血管緊張素Ⅱ抗體(antibody,Ab)是機(jī)體免疫系統(tǒng)受到抗原刺激后產(chǎn)生的特異性球蛋白,稱免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。根據(jù)其重鏈穩(wěn)定區(qū)的分子結(jié)構(gòu)和抗原性的不同,可將為類Ig分為IgG、IgA、IgM、IgD和IgE等五大類。由遺傳基因決定所產(chǎn)生的抗體,稱天然抗體(natural antibody),由抗原激發(fā)免疫細(xì)胞產(chǎn)生的抗體,稱免疫抗體(immune antibody)或稱特異地性抗體。人工制備的特異性抗體又可分為多克隆抗體、單克隆抗體和基因工程抗體三種類型。
檢測(cè)病原體常用的血管緊張素Ⅱ抗體有人工制備的特異性多克隆抗體、單克隆抗體和基因工程抗體三種類型。
操作步驟:
1取適量Protein A+G Beads懸液,裝入層析柱,用10倍柱體積的PBS(或者TBS,下同)洗滌平衡層析柱。
2含抗體的血清或其它體液高速離心后,將上清與等體積2×PBS緩沖液混合,調(diào)整pH以及離子濃度后(確認(rèn)pH值為7±0.5),緩慢加入層析柱。
3用10倍柱體積以上的PBS洗滌,至流出液無(wú)蛋白檢出。
4加入2倍柱體積0.1 M 檸檬酸(Citrate Acid, pH 2.7)封閉流出管,靜置5分鐘后收集穿出液,重復(fù)三次。測(cè)定 OD280估算抗體濃度,如果所得抗體較多可以使用SDS-PAGE檢測(cè)純度。也可以選擇0.1 M*(Glycine, pH 3.0)洗脫。
5洗脫后的抗體立即加入2/5體積的1 M Tris,pH 9.0中和,使用Millipore蛋白濃縮管切換到所需緩沖液,或者透析,緩沖液通常為PBS含有0.02% NaN3以及1 mM EDTA。
6濃縮到所需體積,加入50%甘油;測(cè)定效價(jià)后,分裝并保存在-20℃,避免凍結(jié)。
相關(guān)產(chǎn)品如下:hz-5313R phospho-EGFR (Tyr869) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體
hz-5314R phospho-EGFR (Thr693) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體
hz-5315R phospho-EGFR (Tyr1092) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體
hz-5316R phospho-EGFR (Tyr1110) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體
hz-2009R EGF(mouse) 表皮生長(zhǎng)因子抗體(小鼠)
hz-1454R ErbB-3/HER3 表皮生長(zhǎng)因子受體3抗體
hz-5317R phospho-EGFR (Tyr1197) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體
hz-5318R phospho-EGFR (Tyr1172) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體
hz-5319R phospho-EGFR (Thr678) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體
hz-5320R phospho-EGFR (Ser768) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體
hz-5321R phospho-EGFR (Tyr1016) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體
hz-5322R phospho-EGFR (Ser1142) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體
hz-5333R phospho-EGFR (Ser967) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體
hz-2010R EGF 表皮生長(zhǎng)因子抗體(大鼠)
hz-1755R EGFL7 類表皮生長(zhǎng)因子域7抗體
hz-5877R MUC13 粘蛋白13抗體
hz-0405R EGFR 表皮生長(zhǎng)因子受體抗體
hz-5878R MUC15 粘蛋白15抗體
hz-2503R EF1a 翻譯延伸因子EF-1a抗體
hz-2558R EGFRvIII 表皮生長(zhǎng)因子受體III型突變體抗體
hz-1076R Egr1 早期生長(zhǎng)應(yīng)答蛋白1抗體
hz-5879R MUC7 粘蛋白7抗體
hz-5880R CDCP1/CD318 CD318抗體
hz-4103R EIF4B 真核翻譯起始因子4B抗體
hz-5345R phospho-EIF4B (Ser422) 磷酸化真核翻譯起始因子4B抗體
hz-5346R phospho-EIF4B (Ser540) 磷酸化真核翻譯起始因子4B抗體
hz-3613R eIF2 alpha 真核啟動(dòng)因子2α抗體(eIFα2)