: 48T/96T

 LCA  扁豆凝集素  規格: 48T/96T

 RCA  蓖麻凝集素  規格: 48T/96T

 α-BGT  α-銀環蛇毒素  規格: 48T/96T

 

 

 


 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 


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