檢測(cè)原理扣囊內(nèi)孢霉
細(xì)胞發(fā)生凋亡或壞死，其細(xì)胞DNA均發(fā)生斷裂，細(xì)胞內(nèi)小分子量DNA斷增加，高分子DNA減少，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)DNA斷。但凋亡細(xì)胞DNA斷裂點(diǎn)均有規(guī)律的發(fā)生在核小體之間，出現(xiàn)180－200bpDNA斷，而壞死細(xì)胞的DNA斷裂點(diǎn)為無特征的雜亂片斷，利用此特征可以確定群體細(xì)胞的死亡，并可與壞死細(xì)胞區(qū)別，細(xì)胞繁殖以分裂方式進(jìn)行。細(xì)胞作為一個(gè)獨(dú)立生命單位，既有生長(zhǎng)繁殖，也有衰老死亡。細(xì)胞衰老是生物有機(jī)體衰老的基礎(chǔ)。在多細(xì)胞生物的個(gè)體發(fā)育過程中，細(xì)胞常常分化成各種構(gòu)造和功能不同的細(xì)胞，如肌細(xì)胞、紅細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞等都屬于高度分化的細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞發(fā)生癌變時(shí)，細(xì)胞便喪失其原來正常的功能，并無休止地分裂，形成腫瘤。
扣囊內(nèi)孢霉操作方法
固定 | 培養(yǎng)細(xì)胞的制片或冰凍切片用4%多聚甲醛固定30min(4℃)后，用80%酒精再固定2h（-20℃）。常規(guī)4%中性福爾馬林固定、石蠟包埋之切片進(jìn)行脫蠟、水化。 |
洗滌 | 玻片浸入PBS緩沖液，搖床上洗滌5min，三次。 |
反應(yīng) | 洗滌后的玻片用吸水紙吸干細(xì)胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加反應(yīng)液（每50μL反應(yīng)液含TdT酶0.5μL,標(biāo)記的-dUTP 1μL），使反應(yīng)液均勻地覆蓋于所有細(xì)胞或組織切片上，蓋上塑料蓋玻片，置濕盒中，37℃孵育1h。 |
終止反應(yīng) | 去掉塑料蓋玻片，將玻片置盛有洗滌緩沖液的染色缸內(nèi)，洗滌兩次，每次5min。 |
FITC標(biāo)記 | 洗滌后的玻片用吸水紙吸去細(xì)胞或組織周圍水分，按50μl/cm2滴加FITC反應(yīng)液（含FITC 2.5μg/mL），室溫下避光孵育10min。 |
洗滌 | 將玻片置于洗滌緩沖液內(nèi)，洗兩次，每次5min。 |
PI復(fù)染 | 將玻片置于盛有PI染液的染色缸內(nèi)，室溫下避光染色30min。 |
封片 | 用蓋玻片直接蓋在含PI染液的玻片上，亦可用無色指甲油涂于蓋玻片四周邊緣，置暗盒中，盡早鏡檢觀察。 |
交貨時(shí)間 | 15~20天 |
傳代：
1.培養(yǎng)皿中的細(xì)胞覆蓋率達(dá)到80%-90%時(shí)要傳代。
2.把原有培養(yǎng)基吸掉。
3.加適當(dāng)?shù)?(能覆蓋細(xì)胞就行)，消化1-2分鐘。
4.細(xì)胞都變圓后加如入等體積的含血清的培養(yǎng)基終止消化。
5.用移液槍吹打細(xì)胞，把細(xì)胞都懸浮起來。
6.把細(xì)胞吸到15ml的離心管中，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
7.倒掉上清液，加1-2ml培養(yǎng)基，把細(xì)胞都吹起來。
相關(guān)產(chǎn)品如下：hz0523 人胃腺癌細(xì)胞,MCG803細(xì)胞
hz0524 人胃腺癌細(xì)胞,Human AGS細(xì)胞
hz0525 人胃腺癌細(xì)胞,BGC-823細(xì)胞
hz0526 人胃腺癌細(xì)胞,AGS細(xì)胞,
hz0527 人胃上皮細(xì)胞,GES-1細(xì)胞
hz0528 人胃癌細(xì)胞系 MGC-803細(xì)胞
hz0529 人胃癌細(xì)胞系 HS-746T細(xì)胞
hz0530 人胃癌細(xì)胞（未分化）HGC-27細(xì)胞,
hz0531 人胃癌細(xì)胞,SNU-638細(xì)胞
hz0532 人胃癌細(xì)胞,SGC7901細(xì)胞
hz0533 人胃癌細(xì)胞,NUGC-3細(xì)胞
hz0534 人胃癌細(xì)胞,NCI-N87細(xì)胞
hz0535 人胃癌細(xì)胞,MKN-45細(xì)胞
hz0536 人胃癌細(xì)胞,MKN-28細(xì)胞
hz0537 人胃癌細(xì)胞,MGC80-3細(xì)胞,
hz0538 人胃癌細(xì)胞,Hs 746T細(xì)胞
hz0539 人胃癌細(xì)胞,BSG823細(xì)胞
hz0540 人胃癌細(xì)胞,AZ-521細(xì)胞
hz0541 人胃癌細(xì)胞,9811C11細(xì)胞
hz0542 人胃癌*耐藥株 SGC7901/DDP細(xì)胞
hz0543 人胃癌耐藥*細(xì)胞株 SGC-7901/DDP細(xì)胞
hz0544 人未分化胃癌細(xì)胞,HGC-27細(xì)胞
hz0545 人微血管內(nèi)皮細(xì)胞株 HMEC-1細(xì)胞
hz0546 人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞,KU812細(xì)胞
hz0547 人退行性癌細(xì)胞,Calu-6細(xì)胞
hz0548 人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞,JeKo-1細(xì)胞
hz0549 人胎盤絨膜癌細(xì)胞,BeWo細(xì)胞
hz0550 人胎盤絨毛癌細(xì)胞,JAR細(xì)胞
hz0551 人髓系白血病細(xì)胞系 KGIa細(xì)胞
會(huì)員1.png)
