美國(guó)NovaBios基孔肯雅熱試紙

廣州健侖生物科技有限公司

本公司專業(yè)供應(yīng)各種進(jìn)口品牌基孔肯雅熱檢測(cè)試劑盒，包括美國(guó)的NovaBios、德國(guó)NOVA、廣州創(chuàng)侖等CDC品牌。主要包括膠體金、酶免、PCR等方法學(xué)。歡迎咨詢

基孔肯雅熱IgM診斷試劑

基孔肯雅熱IgG診斷試劑

基孔肯雅熱ELISA檢測(cè)試劑

基孔肯雅熱快速檢測(cè)試劑

基孔肯雅病毒核酸檢測(cè)試劑盒（熒光探針PCR）

美國(guó)CDC的基孔肯雅病毒診斷試劑——美國(guó)的NovaBios

德國(guó)CDC使用的基孔肯雅病毒診斷試劑——德國(guó)NOVA

美國(guó)NovaBios基孔肯雅熱試紙

【預(yù)期用途】 
基孔肯雅IgG/IgM抗體ELISA檢測(cè)試劑盒主要用于定性檢測(cè)人血清和血漿中抗基孔肯雅病毒的IgG/IgM抗體。 
【實(shí)驗(yàn)原理】 
此試劑盒基于ELISA技術(shù)。包被板中包被了抗人IgG抗體，如果人血清或血漿中含有IgG時(shí)，則會(huì)與其特異性結(jié)合，洗板將未結(jié)合的物質(zhì)洗去， 然后加入基孔肯雅抗原溶液，洗板洗去未結(jié)合的物質(zhì)，然后加入鏈霉親和素和基孔肯雅抗體酶聯(lián)物。洗板后，加入TMB底物液，顏色變成藍(lán)色，加入終止液終止反應(yīng)，顏色由藍(lán)色轉(zhuǎn)為黃色，zui后用酶標(biāo)儀在450nm處讀數(shù)。 
【試劑組成】 
包被板：12×8可拆卸，包被了抗人IgG抗體，密封在可重封鋁箔袋中 
基孔肯雅溶液1：1瓶包含6mL的基孔肯雅抗原溶液，即用，白蓋 
基孔肯雅溶液2：1瓶包含6mL的生物素化的基孔肯雅抗體，即用，藍(lán)色，白蓋 
基孔肯雅IgM陽(yáng)性質(zhì)控：1瓶，1.5mL，黃色，即用，紅蓋 
基孔肯雅IgM臨界質(zhì)控：1瓶， 2mL，黃色，即用，綠蓋 
基孔肯雅IgM陰性質(zhì)控：1瓶，1.5mL，黃色，即用，藍(lán)蓋 
樣本稀釋液： 1瓶包含100mL的即用緩沖液，用于稀釋樣本，pH7.2±0.2，黃色，白蓋 
洗滌液：1瓶，包含50mL  20倍濃縮的緩沖液，（pH7.2±0.2）用于洗板，白蓋 
鏈霉親和素結(jié)合液：1瓶包含6mL過(guò)氧化物酶結(jié)合的鏈霉親和素，即用，紅色，黑蓋 
TMB底物液：1瓶包含15mL  TMB，即用，黃蓋 
終止液：1瓶包含15mL，即用，內(nèi)含硫酸，0.2mol/l，紅蓋 
【需要的設(shè)備和材料】              
固定板
封板片 
酶標(biāo)儀（450/620nm）              
37℃孵箱 
洗瓶或自動(dòng)洗板機(jī)
10~1000μL的移液器
漩渦混勻器 
蒸餾水或去離子水
一次性試管
計(jì)時(shí)器 
【儲(chǔ)存和穩(wěn)定性】 
試劑在有效期內(nèi)，儲(chǔ)存于2-8℃穩(wěn)定 
【試劑準(zhǔn)備】 
洗滌液的準(zhǔn)備 
用雙蒸水稀釋洗滌液，例子：10ml洗滌液+190ml雙蒸水。稀釋好的洗滌液在室溫下5天內(nèi)有效。 
【樣本的采集和準(zhǔn)備】 
這個(gè)實(shí)驗(yàn)中使用的樣本是人血清和血漿，如果實(shí)驗(yàn)在樣本采集后的5天內(nèi)進(jìn)行，則需要儲(chǔ)存在2-8℃，否則，必須于-20℃到-70℃深度凍存。如果樣本是深度凍存的，在使用前，則需要充分混勻，避免反復(fù)凍融。 不推薦使用熱滅活的樣本 
【樣本的稀釋】 
將10μL樣本跟1ml的樣本稀釋液混勻，并用漩渦混勻器充分混勻。
【實(shí)驗(yàn)步驟】 
在開(kāi)始試驗(yàn)前，請(qǐng)仔細(xì)閱讀試驗(yàn)說(shuō)明。結(jié)果的可信度是依賴于嚴(yán)格地按照實(shí)驗(yàn)說(shuō)明來(lái)進(jìn)行的，鋪板時(shí)zui少留1個(gè)孔為空白對(duì)照（A1）1個(gè)陰性質(zhì)控孔（B1）2個(gè)臨界質(zhì)控孔（C1+D1）1個(gè)陽(yáng)性質(zhì)控孔（E1）。開(kāi)始試驗(yàn)前，請(qǐng)將所有試劑都平衡到室溫 
1.  吸取50μL的質(zhì)控品和稀釋過(guò)的樣本到相應(yīng)的孔中，留A1孔做空白對(duì)照孔
2.  封板 
3.  在37±1℃下孵育1小時(shí)±5分鐘 
4.  當(dāng)孵育完成時(shí)，揭去封板片，棄去反應(yīng)液，每孔300μL洗滌液，洗板3次，避免溢出。每孔浸泡的時(shí)間都必須＞5秒，zui后拍板將殘留的液滴都拍去。 
5.  吸取50μL基孔肯雅溶液1到除了空白對(duì)照孔的每個(gè)孔中，蓋板 
6.  在室溫孵育30分鐘 
7.  重復(fù)步驟4 
8.  將基孔肯雅溶液2跟鏈霉親和素結(jié)合物混勻10分鐘 
9.  吸取50μL基孔肯雅溶液2跟鏈霉親和素的復(fù)合物到除了空白對(duì)照孔的每個(gè)孔中，蓋板。 
10.  室溫孵育30分鐘
11.  重復(fù)步驟4 
12.  吸取100μL的TMB底物液到每個(gè)孔中 
13.  避光孵育15分鐘（精確） 
14.  加入100μL終止液到每個(gè)孔中，與加TMB底物液時(shí)的間隔和順序都必須一樣 
15.  用酶標(biāo)儀在加入終止液后30分鐘內(nèi)與450/620nm處檢測(cè) 
【檢測(cè)】 
調(diào)整酶標(biāo)儀，以空白對(duì)照孔調(diào)零，以450nm處檢測(cè)所有孔的吸光度值。 
【結(jié)果】 
1.  檢測(cè)生效的條件 
只有以下條件符合，檢測(cè)的結(jié)果才能認(rèn)為的有效的  
空白對(duì)照孔    吸光度值＜0.100  
陰性質(zhì)控孔    吸光度值＜臨界質(zhì)控  
臨界質(zhì)控孔    吸光度值0.150-1.300  
陽(yáng)性質(zhì)控孔    吸光度值＞臨界質(zhì)控 
如果以上條件不符合的，那么試驗(yàn)結(jié)果則是無(wú)效的，需要重新檢測(cè)
2.  結(jié)果的計(jì)算 
臨界質(zhì)控平均吸光度值的計(jì)算，例子：吸光度1：0.39；吸光度2：0.37                                   
（0.39+0.37）/2=0.38    
平均吸光度值為0.38 
3.  結(jié)果的說(shuō)明 
樣本如果是比臨界值高出10%，則認(rèn)定為陽(yáng)性， 
樣本如果是在臨界值上下10%之內(nèi)，則認(rèn)定為灰色區(qū)（推薦在2-4周之后再次檢測(cè)新鮮的樣本，如果樣本仍然是灰色區(qū)，可以直接認(rèn)為是陰性） 
樣本如果是比臨界值低出10%，則認(rèn)定為陰性 
4.  結(jié)果的單位 
病人樣本平均吸光度值×10 = U   
臨界值 
例子： 1.216×10 =32U 
0.38 
臨界值： 10 U 
灰色區(qū)：9-11 U 
陰性： ＜9 U 
陽(yáng)性： ＞11 U

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    六、診斷及鑒別診斷
    （一）診斷依據(jù)。
    1. 流行病學(xué)資料：生活在基孔肯雅熱流行地區(qū)或12天內(nèi)有疫區(qū)旅行史，發(fā)病前12天內(nèi)有蚊蟲叮咬史。
    2. 臨床表現(xiàn)：急性起病，以發(fā)熱為*癥狀，病程2～5天出現(xiàn)皮疹，多個(gè)關(guān)節(jié)劇烈疼痛。
    3. 實(shí)驗(yàn)室檢查：
（1）血清特異性IgM抗體陽(yáng)性；
（2）恢復(fù)期血清特異性IgG抗體滴度比急性期有4倍以上增高；
（3）從患者標(biāo)本中檢出基孔肯雅病毒RNA；
（4）從患者標(biāo)本中分離到基孔肯雅病毒。
    （二）診斷標(biāo)準(zhǔn)。
    1. 疑似診斷：具有上述流行病學(xué)史和臨床表現(xiàn)；無(wú)流行病學(xué)史者，但具有上述典型的臨床表現(xiàn)。
    2. 確定診斷：疑似診斷基礎(chǔ)上具備診斷依據(jù)中實(shí)驗(yàn)室檢查任一項(xiàng)者。
    （三）鑒別診斷。
    1. 登革熱：基孔肯雅熱與登革熱的傳播媒介相同,流行區(qū)域基本相同, 臨床表現(xiàn)亦類似，與登革熱較難鑒別。基孔肯雅熱發(fā)熱期較短,關(guān)節(jié)痛更為明顯且持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，出血傾向較輕。鑒別有賴于實(shí)驗(yàn)室特異性檢測(cè)。
    2. O’nyong-nyong等甲病毒感染：O’nyong-nyong病毒、Mayaro病毒等甲病毒感染引起的臨床表現(xiàn)和基孔肯雅熱相似，不易根據(jù)臨床表現(xiàn)和一般實(shí)驗(yàn)室檢查進(jìn)行鑒別，需要通過(guò)特異性檢測(cè)進(jìn)行鑒別診斷。由于這些病毒之間存在抗原基孔肯雅熱叉，對(duì)血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果需要仔細(xì)分析。核酸檢測(cè)和病毒分離是鑒別這些病毒感染的主要方法。
    3. 傳染性紅斑：由細(xì)小病毒B19引起，首先出現(xiàn)顴部紅斑，伴口周蒼白，2～5天后出現(xiàn)軀干和四肢的斑丘疹。關(guān)節(jié)受損表現(xiàn)為多關(guān)節(jié)周圍炎，較多發(fā)生在近端指趾關(guān)節(jié)、掌關(guān)節(jié)，可侵犯腕、膝和踝關(guān)節(jié)。細(xì)小病毒B19特異性抗體和核酸檢測(cè)陽(yáng)性。
    4.其他： 本病還需與流感、麻疹、風(fēng)疹、傳染性單核細(xì)胞增多癥、風(fēng)濕熱、細(xì)菌性關(guān)節(jié)炎等疾病相鑒別。
    七、治療
    本病無(wú)*藥物治療，主要為對(duì)癥處理。
    （一）一般治療。
    發(fā)熱期應(yīng)臥床休息，不宜過(guò)早下地活動(dòng)，防止病情加重。采取防蚊隔離措施。
    （二）對(duì)癥治療。
    1. 降溫：對(duì)于高熱病人應(yīng)先采用物理降溫。有明顯出血癥狀的患者，要避免酒精擦浴。可使用非甾體消炎藥(NSAIDs)，避免使用阿司匹林類藥物。
    2. 止痛：關(guān)節(jié)疼痛較為嚴(yán)重者，可使用鎮(zhèn)痛藥物。
    3. 腦膜腦炎的治療：治療要點(diǎn)主要為防治腦水腫。可使用甘露醇、速尿等藥物降低顱壓。

美國(guó)NovaBios

我司還提供其它進(jìn)口或國(guó)產(chǎn)試劑盒：登革熱、瘧疾、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團(tuán)菌等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清、德國(guó)SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。

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Six, diagnosis and differential diagnosis
    (A) the basis for diagnosis.
    1. Epidemiological data: living in the popular area of ??Chikungunya or 12 days within the epidemic area travel history, 12 days before the onset of mosquito bites history.
    2. Clinical manifestations: acute onset, with fever as the first symptom, the course of 2 to 5 days rash, multiple joints severe pain.
    3. Laboratory inspection:
(1) serum-specific IgM antibody positive;
(2) the titer of serum-specific IgG antibody in convalescence was more than 4 times higher than that in acute stage.
(3) detection of Chikungunya virus RNA from patient specimens;
(4) isolating the Chikungunya virus from the patient's specimen.
    (B) diagnostic criteria.
    1. suspected diagnosis: the epidemiological history and clinical manifestations; no history of epidemiology, but with the typical clinical manifestations.
    2. to determine the diagnosis: based on the diagnosis of a diagnosis based on the laboratory in any of those who check.
    (C) differential diagnosis.
    1. Dengue Fever: Chikungunya fever and dengue the same media, popular areas are basically the same, clinical manifestations are similar, and dengue fever is difficult to identify. Chikungunya fever fever is shorter, joint pain is more obvious and longer duration, bleeding tendency lighter. Identification depends on laboratory-specific testing.
    2. O'nyong-nyong and other virus infection: O'nyong-nyong virus, Mayaro virus and other hepatitis A virus infection caused by clinical manifestations and Chikungunya heat similar, difficult to be based on clinical manifestations and general laboratory tests to identify, need Through the specific test for differential diagnosis. Because of the presence of antigen between these viruses, the results of serological tests need to be carefully analyzed. Nucleic acid detection and virus isolation are the primary methods of identifying these viral infections.
    3. Infectious erythema: caused by parvovirus B19, the first zygomatic erythema, with weeks of pale, 2 to 5 days after the trunk and limbs of the rash. Joint damage is manifested as polyarticular inflammation, more occurs in the proximal toe joint, palm joint, can be wrist, knee and ankle. Parvovirus B19 specific antibody and nucleic acid detection positive.
    4. Other: the disease and influenza, measles, rubella, infectious mononucleosis, rheumatic fever, bacterial arthritis and other diseases identified.
    Seven, treatment
    The disease without special effects of drug treatment, mainly for symptomatic treatment.
    (A) general treatment.
    Fever should be bed rest, not too early to activities to prevent exacerbations. Take anti-mosquito isolation measures.
    (B) symptomatic treatment.
    1. Cooling: for high fever patients should first use the physical cooling. Patients with obvious bleeding symptoms should avoid alcohol bathing. Non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) can be used to avoid the use of aspirin drugs.
    2. Pain: joint pain is more severe, can use analgesic drugs.
    3. Treatment of meningoencephalitis: treatment points mainly for the prevention and treatment of brain edema. Can use mannitol, furosemide and other drugs to reduce intracranial pressure.