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細胞培養基本方法

閱讀：225發布時間：2015-01-30

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細胞培養基本方法注意事項

1、玻璃吸管和玻璃培養瓶的消毒:1）高壓蒸汽滅菌15分鐘以上;2）干烤消毒140度2小時以上;

2、無菌工作臺先清洗后用75%酒精擦拭干凈，紫外線照射40分鐘以上;各種培養板照射3小時以上;

3、培養基（pH7.2）和血清配制好后要做無菌試驗:將血清按10%加入培養基內，用無菌的玻璃離心管或玻璃瓶取*培養基5-10ml置培養箱內培養2-3天，肉眼見無渾濁或沉淀等異物。分裝后置4度保存;

4、消化液（pH7.8）或其它加入液，應用高壓蒸汽滅菌或一次性無菌濾器過濾除菌，分裝成支置-20度保存;

5、培養箱應先用清水清洗后用75%酒精擦拭一遍（如有紫外線的應照射1小時以上，如有高溫滅菌的應按程序來菌）。至少每月一次。

6、進入操作時應注意先清洗雙手及手腕，然后用75%酒精擦拭，操作時注意無菌臺內空間層次。手及物品不要在暴露的瓶口上方來往，如果數量較多，培養瓶應放在與酒精燈平行地方便于操作，瓶與瓶之間應相隔一定的距離，開瓶（蓋）時應先用75%酒精反復擦拭或用燈燒，打開后應用燈先燒口，然后燒蓋。用完后同樣操作。整個操作過程盡量在無菌臺靠里面一點。


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