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貨號 | BJ-01X7131 |
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中文名稱:DNA連接酶IV抑制劑(SCR7)
英文名稱:DNA Ligase IV Inhibitor
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
產品貨號:BJ-01X7131
英文名稱:DNA Ligase IV Inhibitor 產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg SCR7是一種DNA連接酶IV(DNA Ligase IV)抑制劑,抑制非同源末端連接(NHEJ)。SCR7增強CRISPR/Cas9條件的編輯頻率。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! :1533426-72-0 純度:99.78% 分子量:334.39 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備F-12K培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
Human Rhinovirus 29 人鼻病毒29 探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Goat Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的羊抗豚鼠IgG 規格: 0.1mlIDH2 草酰琥珀酸脫羧抗體 規格: 0.1ml
Semen euryales芡實探針法PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周Rabbit Anti-Guinea pig IgM/FITC FITC標記的兔抗豚鼠IgM 規格: 0.3mlNCC27/CLIC1 氯離子通道蛋白27抗體 規格: 0.1ml
Trypanosoma brucei rhodesiense布氏羅得西亞錐蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周MACC1 結腸轉移相關蛋白1抗體 規格: 0.2mlPhospho-BMX/ETK (Tyr40) 磷酸化非受體性蛋白酪激ETK抗體 規格: 0.1ml
Mouse Hepatitis Virus(MHV)小鼠肝炎病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Brk/PTK6 酪蛋白激6(瘤激) 規格: 0.2mlDRG1 GTP發育調控結合蛋白1抗體 規格: 0.2ml
Contagious Bovine Pleuropneumonia (CBPP)牛傳染性胸膜肺炎LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用) 50次 低溫 負20度 一年 1-2周PRKAA2/AMPK alpha 2 苷單磷酸活化蛋白激α2抗體 規格: 0.1mlCoronin 3 冠蛋白3抗體 規格: 0.2ml
杏仁源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周TMPRSS4 膜型絲蛋白2抗體 規格: 0.2mlRabbit Anti-dog IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗狗IgG 規格: 0.1ml
Calymmatobacterium granulomatis肉芽腫鞘桿探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周C1ORF74 1號染色體開放閱讀框74抗體 規格: 0.2mlBeta-arrestin 1 β-抑制蛋白1抗體 規格: 0.2ml
Potato Virus M(PVM)馬鈴薯病毒M型RT-PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周ATXN7L2 共濟失調蛋白7樣2抗體 規格: 0.2mlRET/C ret 指狀蛋白RET抗體 規格: 0.2ml
Flos campsis凌霄花PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周IL-10RA 白細胞介素-10受體a抗體 規格: 0.2mlLPP/LIM protein 脂肪瘤相關蛋白抗體 規格: 0.1ml
Bacillus licheniformis地衣形芽孢桿LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 1-2周Nociceptin receptor 孤菲肽受體/痛敏肽受體抗體 規格: 0.2ml
DNA連接酶IV抑制劑(SCR7)培養基R 英文名稱:Medium R (Lactose monohydrate sulphite medium) 產品規格:250g
人超敏C反應蛋白(hs-CRP)免疫試劑盒進口、分裝
鼠李糖 : 6155-35-7 規格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
人CD15分子(CD15)免疫試劑盒現貨供應
小鼠總(TB)免疫試劑盒*直銷
牛卵泡抑素(FST)免疫試劑盒進口、分裝
小鼠抗透明帶抗體IgG(aZP-IgG)免疫試劑盒進口、組裝
雞α1酸性糖蛋白(OGCHI)免疫試劑盒現貨供應
小鼠CD4分子(CD4)免疫試劑盒進口、分裝
大鼠髓鞘堿性蛋白抗體(MBP antibody)免疫試劑盒進口、分裝
兔NADPH氧化1(NOX1)免疫試劑盒進口、組裝
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
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