磷酸化B-Raf抗體(antibody,Ab)是機(jī)體免疫系統(tǒng)受到抗原刺激后產(chǎn)生的特異性球蛋白,稱免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。根據(jù)其重鏈穩(wěn)定區(qū)的分子結(jié)構(gòu)和抗原性的不同,可將為類Ig分為IgG、IgA、IgM、IgD和IgE等五大類。由遺傳基因決定所產(chǎn)生的抗體,稱天然抗體(natural antibody),由抗原激發(fā)免疫細(xì)胞產(chǎn)生的抗體,稱免疫抗體(immune antibody)或稱特異地性抗體。人工制備的特異性抗體又可分為多克隆抗體、單克隆抗體和基因工程抗體三種類型。
檢測(cè)病原體常用的磷酸化B-Raf抗體有人工制備的特異性多克隆抗體、單克隆抗體和基因工程抗體三種類型。
磷酸化B-Raf抗體操作步驟:
1取適量Protein A+G Beads懸液,裝入層析柱,用10倍柱體積的PBS(或者TBS,下同)洗滌平衡層析柱。
2含抗體的血清或其它體液高速離心后,將上清與等體積2×PBS緩沖液混合,調(diào)整pH以及離子濃度后(確認(rèn)pH值為7±0.5),緩慢加入層析柱。
3用10倍柱體積以上的PBS洗滌,至流出液無蛋白檢出。
4加入2倍柱體積0.1 M 檸檬酸(Citrate Acid, pH 2.7)封閉流出管,靜置5分鐘后收集穿出液,重復(fù)三次。測(cè)定 OD280估算抗體濃度,如果所得抗體較多可以使用SDS-PAGE檢測(cè)純度。也可以選擇0.1 M*(Glycine, pH 3.0)洗脫。
5洗脫后的抗體立即加入2/5體積的1 M Tris,pH 9.0中和,使用Millipore蛋白濃縮管切換到所需緩沖液,或者透析,緩沖液通常為PBS含有0.02% NaN3以及1 mM EDTA。
6濃縮到所需體積,加入50%甘油;測(cè)定效價(jià)后,分裝并保存在-20℃,避免凍結(jié)。
磷酸化B-Raf抗體相關(guān)產(chǎn)品如下:hz-9297R ASTE1 ASTE1蛋白抗體
hz-9298R BCL7B BCL7B蛋白抗體
hz-9299R RMND5B RMND5B蛋白抗體
hz-9300R NNP1/RRP1 like protein 新型核蛋白質(zhì)1抗體
hz-1228R α-Adaptin 銜接蛋白α抗體
hz-9301R SASS6 紡錘體組裝異常蛋白6抗體
hz-9302R SPO11 減數(shù)分裂重組蛋白SPO11抗體
hz-9303R STIL 中斷位點(diǎn)蛋白STIL抗體
hz-9304R ARL8B ADP核糖基化樣因子8B抗體
hz-9305R CENPO 著絲粒蛋白O抗體
hz-9306R CEP128 中心體蛋白128抗體
hz-9307R CP110 中心體蛋白110抗體
hz-9308R KATNA1/Katanin p60 A1 劍蛋白p60亞基A1抗體
hz-9309R ACTR1A (α/β-centractin) 肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白1抗體
hz-9310R GPSM2 G蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白2抗體
hz-9311R HAUS4/C14orf94 14號(hào)染色體開放閱讀框94抗體
hz-9312R DIP2A/C21orf106 21號(hào)染色體開放閱讀框106抗體
hz-9313R MAP-9 微管相關(guān)蛋白9抗體
hz-9314R MAP7D1/RPRC1 */*富含卷曲蛋白1抗體
hz-9315R MKLP1 有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白樣1抗體
hz-9316R NDE1 核分布基因E同源蛋白1抗體
hz-9317R NEK9 */*蛋白激酶NEK9抗體
hz-9318R phospho-NEK9(Thr210) 磷酸化*/*蛋白激酶NEK9抗體
hz-9319R NNF1R/PMF1 多胺調(diào)控因子1抗體
hz-9320R NYS48 NYS48蛋白抗體
hz-1546R beta Adaptin/AP2 銜接蛋白β抗體
hz-9321R PRPF4 PRPF4蛋白抗體
hz-9322R RanBP1 RAN結(jié)合蛋白1抗體
hz-9323R RanBP2 RAN結(jié)合蛋白2/核孔蛋白抗體
hz-9325R ASZ1 錨定蛋白樣蛋白1抗體
hz-9326R GDAP2 *誘導(dǎo)分化相關(guān)蛋白2抗體