人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞特性:該細(xì)胞是Fogh J和TrempeG分離和鑒定的眾多人類腫瘤細(xì)胞系中的一種;
細(xì)胞純度:93%
細(xì)胞活力:87%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細(xì)胞檢測:細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
保存及應(yīng)用
如是新鮮原代細(xì)胞,請于收到后放入CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置2-3h后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作;如是凍存細(xì)胞,收到后可放入液氮或-80℃冰箱保存也可進(jìn)行復(fù)蘇操作。
人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞操作步驟
1用包被Buffer稀釋的重組人TFAR19(1mg/ml)包被ELISA板, 100ml/well, 37°C孵育2h或4°C過夜(一般24h以上)。
2洗滌Buffer洗板三次,加入封閉液,200 ml/well , 37°C孵育2h或4°C過夜。
3洗滌Buffer洗板三次,加入不同稀釋度的病人血清(3個(gè)重復(fù)孔)100ml/well ,37°C孵育1h。設(shè)包被Buffer、洗滌Buffer 、封閉液為陰性對照。
4洗滌Buffer洗板三次,加入1:2500稀釋的HRP標(biāo)記的抗人IgG, 100ml/well,37°C孵育1h。
5洗滌Buffer洗板三次,加入顯色液,100 ml/well,避光反應(yīng)10~15min。
6加入H2SO4終止反應(yīng),50 ml/well。
7ELISA Reader 讀取OD490 光密度值,分析和比較病人血清和正常血 清中TFAR19自身抗體的表達(dá)水平。
潛伏期特點(diǎn):
長短與細(xì)胞接種密度、種類、使用的培養(yǎng)基性質(zhì)有關(guān)。
(1)細(xì)胞貼附后進(jìn)入潛伏期,細(xì)胞無增殖。少見分裂相,細(xì)胞有運(yùn)動(dòng)活動(dòng)。
(2)初代培養(yǎng) 細(xì)胞潛伏期約為24~96小時(shí)或更長,
連續(xù)細(xì)胞系和腫瘤細(xì)胞潛伏期約6~24小時(shí)。
(3)細(xì)胞接種密度大潛伏期短。
(4)細(xì)胞出現(xiàn)分裂相增多時(shí),標(biāo)志細(xì)胞進(jìn)入指數(shù)增生期。
指數(shù)增生期(logarithmic growth phase):
特點(diǎn):細(xì)胞增殖zui旺盛階段,分裂相增多。
細(xì)胞分裂指數(shù)(mitotie index MI) :
表示每1000個(gè)細(xì)胞中的分裂相數(shù)。
條件:分裂相數(shù)與細(xì)胞種類、培養(yǎng)成分、pH培養(yǎng)箱溫度有關(guān)。
相關(guān)產(chǎn)品如下:P815 肥大細(xì)胞瘤
YAC-1 淋巴瘤
MFC 前胃癌
L1210 淋巴白血病
AtT20 垂體瘤
P388D1 淋巴樣瘤
NS-1 骨髓瘤
SP2/0 骨髓瘤
SRS-82 腹水瘤
P3-NS-1/1-Ag4.1 骨髓瘤
SAC-IIB2 腹水瘤
SAC-IIC3 腹水瘤
45.6.TG1.7 骨髓瘤
S180 腹水瘤
P3-X63-Ag8 骨髓瘤
B16 黑色素瘤
J774A.1 單核細(xì)胞-巨噬細(xì)胞
C127 乳腺腫瘤
RAW264.7 單核細(xì)胞-巨噬細(xì)胞
F9 胚胎瘤
NG108-15 小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤×大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞雜交細(xì)胞
C6 膠質(zhì)瘤
RH-35 肝癌
SHZ-88 乳腺癌
CBRH-7919 肝癌
PC-12 腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤
A431 表皮癌
QGY-7701 肝癌
A673 橫紋肌癌
QGY-7703 肝癌