人腦鈉素單克隆抗體(antibody,Ab)是機(jī)體免疫系統(tǒng)受到抗原刺激后產(chǎn)生的特異性球蛋白,稱免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。根據(jù)其重鏈穩(wěn)定區(qū)的分子結(jié)構(gòu)和抗原性的不同,可將為類Ig分為IgG、IgA、IgM、IgD和IgE等五大類。由遺傳基因決定所產(chǎn)生的抗體,稱天然抗體(natural antibody),由抗原激發(fā)免疫細(xì)胞產(chǎn)生的抗體,稱免疫抗體(immune antibody)或稱特異地性抗體。人工制備的特異性抗體又可分為多克隆抗體、單克隆抗體和基因工程抗體三種類型。
檢測病原體常用的人腦鈉素單克隆抗體有人工制備的特異性多克隆抗體、單克隆抗體和基因工程抗體三種類型。
操作步驟:
1取適量Protein A+G Beads懸液,裝入層析柱,用10倍柱體積的PBS(或者TBS,下同)洗滌平衡層析柱。
2含抗體的血清或其它體液高速離心后,將上清與等體積2×PBS緩沖液混合,調(diào)整pH以及離子濃度后(確認(rèn)pH值為7±0.5),緩慢加入層析柱。
3用10倍柱體積以上的PBS洗滌,至流出液無蛋白檢出。
4加入2倍柱體積0.1 M 檸檬酸(Citrate Acid, pH 2.7)封閉流出管,靜置5分鐘后收集穿出液,重復(fù)三次。測定 OD280估算抗體濃度,如果所得抗體較多可以使用SDS-PAGE檢測純度。也可以選擇0.1 M*(Glycine, pH 3.0)洗脫。
5洗脫后的抗體立即加入2/5體積的1 M Tris,pH 9.0中和,使用Millipore蛋白濃縮管切換到所需緩沖液,或者透析,緩沖液通常為PBS含有0.02% NaN3以及1 mM EDTA。
6濃縮到所需體積,加入50%甘油;測定效價(jià)后,分裝并保存在-20℃,避免凍結(jié)。
相關(guān)產(chǎn)品如下:hz-8673R KCTD12 鉀離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體
hz-8675R BDKRB1 緩激肽B1受體抗體
hz-5563R phospho-PRKD1(Tyr463) 磷酸化蛋白激酶C mu型抗體
hz-8683R IGF2BP1/IMP1 胰島素樣生長因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白1抗體
hz-8686R BRMS1 乳腺癌轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體
hz-8687R p53 (FL-393) 腫瘤抑制基因p53抗體
hz-8689R MEPE 細(xì)胞外基質(zhì)磷酸化抗體
hz-8690R IFI44 干擾素誘導(dǎo)蛋白44抗體
hz-8691R KCNAB1/Kv beta 1 電壓門控鉀通道蛋白1抗體
hz-0576R Annexin II/Annexin A2 膜粘連蛋白 Ⅱ抗體
hz-4157R PRKD3 蛋白激酶C nu型抗體
hz-5564R phospho-PRKD3(Ser41) 磷酸化蛋白激酶C nu型抗體
hz-8717R SLC30A3/ZNT3 溶質(zhì)載體鋅轉(zhuǎn)運(yùn)3抗體
hz-8718R Viperin/RSAD2 病毒抑制蛋白Viperin抗體
hz-1631R Annexin Ⅲ 膜粘連蛋白A3抗體
hz-1564R Annexin IV 膜粘連蛋白 A4抗體
hz-8726R BZW2 BZW2蛋白抗體
hz-8729R TPH2 5*羥化酶2抗體
hz-0398R Annexin V 膜粘連蛋白5抗體
hz-5916R Annexin A9 膜粘連蛋白9抗體
hz-5127R Annexin A10/14 膜粘連蛋白10抗體
hz-1471R Annexin VI 膜粘連蛋白6抗體
hz-5917R Annexin A7 膜粘連蛋白7抗體
hz-4161R PRKCQ/PKC theta 蛋白激酶C theta抗體
hz-5583R phospho-PRKCQ(Ser676) 磷酸化蛋白激酶C theta抗體
hz-5584R phospho-PRKCQ(Ser695) 磷酸化蛋白激酶C theta抗體
hz-5585R phospho-PRKCQ(Thr538) 磷酸化蛋白激酶C theta抗體
hz-0450R Annexin V 重組膜粘連蛋白5抗體
hz-4166R YES1 原癌基因*蛋白激酶Yes1抗體
hz-5591R phospho-YES1(Tyr426) 磷酸化原癌基因*蛋白激酶Yes1抗體
hz-5592R phospho-YES1(Tyr537) 磷酸化原癌基因*蛋白激酶Yes1抗體
hz-0934R Anthrax 炭疽桿菌抗體