細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1） 準備F-12K培養基；優質胎牛血清，10%；雙抗，1%。

2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

中文名稱：AFIP甲酸-檸檬酸液

英文名稱：

產品規格：2×500ml

產品貨號：BJ-01X6787

細胞培養方法：

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

Avian Leukosis Virus(ALV)禽白血病病毒F亞群RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周phospho-ATG16A(Ser213)  磷酸化自噬相關蛋白16A抗體 規格: 0.1mlDNAPK/PRKDC  DNA依賴蛋白激催化亞基抗體 規格: 0.2ml

Pigeon Pox Virus(PPV)鴿痘病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Mouse Anti-Goat IgG/APC  APC標記的小鼠抗羊IgG 規格: 0.1mlRabbit Anti-human IgM/PE-CY5  PE-CY5標記的兔抗人IgM 規格: 0.1ml

Placenta hominis紫河車染料法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周CD109  轉化生因子β1結合蛋白抗體 規格: 0.1mlC4orf44  4號染色體開放閱讀框44抗體 規格: 0.2ml

Paracoccidioides brasiliensis巴西副球孢子LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周PSMD7  蛋白調解因子7抗體 規格: 0.2mlPhospho-Smad1(Ser206)  磷酸化細胞信號轉導分子Smad-1抗體 規格: 0.1ml

Dactylogyrus spp.指環蟲屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周SCHAD/HADHSC  短鏈L-3羥烷基輔A脫抗體 規格: 0.2mlphospho-CstF64(Ser498)  磷酸化細胞分裂相關蛋白CSTF64抗體 規格: 0.1ml

Radix scutellariae黃芩LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周NSP1/SH2D3A  SH2結構域蛋白3A抗體 規格: 0.2mlC9orf86  9號染色體開放閱讀框86抗體 規格: 0.2ml

Mycobacterium cheloei龜分枝桿LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Mouse anti-rabbit IgG ascites  小鼠抗兔IgG腹水 規格: 1mlHCV-NS3  丙型毒-NS3抗體 規格: 0.1ml

Erysipelothrix spp丹毒絲屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測（科研用）/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周ITIH4  α胰蛋白重鏈H4抗體 規格: 0.2mlCOPS2/TRIP15  甲狀受體相互作用蛋白15抗體 規格: 0.2ml

Fructus evodiae吳茱萸探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周SH2B1  SH2B蛋白抗體 規格: 0.2mlCARD7/NALP1  凋亡加強結構域蛋白7抗體 規格: 0.2ml

致瀉性大腸埃希氏五重染料法熒光定量PCR試劑盒（停） 動物病原微生物檢測（科研用） 50次 低溫 負20度 一年 4周Rabbit Anti-Monkey IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標記的兔抗猴IgG 規格: 0.1mlEXPB-2  植物延展素-β 規格: 1ml

AFIP甲酸-檸檬酸液大鼠前列腺酸性(PAP)免疫試劑盒*直銷

山羊β內啡肽(β-EP)免疫試劑盒*直銷

大鼠釋放激素受體(GnRHR)免疫試劑盒進口、組裝

人細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)免疫試劑盒進口、分裝

魚胰島素受體(ISR)免疫試劑盒*直銷

人內皮素1(ET-1)免疫試劑盒現貨供應

葡萄糖銨培養基 英文名稱：Ammonium Dextrose Medium 產品規格：250g

人抗BB抗體(BB-Ab)免疫試劑盒*直銷

酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養基（YPD） 英文名稱：Yeast Peptone Dextrose Agar 產品規格：250g

人低密度脂蛋白受體相關蛋白4(LRP-4)免疫試劑盒進口、組裝

乳酸菌成套生化鑒定管 英文名稱： 產品規格：11種/盒*5