傳代細胞 染色體G顯帶技術
1. 實驗原理 人們用物理、化學因素處理后，再用染料對染色體進行分化染色，使每條染色體上出現明暗相間，或深淺不同帶紋的技術稱為顯帶技術（banding technique）。染色帶的數目、部位、寬窄和著色深淺均具有相對穩定性，所以每一條染色體都有固定的分帶模式，即稱帶型。染色體帶型是鑒別染色體的重要依據。染色體分帶技術可分為兩大類，一類是產生的染色帶分布在整條染色體的長度上如：G、Q和R帶；另一類是局部性的顯帶，它只能使少數特定的區域顯帶，如C、T和N帶。
染色體帶型的形成主要取決于DNA、核酸結合蛋白及染料三者的相互作用，主要是指DNA的堿基組成以其與結合蛋白形成的特定結構對染料分子的作用。Summer（1974）的實驗表明，DNA分子的螺旋及折疊非組蛋白蛋白質的分布在染色體上呈區域性差異，這些差異導致二硫鍵與硫氫鍵分布不同，深染區由許多二硫鍵交聯，因為它易與染料結合；而淺染區則缺乏二硫鍵、多硫氫鍵，不易與染料結合而呈淺色傳代細胞 染色體G顯帶技術。此外，由于染色體內DNA的堿基分布不同而造成DNA螺旋，折疊的程度也不同，繼而影響到結合蛋白的分布與構型，與染料結合后呈現深淺不同的帶紋。
G帶即吉姆薩帶，是將處于分裂中期的細胞經胰酶或堿、熱、尿素等處理后，再經吉姆薩染料染色后所呈現的區帶，是目前被廣泛應用的一種帶型。其特性是顯帶方法簡單恒定，帶型穩定，保存時間長。一般認為，易著色的陽性帶為含有AT多的染色體節段，在間期核呈固縮狀態，而且是DNA晚復制區之一，有相當一部分中度重復序列DNA可能在G帶區；相反，含GC多的染色體段則不易著色。也有人認為，Giemsa染料在G帶區是與DNA結合，而且與結合DNA的染色質非組蛋白有關。總的來說，G顯帶的機制還未搞清。
2. 實驗對象 體細胞培養后制備的染色體標本；淋巴細胞培養后制備的染色體標本。
3. 試劑與器材
傳代細胞 染色體G顯帶技術（1）用具：離心管，離心機，天平，37℃溫箱，載玻片，蓋玻片，恒溫水浴鍋，光學顯微鏡，標本板，玻璃鉛筆，定時鐘，染色缸，直柄虹膜鑷，滴管。
（2）藥品：pH6.8 PBS，Giemsa，0.025%胰蛋白酶（取0.9%氯化鈉100ml，加0.25%胰蛋白酶1ml）。
4. 實驗步驟
（1）將制好的染色體標本，置72℃～75℃烤箱中烤片3h。
（2）放入預溫至37℃的0.025%胰酶溶液中（pH=7.2～7.4）消化1min左右，每次的作用時間并不*相同，可先試一張片子，再根據顯帶效果調整胰酶作用時間。
（3）在Giemsa 染液中染色10min，自來水沖洗干凈，晾干后，即可閱片。
（4）鏡檢：在顯微鏡高倍目鏡下檢查顯帶標本，在染色體上若出現清晰的深淺相間的帶型，即為可取標本，可供攝像分析
5. 注意事項
（1）胰蛋白酶濃度和處理時間隨氣溫高低有所不同。一般規律是標本存放時間越長，在胰蛋白酶當中處理時間越長。太新鮮的標本，染色體會出現毛茸現象。片齡很長的標本往往會導致斑點狀的染色體。
（2）胰蛋白酶溫度：溫度越高，反應的速度就越快，一般是室溫，但溫度必須穩定至少20min。
（3）胰蛋白酶處理的時間：如果細胞呈紫藍色，說明胰蛋白酶的作用時間不夠，如果細胞呈桃紅色，說明作用時間剛好。
