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所 在 地廣州市
更新時(shí)間:2022-11-27 10:14:19瀏覽次數(shù):199次
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美國(guó)NovaBios基孔肯雅熱IgG/IgM抗體快速檢測(cè)試劑盒
廣州健侖生物科技有限公司
本公司專業(yè)供應(yīng)各種進(jìn)口品牌基孔肯雅熱檢測(cè)試劑盒,包括美國(guó)的NovaBios、德國(guó)NOVA、廣州創(chuàng)侖等CDC品牌。主要包括膠體金、酶免、PCR等方法學(xué)。歡迎咨詢
基孔肯雅熱IgM診斷試劑
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基孔肯雅病毒核酸檢測(cè)試劑盒(熒光探針PCR)
美國(guó)CDC的基孔肯雅病毒診斷試劑——美國(guó)的NovaBios
德國(guó)CDC使用的基孔肯雅病毒診斷試劑——德國(guó)NOVA
美國(guó)NovaBios基孔肯雅熱IgG/IgM抗體快速檢測(cè)試劑盒
【預(yù)期用途】
基孔肯雅IgG/IgM抗體ELISA檢測(cè)試劑盒主要用于定性檢測(cè)人血清和血漿中抗基孔肯雅病毒的IgG/IgM抗體。
【實(shí)驗(yàn)原理】
此試劑盒基于ELISA技術(shù)。包被板中包被了抗人IgG抗體,如果人血清或血漿中含有IgG時(shí),則會(huì)與其特異性結(jié)合,洗板將未結(jié)合的物質(zhì)洗去, 然后加入基孔肯雅抗原溶液,洗板洗去未結(jié)合的物質(zhì),然后加入鏈霉親和素和基孔肯雅抗體酶聯(lián)物。洗板后,加入TMB底物液,顏色變成藍(lán)色,加入終止液終止反應(yīng),顏色由藍(lán)色轉(zhuǎn)為黃色,zui后用酶標(biāo)儀在450nm處讀數(shù)。
【試劑組成】
包被板:12×8可拆卸,包被了抗人IgG抗體,密封在可重封鋁箔袋中
基孔肯雅溶液1:1瓶包含6mL的基孔肯雅抗原溶液,即用,白蓋
基孔肯雅溶液2:1瓶包含6mL的生物素化的基孔肯雅抗體,即用,藍(lán)色,白蓋
基孔肯雅IgM陽(yáng)性質(zhì)控:1瓶,1.5mL,黃色,即用,紅蓋
基孔肯雅IgM臨界質(zhì)控:1瓶, 2mL,黃色,即用,綠蓋
基孔肯雅IgM陰性質(zhì)控:1瓶,1.5mL,黃色,即用,藍(lán)蓋
樣本稀釋液: 1瓶包含100mL的即用緩沖液,用于稀釋樣本,pH7.2±0.2,黃色,白蓋
洗滌液:1瓶,包含50mL 20倍濃縮的緩沖液,(pH7.2±0.2)用于洗板,白蓋
鏈霉親和素結(jié)合液:1瓶包含6mL過(guò)氧化物酶結(jié)合的鏈霉親和素,即用,紅色,黑蓋
TMB底物液:1瓶包含15mL TMB,即用,黃蓋
終止液:1瓶包含15mL,即用,內(nèi)含硫酸,0.2mol/l,紅蓋
【需要的設(shè)備和材料】
固定板
封板片
酶標(biāo)儀(450/620nm)
37℃孵箱
洗瓶或自動(dòng)洗板機(jī)
10~1000μL的移液器
漩渦混勻器
蒸餾水或去離子水
一次性試管
計(jì)時(shí)器
【儲(chǔ)存和穩(wěn)定性】
試劑在有效期內(nèi),儲(chǔ)存于2-8℃穩(wěn)定
【試劑準(zhǔn)備】
洗滌液的準(zhǔn)備
用雙蒸水稀釋洗滌液,例子:10ml洗滌液+190ml雙蒸水。稀釋好的洗滌液在室溫下5天內(nèi)有效。
【樣本的采集和準(zhǔn)備】
這個(gè)實(shí)驗(yàn)中使用的樣本是人血清和血漿,如果實(shí)驗(yàn)在樣本采集后的5天內(nèi)進(jìn)行,則需要儲(chǔ)存在2-8℃,否則,必須于-20℃到-70℃深度凍存。如果樣本是深度凍存的,在使用前,則需要充分混勻,避免反復(fù)凍融。 不推薦使用熱滅活的樣本
【樣本的稀釋】
將10μL樣本跟1ml的樣本稀釋液混勻,并用漩渦混勻器充分混勻。
【實(shí)驗(yàn)步驟】
在開(kāi)始試驗(yàn)前,請(qǐng)仔細(xì)閱讀試驗(yàn)說(shuō)明。結(jié)果的可信度是依賴于嚴(yán)格地按照實(shí)驗(yàn)說(shuō)明來(lái)進(jìn)行的,鋪板時(shí)zui少留1個(gè)孔為空白對(duì)照(A1)1個(gè)陰性質(zhì)控孔(B1)2個(gè)臨界質(zhì)控孔(C1+D1)1個(gè)陽(yáng)性質(zhì)控孔(E1)。開(kāi)始試驗(yàn)前,請(qǐng)將所有試劑都平衡到室溫
1. 吸取50μL的質(zhì)控品和稀釋過(guò)的樣本到相應(yīng)的孔中,留A1孔做空白對(duì)照孔
2. 封板
3. 在37±1℃下孵育1小時(shí)±5分鐘
4. 當(dāng)孵育完成時(shí),揭去封板片,棄去反應(yīng)液,每孔300μL洗滌液,洗板3次,避免溢出。每孔浸泡的時(shí)間都必須>5秒,zui后拍板將殘留的液滴都拍去。
5. 吸取50μL基孔肯雅溶液1到除了空白對(duì)照孔的每個(gè)孔中,蓋板
6. 在室溫孵育30分鐘
7. 重復(fù)步驟4
8. 將基孔肯雅溶液2跟鏈霉親和素結(jié)合物混勻10分鐘
9. 吸取50μL基孔肯雅溶液2跟鏈霉親和素的復(fù)合物到除了空白對(duì)照孔的每個(gè)孔中,蓋板。
10. 室溫孵育30分鐘
11. 重復(fù)步驟4
12. 吸取100μL的TMB底物液到每個(gè)孔中
13. 避光孵育15分鐘(精確)
14. 加入100μL終止液到每個(gè)孔中,與加TMB底物液時(shí)的間隔和順序都必須一樣
15. 用酶標(biāo)儀在加入終止液后30分鐘內(nèi)與450/620nm處檢測(cè)
【檢測(cè)】
調(diào)整酶標(biāo)儀,以空白對(duì)照孔調(diào)零,以450nm處檢測(cè)所有孔的吸光度值。
【結(jié)果】
1. 檢測(cè)生效的條件
只有以下條件符合,檢測(cè)的結(jié)果才能認(rèn)為的有效的
空白對(duì)照孔 吸光度值<0.100
陰性質(zhì)控孔 吸光度值<臨界質(zhì)控
臨界質(zhì)控孔 吸光度值0.150-1.300
陽(yáng)性質(zhì)控孔 吸光度值>臨界質(zhì)控
如果以上條件不符合的,那么試驗(yàn)結(jié)果則是無(wú)效的,需要重新檢測(cè)
2. 結(jié)果的計(jì)算
臨界質(zhì)控平均吸光度值的計(jì)算,例子:吸光度1:0.39;吸光度2:0.37
(0.39+0.37)/2=0.38
平均吸光度值為0.38
3. 結(jié)果的說(shuō)明
樣本如果是比臨界值高出10%,則認(rèn)定為陽(yáng)性,
樣本如果是在臨界值上下10%之內(nèi),則認(rèn)定為灰色區(qū)(推薦在2-4周之后再次檢測(cè)新鮮的樣本,如果樣本仍然是灰色區(qū),可以直接認(rèn)為是陰性)
樣本如果是比臨界值低出10%,則認(rèn)定為陰性
4. 結(jié)果的單位
病人樣本平均吸光度值×10 = U
臨界值
例子: 1.216×10 =32U
0.38
臨界值: 10 U
灰色區(qū):9-11 U
陰性: <9 U
陽(yáng)性: >11 U
美國(guó)NovaBios基孔肯雅熱IgG/IgM抗體快速檢測(cè)試劑盒
2013年9月,據(jù)澳大利亞“新快網(wǎng)”報(bào)道,不少?gòu)陌屠鍗u等亞洲景點(diǎn)旅游回國(guó)的澳大利亞游客都感染了基孔肯雅病毒。報(bào)道稱,2013年頭9個(gè)月里,感染這種病毒的澳人增加至創(chuàng)紀(jì)錄的107人,而2011年同期才37人,2012年僅19人。
基孔肯雅熱(chikungunya fever)是由基孔肯雅病毒(chikungunya virus, CHIKV)引起,經(jīng)伊蚊傳播,以發(fā)熱、皮疹及關(guān)節(jié)疼痛為主要特征的急性傳染病。1952年*在坦桑尼亞證實(shí)了基孔肯雅熱流行,1956年分離到病毒。本病主要流行于非洲和東南亞地區(qū),近年在印度洋地區(qū)造成了大規(guī)模流行。
一、病原學(xué)
CHIKV屬于披膜病毒科甲病毒屬的Semliki forest(SF)抗原復(fù)合群。病毒直徑約70nm,有包膜,含有3個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白(衣殼蛋白C、包膜蛋白E1和E2)和4個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白(nsP1、nsP2、nsP3和nsP4)。CHIKV的基因組為不分節(jié)段的正鏈RNA,長(zhǎng)度約為11~12 kb。病毒基因組編碼順序?yàn)?’-NS1-NS2-NS3-NS4-C-E3-E2-E1-3’。通過(guò)病毒部分E1基因的系統(tǒng)發(fā)生分析可將CHIKV分為3個(gè)組:第1組包含了全部西非的分離株,第2組是亞洲分離株,東、中、南部非洲的分離株構(gòu)成了第3組。
CHIKV可在Vero、C6/36、BHK-21和HeLa等細(xì)胞中繁殖并產(chǎn)生細(xì)胞病變。對(duì)血細(xì)胞如原代淋巴細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞等不敏感。CHIKV可感染非人靈長(zhǎng)類、乳鼠等動(dòng)物。
CHIKV對(duì)理化因素的抵抗力較弱,對(duì)酸、熱、脂溶劑、去污劑、漂基孔肯雅熱、酚、70%酒精和甲醛敏感。
二、流行病學(xué)
(一)傳染源。
人和非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物是CHIKV的主要宿主。急性期患者、隱基孔肯雅熱染者和感染病毒的非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物是本病的主要傳染源。
1. 患者:基孔肯雅熱急性期患者是主要傳染源。人患該病時(shí),在發(fā)病后2~5天內(nèi)可產(chǎn)生高滴度病毒血癥,有較強(qiáng)的傳染性。
2.隱基孔肯雅熱染者:是CHIKV的重要傳染源。
3.非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物:在叢林型疫源地內(nèi),亦為本病的主要傳染源。已證實(shí)非洲綠猴、狒狒、紅尾猴、黑猩猩、長(zhǎng)臂猿、獼猴和蝙蝠可自然或?qū)嶒?yàn)感染CHIKV,并能產(chǎn)生病毒血癥。
美國(guó)NovaBios
我司還提供其它進(jìn)口或國(guó)產(chǎn)試劑盒:登革熱、瘧疾、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲(chóng)病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團(tuán)菌等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清、德國(guó)SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。
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In September 2013, according to the Australian "new fast network" reported that many tourists from Bali and other Asian tourists return to Australia tourists are infected with Chikungunya virus. In the first nine months of 2013, the number of Australians infected with the virus increased to a record 107, compared with 37 in 2011 and 19 in 2012.
Chikungunya fever (chikungunya fever) is caused by Chikungunya virus (CHIKV), caused by Aedes mosquito, fever, rash and joint pain as the main feature of acute infectious diseases. In 1952 for the first time in Tanzania confirmed the Chikungunya hot epidemic, isolated virus in 1956. The disease is mainly prevalent in Africa and Southeast Asia, in recent years in the Indian Ocean region caused a large-scale epidemic.
A, etiology
CHIKV belongs to the Semliki forest (SF) antigen complex of Phytophthora. The virus has a diameter of about 70 nm and is coated with three structural proteins (capsid protein C, envelope protein E1 and E2) and four nonstructural proteins (nsP1, nsP2, nsP3 and nsP4). The genome of CHIKV is a non-segmented positive strand RNA with a length of about 11-12 kb. The viral genome is encoded in the order 5'-NS1-NS2-NS3-NS4-C-E3-E2-E1-3 '. CHIKV can be divided into three groups by phylogenetic analysis of the E1 gene in the viral fraction. Group 1 contains all isolates of West Africa, the second group is an Asian isolate, and the isolates in the eastern, central and southern Africa form the third group.
CHIKV can reproduce in Vero, C6 / 36, BHK-21 and HeLa cells and produce cytopathic lesions. It is not sensitive to blood cells such as primary lymphocytes, T lymphocytes, B lymphocytes and monocytes. CHIKV can infect non-human primates, suckling rats and other animals.
CHIKV is less resistant to physical and chemical factors, sensitive to acid, heat, fat solvents, detergents, drift-based Kenya heat, phenol, 70% alcohol and formaldehyde.
Second, epidemiology
(A) the source of infection.
Human and non-human primates are the main host of CHIKV. Patients with acute phase, Hidden Cecilia and those infected with non-human primates are the main source of the disease.
1. Patients: Chikungunya fever in patients with acute phase is the main source of infection. People suffering from the disease, in the 2 to 5 days after the onset can produce high titer viremia, a strong contagious.
2. Hidden Cave Kenya Heat Dye: is an important source of CHIKV.
3. Non-human primates: in the jungle-type foci, is also the main source of the disease. It has been confirmed that African green monkeys, baboons, redtail monkeys, chimpanzees, gibbons, macaques and bats can naturally or experimentally infect CHIKV and produce viremia.
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